使用时差成像培养观察卵子形态异常对胚胎发育的影响

目的探讨使用时差成像培养卵子形态与胚胎质量的相关性,为胚胎选择提供依据。方法回顾性分析104例使用时差成像培养的体外受精(IVF)周期,比较形态异常与正常卵子发育参数指标方面的差异,及异常卵子比例对临床结局的影响。结果空泡组的2PN受精率及形状异常组的D3可用胚胎率显著低于正常组(P<0.01)。透明带异常组的D3优胚率低于正常组(P<0.05)。两种以上异常结构组的囊胚形成率低于正常组(P<0.05)。异常卵子组的可移植胚胎率及累积妊娠率显著下降(P<0.05)。结论卵子形态异常会对胚胎造成不良影响,异常卵子比例过高会降低可移植胚胎率。

应用时差成像培养系统观察早期胚胎的卵裂模式对其发育潜能的影响

目的:通过时差成像系统(TLI)观察早期胚胎的卵裂模式,探讨卵裂模式对早期胚胎发育潜能的影响。方法:回顾性分析2019年1月—2021年7月在中山市博爱医院生殖中心行辅助生殖助孕时通过时差成像系统进行囊胚培养的1318个胚胎的发育情况。依据双原核(2PN)受精卵的卵裂模式分为正常卵裂和异常卵裂,其中异常卵裂包括首次卵裂异常和非首次卵裂异常。分析不同卵裂模式组早期胚胎第3天(D3)的优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率及妊娠率、流产率等妊娠结局。结果:正常卵裂组和异常卵裂组的D3优质胚胎率分别为57.36%和39.47%、囊胚形成率分别为66.33%和36.62%、优质囊胚率分别为60.14%和27.61%,正常卵裂组均显著高于异常卵裂组(P<0.01);正常卵裂组与异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。在异常卵裂组中,首次卵裂异常组的D3优质胚胎率和优质囊胚率分别为34.45%和24.64%,均显著低于非首次卵裂异常组的D3优质胚胎率58.02%和优质囊胚率(37.66%),差异均有统计学意义(P<0.05),在2个异常卵裂组间临床妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胚胎的异常卵裂影响早期胚胎的发育潜能,异常卵裂发生的时间越早对胚胎发育影响越大。

同型半胱氨酸及C677T基因多态性与妊娠期糖尿病关系分析

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性。方法以91例GDM孕妇为GDM组,123例正常妊娠孕妇为对照组,检测MTHFR C677T基因多态性及血清Hcy、血糖水平。结果 GDM组Hcy水平高于对照组,Hcy水平与空腹血糖水平呈正相关(P<0.05)。GDM组与对照组MTHFR C677T多态性基因CC、CT、TT分布频率比较差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组TT型基因携带者Hcy水平高于CC型基因携带者(P<0.05)。结论 Hcy与GDM的发生、发展密切相关。MTHFR C677T基因多态性可能通过影响Hcy水平而影响GDM的发生、发展。

精液指标与体外受精助孕后孕早期自发性流产的相关分析

目的探讨男方精液指标与体外受精助孕患者孕早期自发性流产的相关性。方法回顾性分析该院接受体外受精助孕的夫妻251对,根据女方是否发生早期自发性流产分为研究组(98对)及对照组(153对),分析2组中男方的精子DNA碎片率、精子核蛋白不成熟率、正常形态精子百分率等指标。结果研究组男方的精子DNA碎片率、正常形态精子百分率、精子浓度、精子活力、前向精子活力等与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);研究组男方的精子核蛋白不成熟率大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);精子核蛋白不成熟率与早期自发性流产呈弱正相关(P<0.05)。结论精子成熟障碍与孕早期自发性流产相关,精子核蛋白不成熟率可用于评估体外受精助孕者孕早期自发性流产风险。

体外培养1d对玻璃化解冻卵裂期胚胎移植效果的影响

目的 探讨体外培养1 d对玻璃化解冻卵裂期胚胎移植效果的影响。方法 选择本中心2012年1~7月进行玻璃化冷冻并复苏的277周期卵裂期胚胎作为研究对象,根据解冻后是否多培养1 d分为对照组和实验组。对照组在解冻当天移植,共123周期。实验组解冻后多培养1 d,共154周期。实验组又分为培养后含桑葚胚组（A组）及无桑葚胚组（B组）。观察延长体外培养时间对妊娠结局的影响以及培养后胚胎发育情况与妊娠结局的关系。结果 实验组的妊娠率和着床率显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。A组的妊娠率与着床率显著高于B组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 体外培养1 d不影响玻璃化解冻后卵裂期胚胎的移植效果,延长培养时间有利于选择发育良好的胚胎并显著提高临床妊娠率和着床率。

优选后精子DNA碎片指数及与体外受精的关系

目的探讨优选前和优选后精子DNA碎片指数(DFI)的变化及其对体外受精(IVF)的影响。方法检测105例IVF助孕患者男方精液密度梯度离心优选前及优选后的精子DFI,分析优选前后精子DFI与IVF受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠结局等的关系。结果优选处理后精子DFI较处理前明显降低,差异有统计学意义[(13.88±8.63),(29.68±9.94),P<0.05];优选后的精子DFI与IVF受精率呈负相关关系(P<0.05)。结论优选后精子DFI与IVF受精率密切相关,其对IVF的受精率具有预测价值。

叶酸代谢相关基因及血清同型半胱氨酸与出生缺陷的相关性

目的:分析中山市孕妇中叶酸代谢关键酶基因多态性的分布,探讨不同基因型及个体化补充叶酸对血清同型半胱氨酸(Hcy)水平和出生缺陷的影响。方法:选取2013年734名在本院进行孕检的孕妇,于第1次孕检时检测孕妇MTHFR C677T、A1298C及MTRR A66G位点情况及血清Hcy水平,根据基因检测结果分为研究组(382例)及对照组(352例),分别给予800和400μg/d叶酸至孕3个月,观察Hcy变化情况,追踪新生儿出生情况,分析两组出生缺陷有无差异。结果:734名孕妇中,C677 TT、A1298 CC和A66GG三种纯合突变基因型频率分别为8.04%、4.36和7.36%。补充叶酸前对照组与研究组Hcy水平差异有统计学意义(P<0.05),个体化补充叶酸后两组间Hcy水平及出生缺陷发生率差异无统计学意义(P>0.05)。补充叶酸前Hcy水平≥8.55μmol/L时,预示叶酸利用能力为中度或高度风险的敏感度为80.9%,特异性为71.4%。结论:孕妇进行叶酸代谢基因多态性及Hcy检测,并根据叶酸利用能力个体化补充叶酸,可以降低出生缺陷的发生。

血清同型半胱氨酸及亚甲基四氢叶酸还原酶与先兆流产相关性研究

目的探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)水平及亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)C677T、A1298C位点多态性与先兆流产的关系。方法以93例先兆流产患者为病例组,99例健康孕妇为对照组,采用荧光定量PCR技术检测MTHFR基因C677T和A1298C位点多态性,同时应用酶循环法测定血清Hcy水平。比较病例组和对照组间基因型分布频率和血清Hcy水平差异。结果病例组血清Hcy水平明显高于对照组;高Hcy是先兆流产的危险因素(OR=2.056,P=0.016);MTHFR C677TT基因型携带者血清Hcy水平明显高于其他基因型;A1298CC基因型携带者血清Hcy水平明显高于AA野合型;病例组A1298CC纯合基因频率明显高于对照组;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Hcy升高是导致先兆流产的重要危险因素;MTHFR A1298CC纯合突变可致血清Hcy水平升高与先兆流产的发生有一定的相关性。

牛-兔种间重组胚体外发育能力的研究

以超排的青年母兔和经产母兔卵母细胞为受体细胞,以处于休眠期和非休眠期的黑毛和牛耳成纤维细胞为核供体,共获得180枚种间重组胚,采用M199+10%FBS和RD+10%FBS2种培养液进行体外培养,有112枚发育到2-细胞期(62.2%),26枚发育到桑椹胚期(14.4%),20枚发育到囊胚期(11.1%)。结果显示,供体细胞处于休眠期与否,对重组胚的卵裂率无显著影响(P<0.05),但以休眠期细胞为核供体的重组胚8-细胞～16-细胞胚的发育率及桑椹胚发育率显著高于非休眠期细胞的重组胚(P<0.05),二者在囊胚发育率上差异极显著(P<0.01);以M199为培养液的胚胎在卵裂率、桑椹胚发育率和囊胚发育率上与RD组无显著差异(P>0.05)。

德国荷斯坦牛与中国荷斯坦牛性能比较

选择德国荷斯坦育成牛95头(12￣18月龄),成母牛129头(1￣6胎)及中国荷斯坦育成牛111头(12￣18月龄)、成母牛164头(1￣6胎);分别测定其体尺、体重及生产性能,并对两国荷斯坦牛体型、生长发育、生产性能和繁殖性能等指标进行比较分析,研究现行饲养管理水平对德国荷斯坦牛性能的影响。结果表明:德国荷斯坦牛早期生长发育快,12月龄体尺、体重极显著地大于中国荷斯坦牛(p<0.01),德国荷斯坦牛各胎次产乳量、乳脂率均极显著地高于中国荷斯坦牛(p<0.01),德国荷斯坦牛情期受胎率较中国荷斯坦牛低(p<0.01),育成牛初配月龄明显晚于中国荷斯坦育成牛(p<0.05)。产间距德国荷斯坦牛较中国荷斯坦牛略长,但差异不明显(p>0.05)。

不孕不育患者血清AMH、FSH、LH、E2水平的表达及其与卵巢功能的相关性

目的了解不孕不育患者血清抗苗勒氏管激素(AMH)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平的表达及其与卵巢功能的相关性。方法选取198例不孕症患者,根据患者卵巢功能分为卵巢功能正常组和卵巢功能异常组,同时选取同期84例体检健康女性作为对照组。比较3组血清AMH、FSH、LH和E2水平,并分析指标与卵巢功能的相关性。结果卵巢功能异常组的E2、FSH、LH水平低于卵巢功能正常组和对照组,AMH水平则高于其他两组(P<0.01)。卵巢功能正常组的各项指标与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。E2、LH、FSH与卵巢功能呈正相关(r分别为0.205、0.236、0.240,均P<0.05);AMH与卵巢功能呈负相关(r=-0.215,P<0.05)。结论血清AMH、FSH、LH、E2的表达与不育不孕患者卵巢功能有关,对辅助生殖技术检查具有重要的价值。

回顾性分析丈夫精子情况与宫腔内夫精人工授精临床妊娠率的关系

目的对宫腔内夫精人工授精夫妇的丈夫精子资料进行回顾性分析，观察不同精子情况与临床妊娠率的关系。方法选择2004年～2012年因不孕症在中山市博爱医院生殖医学中心进行宫腔内人工授精（IUI）治疗的夫妇1646对共3178个周期。根据丈夫精子分为畸形精子症、畸弱精子症、弱精子症、少精子症、少弱精子症、少弱畸精子症、精浆异常、正常精液8组。观察总结临床妊娠率与丈夫精子情况的关系。结果总体IUI临床妊娠率为12．4％（394／3178）。8组丈夫精子情况与临床妊娠率均无明显关系。结论IUI临床妊娠率受多种因素影响，与丈夫精子情况无明显相关性。

低评分胚胎继续囊胚培养研究

目的:探讨第3天形态学低评分胚胎体外囊胚培养的发育潜能及其临床价值。方法:收集2013年6月至2016年6月中山市博爱医院生殖中心体外授精胚胎移植/显微授精(IVF/ICSI-ET)治疗周期中受精后第3天(D3)非优质胚胎,继续囊胚培养至第5天/第6天(D5/D6),观察其囊胚形成情况,并分析继续培养后获得胚胎的个数及这些胚胎移植或冻融后移植的临床结局。结果:共收集281个取卵周期725枚低评分胚胎进行囊胚培养,共形成246个囊胚(33.93%),其中优质胚胎79枚(32.11%)。新鲜移植68周期,临床妊娠率29.41%;全胚冷冻70周期,冻融移植周期41例,临床妊娠率39.02%。结论:D3低评分胚胎具备程度不同的发育潜能,对其进行继续培养可将发育潜能存在的胚胎有效筛查出,进而使胚胎的利用率以及累计妊娠率均可得到提高。

三种冻融胚胎移植临床结局研究

目的:探讨并比较不同冻融胚胎移植的临床结局。方法:回顾性分析自2017年4月至2018年4月在本中心进行IVF-ET(体外受精和胚胎移植)的患者,共分为三组:A组,冻融囊胚期胚胎,应用体外培养方式,待培养时间达到120min后将其移植;B组,冻融卵裂期胚胎,凭借体外培养手段将其养至囊胚,以便为移植操作做准备;C组,冻融卵裂期胚胎,体外培养120min后移植。对比分析A组、B组、C组胚胎移植后的临床妊娠率和种植率。结果:冻融卵裂期胚胎行囊胚培养共400个周期,取消周期58例,临床妊娠率58.95%,种植率37.43%。冻融囊胚期胚胎652个周期,取消周期1例,临床妊娠率69.59%,种植率50.63%。冻融卵裂期胚胎1060例,取消周期9例,临床妊娠率49.00%,种植率28.37%。结论:B组妊娠率和种植率显著高于A组或C组妊娠率与种植率;两组囊胚培养的妊娠率和种植率均显著高于卵裂期胚胎期妊娠率及种植率。

脱氢表雄酮对卵巢低反应患者妊娠结局及卵泡液的影响

目的探讨脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)对于卵巢低反应(poor ovarian response,POR)患者妊娠结局及卵泡液标志物的影响。方法采用前瞻性随机对照研究将85例POR患者随机分为用药组与对照组。用药组(n=41)给予DHEA 25 mg/次,每天3次,连用12周。对照组(n=44)直接进入周期。比较两组的卵巢反应性指标(促性腺激素总量、平均获卵数、卵裂数、平均可利用胚胎数、平均优质胚胎数、新鲜周期临床妊娠率和累计活产率)并检测两组卵泡液中的抗苗勒管激素(anti-Müllerian,AMH)、胰岛素样生长因子-1(insulinlike growth factor-1,IGF-1)及生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)在卵泡液中的含量。结果两组患者卵巢反应性指标差异无统计学意义(P>0.05)。HCG日血清FSH、E2、子宫内膜厚度等差异无统计学意义(P>0.05)。卵泡液中AMH、IGF-1、DHEA-s和GDF-9的相对表达量在两组中差异无统计学意义(P>0.05)。结论POR患者在促排卵周期前进行DHEA预处理并不能改善其妊娠结局且对卵泡液中标志物的表达无明显改善。

胚胎复苏后体外孵育时间对不同年龄患者妊娠结局的影响

比较胚胎复苏后体外孵育时间对不同年龄段患者妊娠结局的影响。方法 2018年1月-2021年3月在我院生殖中心行冻融胚胎移植助孕的7444例患者的临床资料,分别比较<35岁和≥35岁的患者中,分裂胚和囊胚解冻后至移植前经“短时间孵育”(孵育时长<4 h)和“长时间孵育”(孵育时长4-6 h)的临床妊娠结局。结果 在年龄<35岁的患者,无论行分裂胚移植还是囊胚移植,胚胎解冻后短时间孵育组和长时间孵育组,其临床妊娠率、着床率均无明显统计学差异(P>0.05)。而在年龄≥35的患者,对于分裂胚胎,移植前长时间孵育组的着床率和临床妊娠率分别为30.84%和20.8%,显著高于短时间孵育组的24.06%和16.84%。对于囊胚,移植前长时间孵育组的着床率和临床妊娠率与短时间孵育组相比,虽然无明显差异,但是有增加的趋势。分裂胚与囊胚长时间孵育组的流产率与多胎率与短时间孵育组相比,均无明显的统计学差异;结论 对于年龄≥35岁的患者中,复苏周期的胚胎在移植前经过4-6 h的长时间孵育,对改善分裂胚移植患者的临床妊娠结局有明显的积极作用,对改善囊胚移植的患者的临床妊娠结局可能有积极作用。

3178周期宫腔内夫精人工授精临床结局及其影响因素分析

目的:评估宫腔内夫精人工授精(IUI)的临床结局及其影响因素。方法:回顾性分析行IUI治疗的1 646对夫妇共3 178个周期的临床资料,分析临床妊娠率及其与女方年龄、不孕类型、不孕病因、是否促排卵治疗、IUI时机、IUI周期次数的关系。结果:IUI临床妊娠率为12.4%(394/3 178);对临床妊娠率有统计学意义的影响因素是女方年龄、不孕病因、是否促排卵治疗;而不孕类型、IUI时机、IUI周期次数不影响临床妊娠率。结论:女方年龄、不孕病因、是否促排卵治疗均可影响妊娠率,治疗时应综合考虑多种因素的影响。

体外授精受精率及优胚率与精子参数的相关性分析

目的研究体外授精受精率及优胚率与精子参数的相关性。方法选择2014年1月至10月在本中心接受体外授精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的夫妇,排除女方因素影响,常规检测精子参数,分析与胚胎受精率及优胚率的相关性。结果体外授精受精率与精子顶体酶活性定量呈正相关,而与精子的其他常规参数无明显相关性。优胚率与核蛋白不成熟精子百分率、精子DNA损伤率呈负相关,而与其他参数无相关性。结论临床中应重视精子功能检查,有针对性的提高精子质量,获得更好的治疗效果。

Y染色体微缺失患者通过卵胞浆内单精子注射垂直传递

目的检测1对父子的Y染色体微缺失,探讨这种遗传学缺陷的垂直传递问题。方法父亲Y染色体微缺失检测采用多重PCR扩增-电泳法,父亲表现为原发性不育症、严重少精子症,通过卵胞浆内单精子注射技术,生育1儿子,儿子Y染色体微缺失检测采用PCR荧光探针法。结果父子均检测出Y染色体微缺失,且均具有相同的缺失位点,SY254、SY255缺失。结论 Y染色体微缺失可通过辅助生殖技术实现父子间的垂直传递。