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高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒荧光定量PCR检测方法的建立
被引量:
9
1
作者
刘园园
肖性龙
+6 位作者
吴晖
余以刚
张经纬
程邦照
龚俊
杨晓泉
刘冬梅
《现代食品科技》
EI
CAS
2008年第7期731-734,共4页
为了对当前爆发流行的高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒建立快速准确的检测方法,根据该类病毒在Nsp2基因1594-1680处缺失87个碱基的特点,设计了一对特异性引物和一个Taqman探针,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量PCR检测方法。该...
为了对当前爆发流行的高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒建立快速准确的检测方法,根据该类病毒在Nsp2基因1594-1680处缺失87个碱基的特点,设计了一对特异性引物和一个Taqman探针,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量PCR检测方法。该方法特异性强,灵敏度高,能很好地区分高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒和其它病毒,没有发现假阳性和假阴性现象,检测病毒滴度达到1TCID50。用该法对38份疑似样本进行检测,阳性率60.5%,与常规PCR检测法符合率100%。
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关键词
高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症
荧光定量PCR
检测
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职称材料
沙门菌和志贺菌二联实时荧光定量PCR的临床检测应用研究
被引量:
5
2
作者
王晨
吴晖
+4 位作者
肖性龙
余以刚
张经纬
程邦照
杨晓泉
《中国卫生检验杂志》
CAS
2008年第7期1397-1399,共3页
目的:进行沙门菌和志贺菌二联实时荧光PCR检测的研究,并探讨在CDC体检中临床检测的应用。方法:在沙门菌、志贺菌的fimY基因和ipaH基因保守区设计特异性引物和探针,对引物、探针、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,并与传统检...
目的:进行沙门菌和志贺菌二联实时荧光PCR检测的研究,并探讨在CDC体检中临床检测的应用。方法:在沙门菌、志贺菌的fimY基因和ipaH基因保守区设计特异性引物和探针,对引物、探针、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,并与传统检测方法进行对比。结果:该方法从细菌核酸提取至完成检测仅需3 h左右,对两种菌的检测灵敏度均达到100 cfu/ml,检测自2007年11月以来CDC临床肛拭子样本5896份,实验结果与权威检验机构的结果符合率达100%。结论:二联实时荧光定量PCR可同时定量的检测出沙门菌和志贺菌,灵敏度高,特异性强,检测周期短。适用于CDC体检等同时对沙门菌和志贺菌的快速临床检测。
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关键词
沙门菌
志贺菌
二联
实时荧光定量PCR
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职称材料
题名
高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒荧光定量PCR检测方法的建立
被引量:
9
1
作者
刘园园
肖性龙
吴晖
余以刚
张经纬
程邦照
龚俊
杨晓泉
刘冬梅
机构
华南理工大学轻工与食品学院
深圳太太基因工程有限公司
出处
《现代食品科技》
EI
CAS
2008年第7期731-734,共4页
文摘
为了对当前爆发流行的高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒建立快速准确的检测方法,根据该类病毒在Nsp2基因1594-1680处缺失87个碱基的特点,设计了一对特异性引物和一个Taqman探针,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量PCR检测方法。该方法特异性强,灵敏度高,能很好地区分高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒和其它病毒,没有发现假阳性和假阴性现象,检测病毒滴度达到1TCID50。用该法对38份疑似样本进行检测,阳性率60.5%,与常规PCR检测法符合率100%。
关键词
高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症
荧光定量PCR
检测
Keywords
highly virulent Porcine Reproductive and Respiratory syndrome virus (H-PRRSV), fluorescence quantitative PCR (FQ-PCR) ,detection
分类号
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
沙门菌和志贺菌二联实时荧光定量PCR的临床检测应用研究
被引量:
5
2
作者
王晨
吴晖
肖性龙
余以刚
张经纬
程邦照
杨晓泉
机构
华南理工大学轻工与食品学院
深圳太太基因工程有限公司
出处
《中国卫生检验杂志》
CAS
2008年第7期1397-1399,共3页
基金
教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目(NCET06-0746)
2007年省部产学研合作专项资金项目(2007B090400068)资助
文摘
目的:进行沙门菌和志贺菌二联实时荧光PCR检测的研究,并探讨在CDC体检中临床检测的应用。方法:在沙门菌、志贺菌的fimY基因和ipaH基因保守区设计特异性引物和探针,对引物、探针、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,并与传统检测方法进行对比。结果:该方法从细菌核酸提取至完成检测仅需3 h左右,对两种菌的检测灵敏度均达到100 cfu/ml,检测自2007年11月以来CDC临床肛拭子样本5896份,实验结果与权威检验机构的结果符合率达100%。结论:二联实时荧光定量PCR可同时定量的检测出沙门菌和志贺菌,灵敏度高,特异性强,检测周期短。适用于CDC体检等同时对沙门菌和志贺菌的快速临床检测。
关键词
沙门菌
志贺菌
二联
实时荧光定量PCR
Keywords
Salmonella
Shigella
Two -link
Real -time quantitative PCR
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒荧光定量PCR检测方法的建立
刘园园
肖性龙
吴晖
余以刚
张经纬
程邦照
龚俊
杨晓泉
刘冬梅
《现代食品科技》
EI
CAS
2008
9
下载PDF
职称材料
2
沙门菌和志贺菌二联实时荧光定量PCR的临床检测应用研究
王晨
吴晖
肖性龙
余以刚
张经纬
程邦照
杨晓泉
《中国卫生检验杂志》
CAS
2008
5
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职称材料
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