儿童细菌性腹泻常见病原菌临床特征及耐药性差异分析

目的分析儿童细菌性腹泻常见病原菌临床特征及耐药性差异,为临床抗感染治疗提供依据.方法收集177例感染性腹泻儿童粪培养分离的病原菌及临床资料,法国梅里埃VITEK2全自动微生物鉴定及药敏分析仪行鉴定和药敏试验,WHONET56软件进行耐药性分析.结果感染沙门菌和致病性大肠埃希菌的患者都出现发热、呼吸道感染和胃肠道症状;感染沙门菌的患者病程长,排便次数多,粪常规脓球比例增加,血常规白细胞和C反应蛋白(CRP)明显升高;而感染致病性大肠埃希菌的患者病程短,排便次数少,血常规白细胞和CRP轻度升高,气单胞菌无明显症状且病程短,血常规白细胞明显升高但CRP正常.沙门菌和致病性大肠埃希菌耐药性明显高于气单胞菌,3种菌对碳青霉烯类和头孢哌酮/舒巴坦都100%敏感.结论医师可根据临床症状和快速实验室检查大致判断腹泻感染病原菌类型,在培养结果未出来之前根据以往的耐药监测数据经验用药.

5种纤维蛋白原测定方法的比较

对我国常用的纤维蛋白原测定方法———亚硫酸钠盐析法、热浊度法、免疫浊度法和PT der法与NCCLS推荐的克劳斯法进行了比较。研究表明盐析法、热浊度法等物理化学方法与克劳斯法结果存在较大差异 ,免疫浊度法差异也较大 ,PT der法与克劳斯法差异较小。建议我国临床实验室应尽快采用准确。

福州地区健康体检女性宫颈HPV感染基因型检测及分析

目的分析福州地区健康体检女性人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）的亚型分布特点，为宫颈癌防治、HPV疫苗的开发与应用提供借鉴依据。方法对2010年3月～2011年11月来福建第二人民医院体检中心妇科体检的女性2017例，采集宫颈脱落细胞，采用基因芯片技术，进行常见23种HPVDNA亚型（包括18种高危型和5种低危型）的分型检测，分析HPV感染率、亚型、多重感染等特征；并对其中1493例，以5岁为一年龄段，分析HPV感染的年龄分布特点。结果在2017例标本中，共检出HPV阳性632例，检出率为31．33％。高危型以HPV52（6．89％），HPV16（6％），HPV58（5．5％），HPV66（2．77％）和HPV51（2．57％）为常见；低危型以HPV11（4．27％）和HPV6（4．11％）为常见。单一型别感染检出率为17．35％（350／2017），单一高危型感染的比例（13．29％）高于单一低危型感染的比例（4．06％）。多重（2种或2种型别以上）感染检出率为13．98％（282／2017），表现为多重高危感染（7．33％）和多重高低危混合感染（6．64％）。在1493例中，以20-49岁年龄为主，占所有送检标本的93．5％。两个感染率的高峰为20～24岁（7．64％）和35～39岁（6．63％）。结论福州地区HPV感染以高危型为主，前5位的亚型是HPV52，16，58，11和6。多重感染以二重和三重感染最常见，感染高峰在20～24岁。

507例男性不育症患者细胞遗传学分析

作者对 5 0 7例男性不育患者进行外周血染色体检查 ,检出异常核型者 94例 ,检出率为 18.5 4% (94/5 0 7)。其中性染色体数目和结构异常者 76例 ,以克氏征为最多 ;常染色体异常者有 17例 ,以平衡易位为主 ;46 ,XX男性 1例。本文结合文献阐述了Y染色体的结构和功能 ,并重点对 5例 46 ,XY(小Y)、2例 46 ;XY ,i(Yp)和 3例 46 ,Xdel(Yqll→qter)引起少精子、无精子或精子活力异常及 1例 46 ,XX男性进行了讨论。

抗Hp IgG抗体和胃蛋白酶原联合检测在早期胃癌筛查中的应用进展

胃癌是世界第四大常见肿瘤,东亚（日本、中国）、东欧、中美洲和南美洲是胃癌的高发区[1].胃癌的发生与胃部细菌感染密切相关,其中幽门螺杆菌（Hp）最为常见[2-3].较长的病史为胃癌癌前病变的检测和及时有效的干预提供了机会[4].因此,早期发现胃癌是提高胃癌生存率、降低死亡率的关键.

福州地区健康体检人群脂肪肝患病现况分析

目的调查福州地区健康体检人群脂肪肝患病率以及年龄分布特征,并探讨脂肪肝的健康管理方案。方法对2011年1—3月,在福建中医药大学附属第二人民医院健康体检中心进行健康体检的11 343例个体进行调查,根据脂肪肝超声诊断标准,将脂肪肝分为轻度、中度、重度,并按性别、年龄分组进行统计学分析。结果福州地区体检人群脂肪肝的总患病率为20.43%,男性(28.77%)高于女性(10.68%),差异有统计学意义(P<0.01)。脂肪肝的总患病率随着年龄增长而增加。性别分层后,在20～59岁各年龄组间,男性脂肪肝患病率均高于女性,差异有统计学意义(P<0.01)。在60～69岁和≥70岁2个年龄组,女性患病率略高于男性,但差异无统计学意义。结论福州地区健康体检人群的脂肪肝患病率与其他城市相近,并呈年轻化趋势。提倡定期健康体检,及时发现脂肪肝,并通过健康教育,早期防治脂肪肝。

重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体

背景与目的:构建UGRP1基因启动子的定点突变表达载体。材料与方法:以插入UGRP1基因正常启动子的质粒pGL3-UGRP1(-112G)为模板,用重叠延伸PCR定点诱变技术,对-112位点的碱基进行定点突变,并构建定点突变表达载体。结果:DNA测序表明,UGRP1基因启动子-112处的碱基已由G突变为A,成功实现定点诱变。结论:重叠延伸PCR定点诱变技术高效、简便。pGL3-UGRP(-112A)的成功构建,为进一步研究-112G/A多态性对该基因转录活性的影响奠定了基础。

Graves病相关的易感基因研究进展

Graves（graves’disease，GD）病是一种器官特异性自身免疫病，是一种由多个基因与环境因素参与的多基因病。尽管进行了大量的研究，GD的遗传学机制至今尚未阐明。与GD发病相关的候选基因主要分成两大类：①与机体免疫调节有关的基因：②与甲状腺生理机能调节有关的基因。现就GD易感性研究最多的基因点LM、CTLA-4、TSH-R及一些细胞因子作一简要综述。

纤维蛋白原的生物化学及检测方法进展

纤维蛋白原（Ｆｉｂ）与消耗性凝血病、心血管疾病、糖尿病及恶性肿瘤等密切相关；Ｆｉｂ的遗传变异所致的出血或血栓性疾病及反复自发流产也屡见报道，Ｆｉｂ测定在临床上越来越受到重视。本文就纤维蛋白原的生物化学特性、遗传性缺陷及检测方法进展作一简要综述。

甲状腺转录因子-1融合表达载体的构建及体外活性鉴定

目的:构建人甲状腺转录因子-1(TTF1)编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并观察其蛋白质体外转录翻译情况。方法:据已知的TTF1基因序列,应用巢式PCR技术,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中扩增出TTF1基因,通过TA连接将其克隆入pGEM-T-easy载体,经测序鉴定后,双酶切插入真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)C中;重组质粒经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定后,进行蛋白质体外翻译观察TTF1体外表达情况,用电泳迁移率变动分析(EMSA)验证获得的体外翻译蛋白TTF1是否具有与下游靶基因UGRP1启动子结合的能力。结果:成功构建了含TTF1编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并能在体外表达TTF1蛋白。结论:能方便地获得TTF1体外翻译蛋白,为进一步研究TTF1蛋白与相应的DNA反应元件及其他转录因子的相互作用奠定了基础。

抗磷脂抗体靶抗原-β_2糖蛋白的原核表达和鉴定

目的 构建 β2 糖蛋白 (β2 - GPI)的原核表达载体并诱导其表达。方法 利用 PCR技术从 β2 - GPI昆虫表达载体中扩增出编码β2 - GPI目的 DNA片段 ,将其插入 GST融合表达载体 p GEX- 2 T多克隆位点 ,以 IPTG诱导 GST融合 β2 - GPI的表达。结果 凝胶电泳显示昆虫表达载体的 PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符。对重组质粒 (p GEX- 2 T- β2 - GPI)分析表明 ,插入片段的序列与发表的 β2 - GPI基因编码序列一致。在 IPTG的诱导下 ,BL 2 1重组菌高效表达出一个分子量约为 6 4 k Da产物 ,与预期相符。结论 β2 - GPI编码序列已被克隆至 GST融合表达载体 p GEX- 2 T。

一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别

目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对,确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏,但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型:基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型,所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言,尸体软骨组织是首选。

凝血因子Ⅶ基因突变的检测

目的 为检测福建省福州市一个遗传性凝血因子缺乏症先证者的因子Ⅶ基因突变类型。方法 采有ＰＣＲ结合限制性内切酶ＨｇｉＣＩ，以先证者及其母亲的 ＦⅦ基因片进行分析。结果表明先证者的 ＦⅦ基因为 Ｃ３２９Ｇ纯合子，其母亲为杂合子。结论 该家系为ＦⅦ基因存在Ｃ３２９Ｇ突变的第２个遗传性因子Ⅶ缺乏症家系。

病毒白细胞介素-10的基因克隆与原核表达

目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因。PCR产物经EcoRI和XhoI双酶切后,克隆至原核表达载体pET-28a中,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,在IPTG诱导下表达目的蛋白。结果:以终浓度为100μmol/L的IPTG于30℃诱导6h后,重组菌可高效表达相对分子质量(Mr)约为24000的His-vIL-10融合蛋白。结论:成功地克隆vIL-10的编码基因并在大肠杆菌中高效表达,为制备抗vIL-10单克隆抗体(mAb)、分析vIL-10结构与功能的关系提供了条件。

体外定点突变法构建凝血因子ⅦC329G突变型真核表达载体

以野生型凝血因子Ⅶ(FⅦ)真核表达载体为模板,通过定点突变方法构建FⅦC329G突变型表达载体;序列分析鉴定C329G突变重组子。重组子目的基因的序列分析结果显示FⅦ基因编码的第329个半胱氨酸残基被甘氨酸残基替换(C329G),即成功构建了FⅦC329G突变型真核表达载体,为下一步在哺乳类细胞中表达该突变型FⅦ,并对其进行功能性研究提供了条件。

血清透明质酸的变化与供肝冷缺血时间的关系

目的：探讨肝移植术中血清透明质酸浓度（HA）的变化与供肝低温保存冷缺血时间的关系。方法：根据低温保存时间的不同，将20例行原位肝移植术的患者分为A组（5—6h）、B组（8—9h）和C组（12h），分别在供肝血流再灌注后5、30、60、120和180min，取3组患者血清检测HA浓度。结果：供肝血流再灌注后，患者血清HA浓度逐步下降。A组平均下降速度为4．58μg／L·min^-1，B组为4．16μg／L·min^-1，C组为2．26μg／L·min^-1。A组和B组HA平均下降速度比较的差异无统计学意义（P〉0．05）；与C组相比，A组、B组平均下降速度的差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：供肝低温保存导致的肝内皮细胞损伤程度与供肝低温保存的时间呈正比，并以患者血清HA的下降速度表现出来。

形式规则、情感经验与社会逻辑:“二战”后新浪潮电影的媒介效应

电影是一种诞生于技术工业、面向大众的流行文化,也是创作者表情达意、在“物质世界的复原”[1]中探索生命与真理本源的一门艺术。自其诞生之日开始,它便深刻而广泛地联系着人类文明各个时期中的重大历史事件与思想潮流,这一具有社会联系性的功能可以用“媒介”一词加以概括。在第二次世界大战引起人类思想发生的变化后,电影的媒介效应在战后新浪潮电影中体现的尤为明显。社会变革带来的创新意识与电影家对艺术的献身精神在新浪潮中合二为一,催生出新的美学潮流。

EB病毒gp85N端片段的原核表达与初步鉴定

目的构建EB病毒基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。分析非糖基化的EB病毒包膜糖蛋白gp85N端截短片段的抗原性。方法采用基因工程技术,以B95-8细胞(美洲绒猴外周血B淋巴细胞经EBV转化后的细胞系)[1]培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒的BXLF2基因N端片段。PCR产物经HindⅢ和XhoⅠ双酶切,插入原核表达载体pGEX-5T中,构建pGEX5T-85N重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21中诱导表达gp85N蛋白。纯化表达的蛋白用Westernblot鉴定,并免疫BALB/c小鼠。结果序列分析表明,插入片段的序列与GenBank登录的参考序列完全一致。重组表达的蛋白的相对分子质量(Mr)约为45000,同预期的大小相符。以纯化的可溶性重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测获得了高效价的抗血清,且抗gp85单克隆抗体(mAb)可识别所表达的gp85N抗原。Westernblot显示,该抗原可与小鼠免疫血清起特异性反应。结论表达并纯化的EB病毒截短的gp85N重组蛋白具有良好的抗原性,为下一步分析所产生抗体的生物学特性提供了条件。

NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。

远逝的童话——评顾城诗的特点

顾城是我国新时期朦胧诗派的代表人物,被称为以一颗童心看世界的"童话诗人"。与其他朦胧诗派的作品相比,顾城的诗则显得别具一格,体现出冷峻忧伤、理想主义、唯美主义、主观、内向、崇尚自然等特点。其独特的诗歌构建与审美哲学对中国当代诗歌产生了较为深远的影响。