Box-Behnken响应面法结合BP神经网络优化黑胡椒脐贴处方研究

目的采用Box-Behnken响应面法结合BP神经网络优化黑胡椒脐贴处方。方法在前期预试验的基础上,以载药量、促渗剂用量、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)6000与微粉硅胶的比例为影响因素,进行单因素试验。结合体外透皮试验,利用高效液相色谱法测定胡椒碱的含量,对胡椒碱峰面积、指纹图谱的总峰面积和脐贴的成型性、剥离残留度和基质填充情况赋以权重,所得结果为综合评价指标。在单因素试验的基础上利用Box-Behnken响应面法结合BP神经网络优化脐贴处方。结果黑胡椒脐贴的最佳处方为载药量7%、氮酮4.5%、PEG6000与微粉硅胶的质量比为43∶1。结论黑胡椒脐贴的处方合理,可为后续贴剂的药效学研究提供基础。

决明子脐贴对慢传输型便秘大鼠的治疗作用及谱效关系

目的研究决明子脐贴对慢传输型便秘(STC)大鼠的治疗作用及谱效关系。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、便秘贴阳性对照组和决明子脐贴低、中、高剂量组,6只/组。以复方地芬诺酯混悬液连续灌胃14d建立STC大鼠模型。造模成功后,将决明子脐贴按低、中、高剂量(41.75、125.25、375.75 mg/kg)固定于大鼠腹部神阙穴处,连续给药14 d,以便秘贴(13.33mg/kg)为阳性对照组,空白对照组与模型组给予等体积的纯水灌胃。观察大鼠的一般情况,计算大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察大鼠结肠病理改变,测定大鼠血清中NO、NOS水平以及结肠组织中总蛋白含量、NO、NOS、AChE水平。建立决明子脐贴的HPLC指纹图谱,采用均值法和灰色关联度分析法研究决明子脐贴共有峰与对STC大鼠治疗作用的谱效关系。结果决明子脐贴能提高大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察未发现结肠组织有病理学改变。与空白对照组比较,模型组大鼠血清与结肠中的NO、NOS水平上升(P<0.05,P<0.01),AChE水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清与结肠中NO、NOS水平下降(P<0.05,P<0.01),AChE水平上升(P<0.05,P<0.01)。6批决明子脐贴共确认28个共有峰,根据谱效关系得到的关联度与关联序结果显示,决明子脐贴中各成分对STC大鼠的治疗作用贡献度不同,其中橙黄决明素的贡献最大。结论决明子脐贴通过不同给药剂量的多种活性成分协同发挥对STC大鼠的治疗作用,其中橙黄决明素、大黄酸、黄决明素、决明素、美决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚是决明子脐贴治疗STC的主要药效成分群。

决明子总蒽醌提取物抗氟尿嘧啶致小鼠肝损伤的谱效关系

目的研究决明子总蒽醌提取物抗氟尿嘧啶(5-Fu)致小鼠肝损伤的谱效关系,明确其药效成分群。方法通过腹腔注射5-Fu建立小鼠肝损伤模型,以联苯双酯为阳性对照,检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)以及肝组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)的活性,考察决明子总蒽醌提取物(0.4、0.8和1.6 g/kg)抗5-Fu致小鼠肝损伤的作用。建立10批决明子总蒽醌提取物HPLC指纹图谱。基于灰色关联度法研究决明子总蒽醌提取物抗5-Fu致小鼠肝损伤的谱效关系并筛选其药效成分群。结果与正常组比较,模型组各项指标差异均有统计学意义(P<0.05),提示造模成功。与模型组比较,决明子总蒽醌提取物各剂量组小鼠血清中ALT、AST活性显著降低(P<0.05);SOD、T-AOC活性显著升高(P<0.05);MPO水平显著降低(P<0.05)。决明子总蒽醌提取物HPLC指纹图谱中31个成分与抗5-Fu致小鼠肝损伤的药效指标具有较好的关联性,但关联度不同。位于关联度前15位且已知的成分分别为橙黄决明素(第6号峰)、大黄酸(第11号峰)、大黄素(第22号峰)、大黄酚(第29号峰)及大黄素甲醚(第30号峰)。结论决明子总蒽醌提取物各成分相互协调发挥抗5-Fu致小鼠肝损伤的保护作用,其中橙黄决明素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚是决明子总蒽醌提取物抗5-Fu致小鼠肝损伤的药效成分群。

基于指纹图谱的Box-Benhnken响应面法结合BP神经网络多指标优化黑胡椒提取工艺

基于中药指纹图谱技术,采用Box-Benhnken响应面法结合BP神经网络优化黑胡椒的提取工艺。将黑胡椒HPLC指纹图谱总峰面积标准化值、胡椒碱峰面积归一化值、指纹图谱相似度分别赋以权重,得到综合评价指标。在单因素试验的基础上,应用Box-Benhnken响应面法优化黑胡椒提取工艺,最佳提取工艺为乙醇浓度90%、料液比1∶40(g/mL)、超声时间40 min。选取Box-Benhnken响应面法获得的综合评价指标进行BP神经网络训练、验证与预测,得到最佳提取工艺为乙醇浓度100%、料液比1∶30(g/mL)、超声时间为40 min。三组黑胡椒最优提取工艺验证结果证明,BP神经网络的综合评价指标为0.895,优于Box-Benhnken响应面法的综合评价指标0.885。本研究基于中药指纹图谱技术,采用Box-Benhnken响应面法结合BP神经网络,可为黑胡椒提取工艺的优化提供新思路,获取最佳提取方案。

决明子分散片对大鼠急性肝损伤的保护作用及其谱效关系研究

目的研究决明子分散片对大鼠急性肝损伤的保护作用及其谱效关系。方法将决明子分散片按高、中、低(生药量:9.26、4.63、1.54 g·kg^(-1))3个剂量给大鼠灌胃给药,连续给药7 d,末次给药10 h后,用四氯化碳橄榄油溶液(四氯化碳-橄榄油=1∶1,2 mL·kg^(-1))造模,24 h后,取出肝脏,观察外观,制作病理切片,测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)的含量。建立决明子分散片的HPLC指纹图谱,采用灰关联度法研究决明子分散片对大鼠急性肝损伤保护作用的谱效关系。结果决明子分散片能明显减轻大鼠肝脏病变,并且显著降低大鼠血清AST和ALT的含量。10批决明子分散片有63个共有峰。随着给药剂量由1.54 g·kg^(-1)增加到9.26 g·kg^(-1),决明子分散片各共有峰与AST的关联度逐渐增加,但与ALT的关联度先增加后降低。不同给药剂量关联度随共有峰的变化趋势基本一致,但29号峰(橙黄决明素)与AST的关联度先增加后降低,与ALT的关联度逐渐降低。高、中、低3个剂量的关联序不一致,AST的关联序分别为(前15个色谱峰):54>32>40>29>42>37>56>62>33>60(大黄酚)>24>27>52>36(大黄酸)>63(大黄素甲醚);29>32>40>54>42>37>56>62>33>60>24>52>27>36>63;29>54>32>40>42>37>56>62>33>60>24>27>52>36>63。ALT的关联序分别为(前15个色谱峰):32>42>40>37>54>56>62>29>33>60>24>52>27>36>63;29>54>32>40>42>37>56>62>33>60>24>27>52>36>63;29>32>54>40>42>37>56>62>33>60>24>52>27>36>63。结论决明子分散片对大鼠急性肝损伤的保护作用来自与给药剂量有关的多种活性成分之间的协同或拮抗作用。随着给药剂量的不同,发挥作用的化学成分的关联顺序并不相同,但3个剂量组发挥药效的主要成分较为一致,该成分群的存在为决明子分散片的深入研究奠定了基础。