左归降糖清肝方对小鼠糖尿病合并脂肪肝脂代谢相关基因mRNA表达的影响

目的探讨以滋阴益气、清热利湿、化痰消瘀组方的左归降糖清肝方对高脂饮食2型糖尿病(T2DM)转基因MKR小鼠脂肪肝发生中脂代谢相关基因mRNA表达的影响。方法 30只MKR小鼠随机分为MKR组、MKR高脂组和左归降糖清肝方组,左归降糖清肝方干预治疗高脂饮食诱发脂肪肝的MKR鼠4 w;观察各组小鼠肝脏形态,RT-PCR检测小鼠肝脏脂代谢相关基因mRNA表达变化。结果①MKR高脂组较MKR组小鼠肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC-α)、脂肪酸合酶(FAS)和内质网甘露糖苷酶样蛋白1(EDEM1)的mRNA表达增加,apoB100 mRNA表达降低;②左归降糖清肝方降低高脂饮食MKR小鼠肝脏ACC-α、FAS和EDEM1的mRNA表达,增加apoB100 mRNA的表达。结论左归降糖清肝方能通过调节肝脏脂代谢相关基因mRNA表达,缓解肝脏脂肪性变。

内质网应激相关基因在2型糖尿病合并脂肪肝小鼠肝脏中的表达变化

目的探讨内质网应激(ERS)在高脂饮食2型糖尿病转基因MKR小鼠脂肪肝发生中的作用。方法高脂饲料诱发MKR鼠形成脂肪肝,观察肝脏形态变化,检测肝脏甘油三酯和脂肪酸水平,RT-PCR检测小鼠肝脏内质网应激相关基因mRNA表达变化。结果与正常小鼠比较,MKR组小鼠肝脏GRP78、XBP1、FAS、ACC-α、GSK3βmRNA表达水平升高(P<0.05);与MKR小鼠比较,高脂饮食MKR小鼠肝脏甘油三酯(TG)和脂肪酸(FFA)水平显著升高(P<0.01),肝脏GRP78、XBP1、CHOP、SREBP1c、FAS、ACC-α、GSK3β和EDEM1基因mRNA表达水平均增加(P<0.01),而Apo B100 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论 ERS参与调节肝脏脂质及Apo B100的代谢过程,在转基因2型糖尿病MKR鼠脂肪肝形成中发挥重要作用。

还少丹对D-半乳糖衰老模型小鼠心肌线粒体DNA缺失的影响

目的探讨还少丹对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠心肌线粒体DNA(mtDNA)缺失的影响。方法将40只小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、还少丹低、高剂量组,用D-半乳糖建立衰老模型,分别给予蒸馏水和还少丹水煎液灌胃。连续给药6周后,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增心肌组织mtDNA,经琼脂糖凝胶电泳检测扩增条带,用光密度扫描定量各组mtDNA的缺失率。结果空白对照组未见mtDNA缺失型扩增条带,其余各组均出现不同程度的缺失型扩增条带;与模型组比较,低、高剂量组小鼠心肌mtDNA缺失率明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);而低剂量与高剂量组之间比较mtDNA的缺失率差异无统计学意义(P>0.05)。结论还少丹能减少D-半乳糖诱导的衰老小鼠心肌mtDNA的缺失程度,提示该方能降低mtDNA的氧化损伤,保护mtDNA的结构完整性,从分子水平上为还少丹抗衰老的作用机制提供了一定的实验依据。

还少丹对D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用

目的探讨还少丹对D-半乳糖(Dgalactose,D-gal)诱导的衰老模型小鼠的抗衰老作用。方法采用D-gal建立小鼠衰老模型,用还少丹水煎剂灌胃6周;分光光度法检测小鼠脑、肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)活性;观察小鼠肝脏、脾脏指数的改变。结果衰老模型组小鼠肝脏指数、脾脏指数以及脑和肝脏组织的SOD、GSH-Px活性均明显降低。还少丹能显著提高衰老模型小鼠的肝脏指数和脾脏指数;显著升高脑和肝组织的SOD、GSH-Px活性。结论还少丹的抗衰老作用与其影响器官指数、升高GSH-Px和SOD活性有关,其作用机制可能通过清除体内自由基,提高免疫功能以实现延缓衰老的进程。

左归降糖方对2型糖尿病MKR小鼠脑NF-κB信号通路炎症因子的影响

目的探讨左归降糖方对高脂饮食2型糖尿病转基因MKR小鼠脑组织NF-κB信号通路炎症因子的影响。方法30只MKR小鼠随机分为MKR组、MKR高脂组和左归降糖方组;高脂饲料饲养MKR鼠加重体内糖脂代谢紊乱,左归降糖方组干预治疗高脂饮食MKR鼠4周,测定小鼠空腹血糖、血清胰岛素和血脂浓度,RT-PCR检测小鼠脑组织IKB、TNF-α和MCP-1基因mRNA表达变化。结果与普通MKR小鼠比较,高脂饮食MKR小鼠空腹血糖、血清胰岛素、总胆固醇水平升高,甘油三酯水平下降,脑组织TNF-α和MCP-1基因mRNA表达水平均增加;左归降糖方降低高脂饮食MKR小鼠空腹血糖、血清胰岛素、总胆固醇以及甘油三酯水平,同时降低脑组织TNF-α、MCP-1基因mRNA表达水平。结论左归降糖方可通过抑制高脂饮食MKR小鼠脑组织NF-κB信号通路的激活来降低炎症损伤,对脑组织具有保护作用。

还少丹对D-半乳糖致衰小鼠心肌线粒体结构与功能的影响

目的:探讨还少丹对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的衰老模型小鼠心肌线粒体结构与功能的影响。方法:将小鼠随机分为空白对照组、衰老模型组、还少丹低、高剂量组。采用D-gal建立衰老模型,还少丹水煎液灌胃6周。以差速离心法分离小鼠心肌组织线粒体;Comas亮蓝蛋白定量法测定线粒体蛋白含量;分光光度法检测线粒体呼吸链复合体I和复合体Ⅳ的活性,以及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性。结果:衰老模型组复合体I和复合体Ⅳ的活性明显降低(分别为P<0.05和P<0.01),还少丹低、高剂量组均能明显提高复合体I和复合体Ⅳ的活性(P<0.01)。衰老模型组Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性明显降低(分别为P<0.05和P<0.01),还少丹各剂量组均能明显提高Na+-K+-ATP酶活性(P<0.01),还少丹低、高剂量组间Ca2+-ATP酶活性的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:还少丹具有保护小鼠心肌线粒体结构、增强心肌线粒体功能的作用。

中医药院校研究生生物信息学课程的教学研究

针对中医药学专业研究生的生物信息学课堂的教学内容、教学模式和手段、实验教学等方面提出几点思考建议,为中医药学生物信息学课程建设提供参考。

分流培养模式下中医药院校生物化学教学改革的探索

生物化学是医学院校的一门重要基础课程,为使生物化学教学更适合分流培养模式的要求,进行了一系列生物化学教学的改革和探索,主要集中在教学计划的制定,提出针对分流培养模式下改进教学方法的基本措施,采取多样化考核方式等方面,以培养中医药类专业高素质人才。

中医药院校生物化学教学中Sandwich教学法的应用初探

为提高医学生物化学教学质量,在教学中尝试引入Sandwich教学法对比传统教学法,使用学生考试成绩和调查问卷比较两种教学方法的优劣,探讨该教学法的应用效果。结果显示,Sandwich教学实验组在期末成绩和综合成绩两个方面都明显优于传统教学对照组,调查问卷结果显示学生更赞同、接受Sandwich教学。因此,Sandwich教学法应用于医学生物化学教学改进了教学方法,提高了教学质量。

左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin与podocin表达的影响

目的观察左归降糖益肾方对MKR转基因2型糖尿病肾病(DN)小鼠足细胞nephrin、podocin表达的影响,探讨其作用机制。方法 8周龄MKR小鼠40只随机分为4组,空白组(A组)、DN组(B组)、DN+中药组(C组)、DN+糖适平+贝那普利组(D组)。B、C、D组给予高脂饮食联合右侧肾切除造模。手术4周后,各给药组给予相应药物,4周后处死小鼠。电化学法观察小鼠空腹血糖,全自动生化仪检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),ELISA法测定尿微量白蛋白(UmAlb),RT-PCR法检测nephrin、podocin mRNA表达,Western Blotting法测定nephrin、podocin蛋白表达,电镜观测足细胞形态结构。结果与A组比较,B组小鼠空腹血糖、SCr、BUN及UmAlb均明显升高(P<0.01),肾小球足细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01)。给药后,与B组比较,用药组小鼠血糖、SCr、BUN及UmAlb明显下降(P<0.01),肾小球足细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01,P<0.05)。电镜结果显示,给药组小鼠肾小球足细胞较B组明显改善。结论左归降糖益肾方通过恢复2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin和podocin的表达而保护肾脏。

降糖益肾方干预胰岛素信号通路改善转基因2型糖尿病MKR鼠肾损伤的研究

目的观察降糖益肾方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR鼠血糖、血胰岛素及肾皮质中胰岛素受体、磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白表达的影响。方法选取MKR鼠40只经鉴定后,随机分为MKR鼠组、MKR鼠高脂组、降糖益肾方组和糖适贝那组。MKR鼠组用基础饲料喂养,MKR鼠高脂组、降糖益肾方组和糖适贝那组用高脂饲料喂养,连续喂养8周后,降糖益肾方组给予降糖益肾方,糖适贝那组给予糖适平加贝那普利,同时MKR鼠组和MKR鼠高脂组分别给予蒸馏水灌胃4周。4周后处死小鼠收集标本,免疫组织化学SABC法检测肾小球中胰岛素受体1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI-3K)的蛋白表达。结果降糖益肾方明显降低高脂饮食MKR鼠肾小球中IRS-1和PI-3K的蛋白表达水平,与MKR鼠高脂组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论降糖益肾方改善糖尿病肾病系膜细胞增殖的机制可能与干预胰岛素信号通路有关。

左归降糖清肝方含药血清对脂肪酸孵育的HepG2细胞脂肪变性的影响

目的探讨左归降糖清肝方含药血清对脂肪酸孵育的人肝细胞株(Hep G2)细胞内甘油三酯(TG)含量的影响。方法用混合脂肪酸孵育的Hep G 2细胞建立细胞脂肪变性模型;将实验分为正常组,模型组,5%、10%、15%含药血清组,油红O染色法检测细胞内脂质沉积,同时定量检测细胞内TG含量。结果 0.5 mmol/L混合脂肪酸孵育Hep G2细胞24 h,可诱导细胞内TG大量沉积,而10%、15%左归降糖清肝方含药血清可抑制脂肪酸这一效应,使细胞内TG含量明显下降(P<0.01)。结论左归降糖清肝方含药血清可改善脂肪酸诱导的Hep G2细胞脂肪变性。

骨性关节炎软骨细胞凋亡及其中医药治疗研究进展

骨性关节炎是一种以关节软骨退行性病变和关节周围骨质增生为病理特征的慢性退行性疾病。研究表明,软骨细胞凋亡在骨性关节炎发生发展中起到关键性作用,有望成为骨关节炎治疗的潜在靶点。该文就骨关节炎中软骨细胞凋亡相关的三条信号通路及针对上述信号通路中关键分子的中医药治疗作简要综述,为骨关节炎的中医药防治提供理论依据。

TBL教学模式在医学生物化学实验教学中的探索与实践

目的探索新的高等医学实验教学方式,以适应医学科学的发展及教学模式的转变。方法在2008级七年制临床医学班生物化学实验教学中,开展了任务教学法的尝试,探讨了其在生化教学中的实施过程及实施注意事项。结果该教学法可以有效的培养学生的思维能力及动手能力,受到同学们的欢迎和认可。结论 TBL教学模式教学法有利于调动学生的学习积极性、主动性,能有效促进学生学习思维能力的提高和培养团队合作精神。

还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响

目的观察还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响,并探讨其延缓衰老的机制。方法将小鼠随机分成对照组、模型组和还少丹低、高剂量组。采用皮下注射D-半乳糖溶液制备亚急性衰老模型,还少丹低、高剂量组给予相应剂量的还少丹水煎液灌胃,对照组和模型组给予等量的蒸馏水灌胃,连续6周。测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数、脾组织IL-2水平及T淋巴细胞的增殖活性。结果与对照组比较,模型组小鼠胸腺和脾脏指数、IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,还少丹低、高剂量组均能增加胸腺指数和脾脏指数,提高IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论还少丹可通过增加胸腺和脾脏指数来保护免疫器官,通过提高IL-2的水平及T淋巴细胞的增殖活性增加机体免疫活性,这可能是还少丹发挥抗衰老作用的机制之一。

任务驱动式教学模式在生物化学实验教学中的应用

目的:通过任务驱动式教学模式在生物化学实验教学中的应用,评价其效果。方法:实验组采用任务驱动式教学模式,对照组采用传统教学模式。通过问卷调查、理论与实验考核评价教学效果。结果:通过任务驱动式教学,实验组考试成绩明显优于对照组(P<0.05),学生在创新意识与创新能力方面得到了显著地提高。结论:任务驱动式教学模式是一种适合高等医学院校生物化学实验教学的模式,并能取得良好的教学效果。

医学院校生物化学课堂中的提问技巧

在医学院校生物化学教学中运用PBL教学法须注意以下几个方面:提问要关注学生生活;教师应精心设计问题,激发创新思维;提问要分层次,因人而异;提问要掌握评价策略,有针对地反馈评价,从而提高教学效果。

还少丹对D-半乳糖衰老模型小鼠白介素-2及线粒体DNA含量的影响

目的:探讨还少丹对衰老模型小鼠白介素-2(IL-2)及线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)含量的影响。方法:将40只小鼠随机分成空白对照组、衰老模型组、低剂量药物组和高剂量药物组,每组10只。采用皮下注射D-半乳糖溶液(100 mg/kg)制备亚急性衰老模型,同时用还少丹水煎液灌胃6周。双抗夹心ELISA法测定血清IL-2的含量;分光光度法测定肝、脑组织中mtDNA含量。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠血清IL-2含量明显减少,肝和脑组织mtDNA含量明显增高(均P<0.01)。与模型组比较,还少丹低剂量和高剂量组都能提高衰老模型小鼠血清IL-2的含量,降低肝、脑组织mtDNA的含量,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论:还少丹能够提高衰老小鼠的机体免疫功能,降低肝、脑组织中mtDNA的含量,从而起到延缓衰老的作用。

翻转课堂在中医院校分子生物学教学中的应用初探

目的将翻转课堂应用于中医院校分子生物学教学并评价其效果。方法实验组和对照组分别采用翻转课堂与传统教学模式,通过问卷调查、闭卷考试评价其教学效果。结果采用翻转课堂教学模式,学生学习效果与解决问题、自主学习能力等均显著提高。结论翻转课堂教学模式加强了教师在教学过程中对学生的引导,极大地激发了学生学习主动性。将翻转课堂引入分子生物学教学是提高学生学习效果和综合素质的有效途径,是深化分子生物学教学改革的重要手段之一。

在中医学临床拔尖班生物化学教学中培养学生科研素质的探讨

组建"中医临床拔尖班"是培养高水平中医学人才的重要举措,其中科研能力是其应具备的基本能力,也是培养计划的重要内容。根据生物化学课程特点,以提高科研能力为中心,通过对理论和实验教学模式的改革,建立了有利于科研能力培养的教学模式。