入院时血清miR-20b、miR-24、miR-137水平对老年急性缺血性脑卒中患者预后的预测价值

目的探讨入院时血清miR-20b、miR-24、miR-137水平对老年急性缺血性脑卒中(AIS)患者预后的预测价值。方法选取2022年1月至2023年1月在徐州医科大学附属医院神经内科收治入院的138例老年AIS患者。根据改良Rankin量表得分(mRS)分为预后良好组(mRS≤2分,82例)和预后不良组(mRS>2分,56例)。在入院收治时,采用实时荧光定量RT-PCR法检测各组患者血清miR-20b、miR-24、miR-137水平;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-20b、miR-24、miR-137水平预测老年AIS患者预后不良的价值;通过1∶1倾向性评分匹配(PSM)均衡预后良好组和预后不良组协变量之间的差异,采用多因素logistic回归分析老年AIS患者预后不良的独立危险因素。结果预后不良组总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平高于预后良好组,高密度脂蛋白胆固醇低于预后良好组(P<0.05);预后不良组的血清miR-20b水平高于预后良好组,miR-24、miR-137水平低于预后良好组(P<0.05);ROC分析可见,血清miR-20b、miR-24、miR-137及联合检测预测老年AIS预后不良的AUC分别为0.751、0.707、0.732、0.812,灵敏度分别为81.20%、74.40%、76.80%、92.90%;特异度分别为79.30%、73.50%、73.30%、69.50%;多因素分析显示,miR-20b>1.78,miR-24<0.94,miR-137<0.93是导致老年AIS患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论血清miR-20b、miR-24、miR-137三者联合检测对入院后的老年AIS预后不良具有一定的预测价值。

震颤分析及肛门括约肌肌电图在帕金森病及P型多系统萎缩患者中的应用分析

目的:探讨震颤分析和肛门括约肌肌电图(external anal sphincter electromyography,EAS-EMG)在帕金森病(Parkinson's disease,PD)和多系统萎缩P型(Multiple system Atrophy-parkinson,MSA-P)患者中的差异。方法:选择徐州医科大学附属医院神经内科收治的PD患者50例,MSA-P患者25例。根据H&Y分期,将帕金森病患者分为H&Y为0-3级的早-中期PD组(27例),H&Y为4~5级的晚期PD组(23例)及MSA-P组(25例),同时检测三组的震颤分析和肛门括约肌肌电图情况,分析三组患者震颤分析及肛门括约肌肌电图的各项指标的差异。结果:PD组与MSA-P组患者静息性震颤发生率帕金森病组高于MSA-P组(P<0.05),震颤频率及姿势性震颤发生率对比差异无统计学意义;早-中期PD组静息性震颤及姿势性频率均高于晚期PD组(P<0.05),两组均以静息性震颤为主,但两组静息性震颤及姿势性震颤发生率差异无统计学意义(P>0.05);早-中期PD组与MSA-P组比较,静息性震颤发生率更高(P<0.05),姿势性震颤发生率差异无统计学意义;MSA-P组与PD组比较,EAS-EMG的轻微收缩时运动单位(motion unit of anal sphincter during slight constract,MUAP)平均时限延长、多相波百分比显著增高、卫星电位出现率增多(P<0.05);晚期PD组EAS-EMG与早-中期PD组相比,MUAP平均时限延长、多相波百分比显著增高、卫星电位出现率增多(P<0.05);早-中期PD组与MSA-P组相比,EAS-EMG MUAP平均时限缩短(P<0.05),多相波百分比及卫星出现率下降(P<0.05)。结论:震颤分析及肛门括约肌肌电图和帕金森病病情进展相关,并可能为MSA-P型和早-中期PD患者的鉴别提供依据。

ESAT-6诱导的外周血单个核细胞γ-干扰素反应对结核性脑膜炎的诊断价值

目的探讨6-kDa早期分泌靶抗原（ESAT-6）刺激的外周血单个核细胞（PBMC）γ-干扰素（IFN-γ）反应对结核性脑膜炎的诊断价值。方法研究对象共82例，其中结核性脑膜炎组20例，病毒性脑膜炎组25例，一般细菌性脑膜炎组17例，并设健康对照组20例。Ficoll法分离PBMC并培养，分别以ESAT-6、纯化结核菌素（PPD）、植物血凝素（PHA）和生理盐水处理。ELISA法测定各组上清IFN-γ浓度。结果ESAT-6处理引起结核性脑膜炎组显著的IFN-γ反应（与生理盐水处理相比P〈0．01）。PPD刺激在结核性脑膜炎组亦均引起IFN-γ升高反应（与生理盐水处理相比P〈0．01），但程度低于ESAT-6处理，差异有统计学意义（P〈0．01）。ROC曲线分析显示，ESAT-6处理曲线下面积为0．918（P〈0．01），95％C10．831～1．0；PPD处理曲线下面积为0．725（P〈0．05），95％C10．56～0．89。结论ESAT-6诱导的PBMCIFN-γ反应对结核性脑膜炎的诊断具有良好的敏感度和特异度，且具有较高的临床易行性。

5-HT_(2A)受体基因T102C多态性与精神病患者自杀行为的相关研究

目的 通过观察住院精神病患者自杀行为及自杀观念与 5 -HT2A 受体基因T10 2C多态性之间的关联性 ,探寻自杀行为可能的生物学标记 ,为早期识别和干预自杀行为提供客观依据。方法 参照CCMD - 2 -R、DSM-Ⅳ诊断标准 ,选取 5 2例有自杀观念或自杀行为 (自杀未遂 )的精神病患者作为研究组 ,另选取 6 3例健康者作为对照组。采集全血标本 ,抽提DNA ,扩增 5 -HT2A 受体基因片段 ,鉴定基因型。数据资料均采用SPSS10 .0统计分析软件进行统计分析。结果 自杀组C等位基因的频率 (0 .5 2 )明显高于对照组 (0 .39) (χ2 =3.91,P <0 .0 5 ) ,3种基因型之间也有显著性差异 (χ2 =6 .12 ,P <0 .0 5 )。自杀组与对照组之间 3种基因型的两两比较显示 :TT与CC相比、TC与CC相比均有显著性差异 (χ2 =5 .0 2 ,P <0 .0 5 )。自杀行为 (自杀未遂 )组与对照组等位基因频率和基因型分布的比较 :自杀行为组的C等位基因频率 (0 .5 8)明显高于对照组 (0 .39) (χ2 =6 .13,P <0 .0 2 )。基因型之间也有显著性差异 (χ2 =9.18,P <0 .0 2 )。结论 5 -HT2A受体基因T10 2C多态性与自杀行为相关 ,10 2C型等位基因频率与住院精神病患者自杀意念。

老旧小区公共空间设施适老化评价研究

目的 为强化老旧小区公共空间设施适老化需求要素与产品设计之间的联系,优化老年人的使用体验,提出一种基于KJ法、AHP-熵权法和SD法的综合评价体系。方法 首先,运用KJ法收集、整合、筛选老旧小区公共空间设施产品的适老化需求要素;其次,运用层次分析法构建评价指标体系,通过AHP-熵权法计算各需求指标的综合权重并进行优先级排序,针对徐州市某老旧小区的公共空间设施产品,运用SD法进行适老化满意度评价;最后,结合指标权重与满意度评价结果得出该小区公共空间设施适老化评价得分。结果通过实际案例验证了评价体系的科学性和实用性,根据综合评价结果提出公共空间设施产品适老化设计优化方向。结论 评价模型结合了老年群体的实际需求和行业专家的专业判断,为老旧小区公共空间设施产品适老化设计优化提供了理论依据和量化指标,对提升老年群体的使用满意度具有重要作用。

5-羟色胺2A受体在自杀死亡者海马中的表达

目的 探寻自杀行为的生物学标记 ,为早期识别和干预自杀行为提供客观依据。方法 通过观察自杀死者与非自杀对照之间脑海马 5 -羟色胺 2A受体 (5 -HT2AR)的表达情况 ,评价 5 -HT2AR表达变化与自杀行为的关系。选取 10例自杀死亡者及 10例非自杀死亡者脑标本 ,进行抗人 5 -HT2AR免疫组化染色及苏木素 -伊红染色观察 ,并在LeicaQWin图像处理与分析系统中进行电子计算机辅助灰度图像分析 ,得到反映组织 5 -HT2AR表达强度的半定量资料 ,采用SPSS10 .0软件进行统计分析。结果 经海马免疫组织化学染色和苏木素 -伊红染色观察 ,自杀死亡组与非自杀对照组之间海马的一般组织学特征无差异。 5 -HT2AR表达的计算机灰度分析显示 :自杀死亡组海马CA1区、CA2区、CA3区及CA4区的受体表达均明显强于非自杀对照组的相应区域 (P <0 .0 1) ,2组齿状回 (DG) 5 -HT2AR的表达无差异 (P >0 .0 5 )。结论 自杀死亡者海马各区 5 -HT2AR表达明显增高 ,海马 5 -HT2AR表达的增高可能是自杀行为的生物学标记。

窒息死大鼠心肌热休克蛋白60免疫组织化学研究

目的 研究窒息死亡大鼠心肌组织中热休克蛋白 6 0 (HSP6 0 )的表达情况。方法 用常规苏木精 -伊红染色方法与免疫组织化学方法对窒息死亡组与对照组SD大鼠心室肌组织中HSP6 0的表达情况进行检测分析。结果 窒息组大鼠心肌组织HSP6 0表达明显高于对照组 (P <0 .0 1)。

C57BL/6N小鼠运动功能、自发活动和记忆的增龄性改变

目的探讨增龄对C57BL/6N小鼠运动功能、自发活动和记忆功能的影响。方法分别构建3、6、12、16和20月龄组,每组20只,雄雌各半。转棒实验、爬杆实验评价各组小鼠运动功能;小鼠自发活动箱检测各组动物自发活动量;跳台实验评价各组动物环境恐惧性记忆机能。结果6月龄小鼠转棒潜伏期显著高于其他各组(P<0.05),同时较其他各组亦表现出较短的爬杆时间(P<0.05);6、12和16月龄动物自发活动量显著高于其他各月龄组(P<0.01)。跳台实验中小鼠被动逃避反应的记忆保持能力呈随龄性降低。结论增龄过程中C57BL/6小鼠运动功能、自发活动和环境恐惧性记忆机能表现出不同变化模式。

促红细胞生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后梗死体积和脑组织水肿的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 采用阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCA)血流2小时,再灌注48小时制成局灶性脑缺血模型。于再灌注开始前,治疗组经腹腔注入EPO(3000 U/Kg);缺血组和假手术组给予生理盐水腹腔注射,48小时后断头取脑。制作 HE切片;以2％氯化-2,3,5三苯基四氮唑(TFC)对脑片进行染色;经图像分析仪计算梗死体积占全脑体积的百分比;同时用干湿重法测定脑组织的含水量。结果 与对照组相比,治疗组海马 CA_1区神经细胞减少(25.7±1.16)％,缺血组减少(31.2±1.49)％;治疗组与缺血组比较有显著性差异(P<0.01)。治疗组脑梗死体积比缺血组明显缩小(P<0.01)。治疗组脑组织含水量比缺血组明显减少(P<0.01)。结论 EPO能够显著降低脑组织含水量,抑制脑水肿,缩小脑梗死体积及减少神经细胞坏死,对脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用。

吡呗地尔和左旋多巴对早期帕金森病患者多巴胺转运体及运动功能的影响

目的观察吡呗地尔和左旋多巴对早期帕金森病(PD)患者多巴胺转运体(DAT)活性和运动功能的影响。方法选择早期PD患者43例,以治疗方案不同分为左旋多巴与吡呗地尔合用组(15例),单用吡呗地尔组(12例),单用左旋多巴组(16例)。采用PD统一评分量表(UPDRSⅢ)对患者进行治疗前的运动功能基线评定,并在治疗后1、3和6个月进行跟踪随访。采用99mTc-TRO-DAT-1-单光子发射计算机断层扫描(SPECT)对患者进行治疗前的基线DAT活性评定,并在治疗后6个月末复查SPECT。结果(1)与入组治疗前的基线比较,合用组、单用左旋多巴组3和6个月后UPDRSⅢ降低(P<0·05或P<0·01)。(2)反映DAT活性的ST/CB放射性摄取率从基线到6个月末的总体变化程度为:合用组下降了2·71%(P<0·05),单用吡呗地尔组下降了3·61%(P<0·05),单用左旋多巴组下降了10·44%(P<0·01)。结论单用吡呗地尔对早期PD患者的运动功能改善不明显,但延缓了纹状体DAT活性的下降。而单用左旋多巴可显著改善早期PD患者运动功能,但纹状体的DAT活性却明显下降。吡呗地尔联用左旋多巴不仅明显改善了患者运动功能,而且显著延缓了纹状体DAT活性的下降。

Caspase3和iNOS在人挫伤脑组织中的时序性表达

目的研究人脑挫伤后不同时间半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的变化,为法医实践中脑损伤时间的推断提供依据。方法选择30例因颅脑损伤死亡案例为损伤组,5例非颅脑损伤急死的案例为对照组,应用免疫组织化学和图像分析技术,分别于死亡后2h、4～8h、10～14h、1～2d、3～5d及8～11d检测脑组织标本中caspase3和iNOS的变化规律。结果经统计学分析:(1)caspase3阳性细胞表达在伤后2h以内组开始升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),1～2d组表达强度增高,3～5d组仍见高表达(P<0.05),以后逐渐下降。(2)iNOS阳性细胞表达在2h以内组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),伤后4～8h开始升高(P<0.05),1～2d组表达强度最高,以后逐渐下降,伤后8～11d仍有弱表达(P<0.05)。结论caspase3和iNOS的表达可能成为实际检案中脑损伤时间推断的有效依据。

自体骨髓间充质源神经干细胞移植应用于中枢神经系统疾病7例

背景:前期应用骨髓间充质源神经干细胞移植治疗模拟神经系统疾病动物实验模型取得较好效果。目的:观察应用自体骨髓间充质源神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的临床疗效。方法:2008-10/2009-04应用自体骨髓间充质源神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病患者7例。骨髓穿刺术抽取自体骨髓血50～60mL,在体外经过分离培养后,制成骨髓间充质干细胞悬液,由患者自体脑脊液诱导定向分化为神经干细胞,通过腰椎穿刺术经蛛网膜下腔鞘内注射输注方式移植。观察患者移植前后神经功能缺损症状及移植后不良反应。结果与结论:经移植治疗后3例患者均未见不良反应。出院后随访6个月,7例患者神经功能缺损症状较移植前均有一定程度的改善。提示自体骨髓间充质源神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病所致的神经功能缺损疾病是一种安全、方便、有效的方法。

首次脑梗死后患者认知功能障碍的多因素相关研究

目的探讨首次脑梗死后患者发生认知功能障碍的相关因素。方法采用CT或MRI确定首次脑梗塞患者282例,所有患者均为右利手。病灶部位:额叶53例,顶叶45例,颞叶50例,枕叶43例,丘脑33例,基底节174例,小脑30例,脑干51例;测定病灶体积;采用中文版蒙特利尔认知评估量表(MOCA)、汉密顿抑郁量表(HAMD)评定患者的认知功能。结果①额叶、顶叶、颞叶、枕叶、丘脑、基底节梗死与认知功能障碍的发生具有相关性(P<0.05)。小脑、脑干梗死与认知功能障碍无相关性。②病灶体积大小与认知功能障碍呈显著相关性(P<0.05)。③MOCA总分与HAMD分值呈显著性负相关(P<0.05)。认知功能正常组与异常组的HAMD得分有显著性差异(P<0.05)。④首次卒中后有认知功能损害者呈低文化水平特征,有长期大量饮酒史患者认知功能障碍有显著性异常(P<0.05)。结论认知功能障碍是首次脑梗死患者的常见并发症,认知功能障碍与卒中部位及体积有关,病灶体积大者认知功能障碍严重,教育水平低、长期大量饮酒及抑郁患者更易发生认知障碍。

脑缺血再灌注损伤后大鼠脑皮质TNF-α及其mRNA的时程变化

为了观察大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质TNF-α及其mRNA表达的时程变化,本实验采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,用免疫组化染色法检测不同再灌注时间大脑皮质TNF-α的蛋白表达水平,以及用逆转录-多聚酶链反应法(RT-PCR)检测脑皮质内TNF-αmRNA的表达情况。结果显示:脑缺血1h,再灌注12h后大脑皮质内TNF-α及其mR-NA的表达开始升高,24h后达到高峰,随后逐渐下降。两组大脑皮质TNF-α及其mRNA的表达水平差异有统计学意义(P<0.01),模型组的TNF-α及其mRNA的表达水平明显高于假手术组。本研究结果表明,TNF-α在大鼠脑缺血再灌注损伤的调节过程中发挥重要作用。

影响帕金森病患者生活质量的因素

目的探讨影响帕金森病(PD)患者生活质量的因素。方法采用PD生活质量问卷(PDQL)、PD统一评定量表(UPDRS)、Hoehn-Yahr分期、Schwab-England残疾量表、汉密顿抑郁量表(HAMD)对71例PD患者的生活质量、疾病严重程度、日常生活能力、运动反应、精神状态及治疗并发症等指标进行评估,结合患者的年龄、性别、起病情况、吸烟、左旋多巴剂量、症状波动等因素评价其对生活质量的影响。结果一元相关分析显示:病程越长、治疗时间越久、左旋多巴剂量越大、UPDRS各项评分、Hoehn-Yahr分期越高,以及有抑郁或症状波动的PD患者生活质量越差(P<0.05～0.01)。逐步回归分析显示:影响PD患者生活质量的主要因素是患者的情感功能,其次是疾病的严重程度。结论情感功能是影响PD患者生活质量最重要的因素。

自噬参与老龄大鼠对Rotenone神经毒性的易感性

目的探讨自噬是否参与老龄SD大鼠多巴胺(DA)能神经元对Rotenone神经毒性的易感性。方法♂SD大鼠,分别构建3、12、20mon组,每个月龄组又随机分为自然增龄组和Rotenone处理组,以Rotenone1.0mg·kg-1.d-1背部皮下注射,连续给药30d,每周停药1d,构建SD大鼠Rotenone染毒模型。大鼠黑质连续切片,进行酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组化染色;Western blot检测黑质部位微管相关蛋白轻链-3(LC3)蛋白表达水平;透射电镜观察黑质神经元中自噬体形成和溶酶体激活。结果在自然增龄组,大鼠黑质TH阳性细胞计数以12mon组为最高;Rotenone处理后各月龄组TH阳性细胞计数均比相应自然增龄组降低(P<0.01),且20mon组降低最为明显。Western blot结果显示,自然增龄组大鼠黑质部位LC3表达在20mon组比3mon组下降(P<0.01),Rotenone处理后各月龄组大鼠黑质部位LC3表达均比相应自然增龄组上调(P<0.01)。透射电镜显示Rotenone处理后大鼠黑质神经元可见自噬小体和溶酶体数目增多。结论自噬参与老龄大鼠DA能神经元对Rotenone神经毒性的易感性。

人SNCA基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的:构建含人野生型及致病突变A30P、A53TSNCA基因的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA,并通过稳定转染获得过表达人野生型及致病突变A30P、A53Tα-synu-clein(SNCA)的单克隆PC12细胞株。方法:通过RT-PCR方法扩增SNCA基因,T-A克隆后测序。在此基础上利用单核苷酸差异引物定点诱变法相继构建含SNCA基因编码区EcoR I、BamHI两酶切位点的同义突变及其致病突变G88C(Ala30Pro)、G209A(Ala53Thr)的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA,并以PCR、双酶切、测序鉴定。以重组质粒pEGFP-C3-SNCA通过脂质体转染方法转染PC12细胞;以G418进行筛选;以有限稀释法进行亚克隆获得稳定过表达人野生型及致病突变A30P、A53Tα-synuclein的单克隆PC12细胞株,并以稳定转染pEGFP-C3的PC12细胞作为对照组细胞,通过RT-PCR、Western blot及荧光显微镜鉴定各单克隆PC12细胞株。结果:PCR、酶切及测序证明重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA构建成功。RT-PCR、Western blot及荧光显微镜确认目的基因序列在PC12细胞稳定过表达。结论:成功地构建SNCA基因WT及A30P与A53T突变型的重组真核表达载体pEGFP-C3-SNCA;成功获得过表达人野生型及致病突变A30P、A53Tα-synuclein的单克隆PC12细胞株。

Survivin在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨Survivin在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学SP法检测9例正常卵巢、17例卵巢交界性肿瘤以及26例卵巢癌组织中Survivin的表达情况。结果正常卵巢组织中无Survivin表达,卵巢交界性肿瘤、卵巢癌组织中Survivin表达阳性率分别为52.9%和80.8%,组间比较有统计学差异(P<0.01);卵巢癌组织中Survivin表达与临床分期、组织学分级及淋巴转移有关(P均<0.01)。结论Survivin与卵巢癌的发生、发展有关。

5-羟色胺2A受体基因多态性与精神疾病患者自杀未遂的关联性研究

目的 探讨 5 -羟色胺 2A(5- HT2A)受体基因A 14 3 8G、T10 2C多态性与精神疾病患者的自杀未遂之间的关系。方法 对 5 2例有自杀未遂的精神疾病患者和 64例无自杀的精神疾病患者及 63例正常人 ,按常规方法提取DNA ,用限制性片段长度多态性方法分析 5 - HT2A受体基因的多态性。结果 5 -HT2A受体基因A 14 3 8G和T10 2C两位点多态性呈完全连锁不平衡 ;自杀未遂组的A 14 3 8G、T10 2C多态性位点的T/G等位基因频率高于正常对照组 (P <0 . 0 5 ) ,自杀未遂组与正常对照组间的基因型分布的差异也有显著性 (P <0 . 0 5 )。结论 精神疾病患者的自杀未遂与 5 - HT2A受体基因的A -14 3 8G、T10 2C多态性有关 ,T/G等位基因可能是自杀行为的危险因素。