辐射诱导性miR-34a的表达对细胞辐射敏感性的影响

目的探讨miR-34a的表达与细胞、组织辐射敏感性的关系。方法采用RT-PCR检测辐射前后不同组织、细胞中miR-34a的表达量;利用流式细胞术检测细胞凋亡率,MTT法检测细胞活力;在肿瘤细胞U87MG中转染miR-34amimics上调miR-34a的表达并检测其细胞活力;在正常细胞HEK293中转染miR-34a inhibitors下调miR-34a的表达水平并检测其细胞凋亡率。结果照前辐射敏感性高的细胞miR-34a表达水平高,辐射敏感性低的细胞miR-34a表达水平低;照后辐射敏感性高的细胞miR-34a表达上调幅度远高于辐射敏感性低的细胞。上调miR-34a表达水平使得肿瘤细胞U87MG照后细胞活力降低,下调miR-34a表达使得正常细胞HEK293照后细胞凋亡率降低。结论细胞辐射敏感性与miR-34a的表达水平正相关,辐射敏感性高的细胞照后miR-34a的表达上调幅度更大;上调miR-34a表达水平对肿瘤细胞U87MG有明显的辐射增敏作用,下调miR-34a表达对正常细胞HEK293有明显的辐射防护作用。

虚拟仿真技术在防原医学核沾染洗消实践教学中的应用

核沾染洗消是防原医学实践教学的重要内容,对提高学员核应急医学救援处置能力发挥了非常重要的作用。将虚拟仿真技术引入防原医学核沾染洗消实践教学,有效克服了实地开展防原医学核沾染洗消实践教学存在的训练成本高、限制条件多的不足,提高了授课质量,促进了新型军事医学人才的培养。

富勒烯赖氨酸衍生物对AHH-1细胞防护效应研究

本文研究了富勒烯赖氨酸衍生物C60-Lys对AHH-1细胞的辐射防护作用,并对其防护机理进行了初步研究。发现800mg/LC60-lys能提高辐照后AHH-1细胞存活率,在8Gy照射剂量时,给药组与对照组AHH-1细胞存活率分别为64.6%和41.3%。荧光凋亡实验发现,当C60-lys浓度为1200mg/L时,凋亡率为16.3%,这明显低于单纯辐照组的39.2%。在800mg/LC60-lys和4Gy辐照剂量时,给药时间对细胞存活率有显著影响,辐照前给药,AHH-1细胞平均存活率是85.6%,而辐照后给药则是64.1%。C60-lys降低4Gy辐射引起的AHH-1细胞的G2期阻滞及辐射对AHH-1细胞DNA损伤,尤其是减少8-羟基-2'脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)含量。

发挥研究生在防原医学实验室建设中作用的探索

充分发挥研究生在高校实验室教学、科研和管理工作中的辅助作用,不仅可以有效促进本科生实验课程的改进、本科生实践能力的提高以及实验室大型教学科研仪器设备的管理水平和利用效率的提升,同时也可以培养研究生自身的科学素质和沟通表达能力。在防原医学实验室建设中的实践表明,充分发挥研究生在实验室建设中的作用,对实验室和研究生来说都是一个双赢的举措。文章对防原医学实验室建设中如何充分发挥研究生的作用进行了初步实践和分析探讨。

防原医学实验教学中实验方法的改进

作为军校学员,他们将肩负保家卫国的神圣使命,其实践水平将直接决定他们履行使命的能力。因此,不断改进实验教学,提高教学质量,培养学生实践能力势在必行。鉴于此,笔者所在的教研室积极推进防原医学实验教学改革,着力探索改进防原医学实验教学中的实验方法,将最新的实验方法和仪器设备引入课堂教学,提高实验教学的生动性和实用性,进而提高教学质量。现笔者就改革方法及存在问题作一论述。

医学院校实验师专业素质培养与提高的几点思考

对目前医学院校普遍存在的不重视实验师专业素质培养、实验师专业培训不够、工作业绩评价体系不完善等严重制约实验师专业素质培养与提高的现实问题进行深入分析,结合笔者多年医学院校实验师工作经验,就如何培养和提高医学院校实验师专业素质提出一些观点与建设性意见。

辐射小鼠血细胞ATM、CDKN1A、DDB2和GADD45A基因表达分析

观察小鼠全身γ射线辐照不同剂量、照射后不同时间,外周血细胞DNA损伤修复相关蛋白基因表达变化,筛选具有指示生物受照剂量潜力的指标。BALB/c小鼠,以0.8和1.6 Gy/min两种剂量率,分别进行0、2、4、6和8 Gy不同剂量照射。照射后4、8、12、24和48 h眼眶取血,AxyPrep试剂盒抽提全血细胞总mRNA,实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)方法分析DNA损伤修复相关蛋白基因ATM(Ataxia telangiectasia mutated)、CDKN1A(Cyclin-dependent kinase inhibitor 1A)、DDB2(Damage-specific DNA-binding protein 2)和GADD45A(Growth arrest and DNA damage-inducible,alpha)转录水平。GraphPad Prism 5.0 software package(GraphPad Software,USA)进行数据统计分析。结果表明,与未照射对照组比,在2—8 Gy剂量范围,0.8 Gy/min剂量率照射条件下,照射后所有观察时间点,基因ATM、CDKN1A、DDB2和GADD45A表达均发生显著性变化,变化程度与受照剂量和照射后时间存在效应关系。相同照射剂量条件下剂量率增高,基因表达变化的幅度更明显。依据上述基因随照射后不同时间表达改变的信息,有可能在一定辐照剂量范围内,用DNA损伤修复蛋白基因表达指标估计生物体受照剂量大小。

大剂量γ射线对树突状细胞表型及功能的影响

目的探讨大剂量电离辐射对树突状细胞(DC)表型及免疫功能的影响和辐射致免疫抑制的机制。方法以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)诱导造血干细胞产生DC,给予0、10、20、30 Gyγ射线照射,并于照后24 h进行脂多糖(LPS)处理(1μg/ml)使之成熟。用Transwell法研究DC的迁移能力,流式细胞术检测DC表面分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ和CCR7)的表达,ELISA检测细胞因子(IL-6、IL-10和PGE2)的分泌。结果大剂量γ射线对DC的表型无影响,却能抑制DC向CCL19的迁移,同时下调CCR7的表达,减少IL-6、IL-10和PGE2等细胞因子的分泌。结论大剂量γ射线可以通过下调CCR7和诱导凋亡抑制DC的迁移,减少细胞因子的分泌,导致免疫抑制。

CpG-ODN对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的保护作用

目的探讨Toll样受体9(Toll-like recptor 9,TLR9)激动剂———含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的治疗作用。方法小鼠在照射后30 min、24 h、48 h连续腹腔注射CpG-ODN(50μg/只),观察小鼠不同剂量照射后存活率的变化,检测特定时间内血液中白细胞和骨髓中有核细胞的含量及其骨髓病理切片,外源性脾结节集落形成数。结果 CpG-ODN能提高照后小鼠的存活率,提高小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数(P<0.01),缓解骨髓病理学的损伤,减少骨髓干细胞的死亡。结论 CpG-ODN能减轻小鼠骨髓造血系统辐射损伤。

STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的探讨我们自行设计的STAT3(signal transducer and activator of transcription 3)反义核酸(ASODN)对裸鼠肺腺癌A549细胞移植瘤的成瘤能力和移植瘤的抑制作用。方法将经全硫代修饰的STAT3 ASODN加入到培养的A549细胞内,CCK-8法检测细胞生长的抑制率,然后将这种细胞接种于裸鼠颈部皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算成瘤率。同时取未经处理的A549细胞接种于裸鼠颈部皮下建立移植瘤模型,待瘤结节直径大于5 mm后,分为STAT3ASODN实验组、生理盐水组和无义寡核苷酸对照组。实验组用15 mg/kg ASODN每天1次直接瘤内注射,连续3周,隔日测量肿瘤大小。处理30 d后,剥离瘤块称质量。蛋白质免疫印迹法检测肿瘤中STAT3、p-STAT3的表达。结果 STAT3 ASODN显著抑制A549细胞生长,与无义寡核苷酸组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。STAT3 ASODN作用后的A549细胞在裸鼠皮下成瘤能力明显降低,抑瘤率达75.8%。在各组荷瘤动物模型中,生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组的瘤体进行性增大,而STAT3 ASODN处理组的瘤块生长缓慢,与2个对照组相比均有差异(P<0.01),处理30 d后,ASODN处理组的肿瘤质量与2个对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),STAT3 ASODN处理组裸鼠A549细胞移植瘤的生长明显受到抑制,抑瘤率为51.1%。肿瘤中STAT3蛋白表达水平以及磷酸化水平也明显下调。结论 STAT3 ASODN能降低A549细胞的成瘤率、抑制移植瘤生长。

凝溶胶蛋白在急性放射损伤防护中的作用

采用4、8Gy137Csγ射线照射BALB/c小鼠,于照后不同时间ELISAKit检测小鼠血浆凝溶胶蛋白(gelsolin)含量变化;6Gy137Csγ射线照射小鼠,照后不同时间STAGO血液凝集仪检测血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)含量;分别于照后2、7天检测血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、全血谷胱甘肽(GSH)含量。实验结果表明,小鼠4、8Gy照后24h时,血浆gelsolin水平升高,24～72h持续下降,下降程度与照射剂量正相关。6Gy照射后初期及中期,gelsolin给药组血浆PT、APTT显著高于单纯照射对照组,FIB低于单纯照射对照组。6Gy照后后期,gelsolin给药组PT、APTT显著低于单纯照射对照组,FIB低于单纯照射对照组。6Gy照射小鼠2、7dgelsolin给药组GSH、SOD显著高于单纯照射对照组,MDA显著低于单纯照射对照组。说明gelsolin在急性放射损伤中对改善辐射出血损伤、清除辐射诱导自由基具有一定作用。

富勒烯衍生物C_3对小鼠辐射损伤的防护效应

目的观察富勒烯衍生物C3对小鼠电离辐射的防护效果。方法富勒烯C3(100 mg/kg)腹腔注射后,利用LD50和LD90剂量60Coγ射线对BALB/c小鼠进行全身均匀照射,观察小鼠照后30 d生存率、死亡动物平均存活时间、照后小鼠体内血清氧化指标[如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)]变化情况、照后30 d外周血白细胞计数情况,以及照后小鼠外源性脾集落形成单位(CFU-S)和体外粒-单系细胞集落形成单位(CFU-GM)计数情况。结果富勒烯衍生物C3可提高γ射线照后小鼠生存率(P<0.01),但照后死亡动物平均存活时间无延长;C3可提高照后小鼠体内血清SOD及GSH浓度(P<0.01),减少照后血清MDA含量(P<0.01);C3还可提高照后小鼠外周血白细胞计数水平(P<0.01),并且提高照后小鼠外源性CFU-S和体外CFU-GM数量(P<0.01)。结论水溶性富勒烯衍生物C3对小鼠γ射线辐射损伤具有较好的防护作用。

舰艇辐射医学防护课程创建与实践

随着我国海军战略转型和装备的发展,海军由近海走向远海已成必然。在此过程中不可避免地会遇到航海特殊复杂环境对艇员健康的影响,辐射环境就是对艇员健康影响的重要因素之一。舰艇辐射医学防护是适应海军发展,贴近部队需要而创建的一门新课程。在本科生教学过程中坚持以"能力"培养为目的教学理念,精心设计教学内容,灵活运用先进的教学方法和手段,采取合理的教学评价体系等有效地调动学员的学习积极性,激发学员的潜能,以培养出具有能力强、综合素质高的海军军医。

卫勤演习中增加洗消组教学内容的思考

军事综合卫勤演习是军校学员完成在校学习、踏上工作岗位前的重要步骤,近几年通过不断摸索研究,洗消组在演习过程中通过增加模拟动物实验、讲解最新辐射检测仪器、结合核安全最新研究进展分析福岛核事故相关情况等措施,使学员增加演习参与性和积极性,完善专业知识结构,演习效果得到明显提高。

γ射线致小鼠血液β-肌动蛋白、凝血和炎性因子改变的观察

通过观察γ射线诱导的小鼠血液β-肌动蛋白(β-actin)、凝血因子和IL-8表达改变的时相关联性,了解β-actin在急性放射损伤中的作用。BALB/C小鼠经60Coγ射线6Gy剂量照射(剂量率0.81Gy/min),收集照后立即及照后第1、2、3、4、7和14d小鼠外周血及脾脏。磁珠分离酶联免疫法检测外周血β-actin含量;STAGO血液凝集仪检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)和血浆纤维蛋白原(FIB)三项凝血指标;Realtime-PCR检测白细胞介素8(IL-8)DNA表达。结果发现,小鼠经6Gy辐照后血浆β-actin立即升高,并于照后1d达峰值,随后直至照后第4d快速下降,照后4―14d下降速度趋缓,但血浆β-actin量仍显著高于对照。照后不同时间PT、APTT、FIB和IL-8的变化趋势与β-actin类似。其中,FIB上升达到峰值及下降的时相过程与β-actin基本一致。从照后第4d起FIB下降直至低于正常对照水平,而PT、APTT和IL-8DNA表达约在照后2―3d升至峰值,然后下降,但PT和APTT值仍高于未照射对照,而IL-8DNA表达则可下降至未照射对照水平。受照小鼠血中凝血指标PT、APTT、FIB,炎性指标IL-8和β-actin均发生相似时相变化。结果提示,辐照后血中β-actin的量和量变的时间动力学过程研究,对于了解电离辐射诱导机体损伤的新病理因素有积极意义。

防原医学实验教学的几点体会

防原医学是一门实践性很强的综合性应用学科,实验教学在整个防原医学教学过程中占有举足轻重的地位,其实施的好坏直接影响学员的学习兴趣,影响防原医学的教学效果。面对当前实验教学中遇到的一些突出问题,坚持从实际出发,依据实验内容,合理组织教学人员,充分利用现有教材、精心制定实施方法,取得了较好的教学效果。

目前电离辐射生物学效应教学中应把握的几个问题

在学科发展进程中,新研究结果及新理论的出现有时会与当前教学内容发生矛盾和冲突。化解这类矛盾和冲突,应把握好学科发展不同阶段关键科学问题的提出和发展的脉络。文章从辐射生物学效应研究的系统性及辐射损伤的系统观等方面,介绍如何辩证看待当前辐射生物学效应研究结果与经典辐射损伤理论间的矛盾与冲突,为科学合理解释辐射生物学效应教学内容中存在的矛盾现象提供思路。

野战环境下核辐射侦检装备的应用

核辐射侦检对于核武器袭击后及时评估核沾染范围、人员受照剂量以及及时开展救援至关重要。不同于城市核恐怖袭击,野战环境的特殊性,也为核辐射的侦检工作增加难度。综合考虑野战环境中山地、丛林、沙漠、暴雨等特殊自然环境的极度高温、湿热、风向多变的特点,以及炮火、雷区、毒气和小股敌人袭扰等战场环境特点,分析核辐射侦检时,个人辐射防护等级选择和使用,辐射侦检设备的选择和使用依据,以及特殊环境下准确划定沾染边界,准确地为后续分类救治和洗消提供第一手数据,为野战环境下更高效、安全地进行核辐射侦检提供探讨。

防原医学教学改革初探

防原医学是研究核武器及其他来源电离辐射损伤和防护的一门应用性学科,是军事预防医学的主要课程。目前传统的防原医学教学手段比较单一,且较注重理论讲授,忽视了实践操作训练,已不能符合目前国内外和安全形势发展的要求。为此,对防原医学在新形势下的教学方法和内容提出了一些粗浅的改革设想,以期能够在防原医学领域培养出高素质人才。

侧重救治处置能力培养的《舰船辐射危害医学防护》教学改革实践

海上辐射损伤主要来源于舰艇受到核武器攻击和核动力舰船反应堆事故两方面,因为海上的环境复杂、舰艇舱室以及反应堆布局的特点,辐射杀伤因素、致伤方式、伤情、防护以及救治等都与陆上核武器损伤存在较大差别。