探讨酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原的效果

目的:探讨分析应用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原的优缺点。方法:选取来自湖北某单采血浆站的76份抗-HBV阳性血清作为研究对象,分别采用酶联免疫法和胶体金法对这些标本进行乙肝表面抗原检测并分析。结果:经胶体金法检测结果及酶联免疫法检测结果同时为阳性的标本有26份。胶体金法检测结果为阳性,而酶联免疫法检测结果为阴性的标本有2份;胶体金法检测结果为阴性,而酶联免疫法检测结果为阳性的标本有3份;胶体金法检测结果及酶联免疫法检测结果同时为阴性的标本有45份。经统计学分析,应用胶体金法进行乙肝表面抗原检测的假阴性率为3.95%,假阳性率为2.63%。应用酶联免疫法进行乙肝表面抗原检测的敏感性明显高于应用胶体金法进行乙肝表面抗原检测的敏感性,差异显著(P <0.05)。结论:酶联免疫法与胶体金法均是检测乙肝表面抗原的比较可靠的方法。胶体金检测法适合于大规模的乙肝病毒快速筛检,酶联免疫检测法则适合于对少数胶体金法检测结果呈阳性的患者进行再次筛检,进而大幅度提升检测的准确率。

狂犬病、破伤风人免疫血浆抗体效价检测分析

为了解原料血浆中抗体水平,为狂犬病、破伤风抗体效价测定提供依据,同时为提高血浆站的抗体效价提供依据,进而提高狂免、破免产品的生产质量,本文对2015—2017年血浆站的狂犬病、破伤风抗体效价检测结果进行三年数据对比,采用ELISA法检测人血浆中狂犬病、破伤风的抗体效价,用柱状图分析各血浆站抗体效价9 IU/mL以上、6~9 IU/mL血浆所占百分比。结果表明,破免血浆检测量逐年增多,2017年比2015年增长了103%,其中高效价血浆量也在逐年上升。狂免血浆检测量2016年和2017年均比2015年下降了32%,其中高效价的血浆量逐年降低。

原料血浆中HBV/HCV/HIV-1核酸检测方法的建立及验证

目的:建立原料血浆中乙型肝炎病毒(HBV)/丙型肝炎病毒(HCV)/人类免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸检测方法,并进行系统性验证。方法:分别从灵敏度、精密度、线性、特异性及抗干扰因素等方面,对核酸检测系统进行系统性验证,并筛查1 140 601份原料血浆。结果:分析灵敏度验证盘中HBV(3 IU·mL^(-1))样本、HCV(20 IU·mL^(-1))样本及HIV-1(40 IU·mL^(-1))样本各20份进行单人份检测,样本检出率为100%,高于95%。重复性:实验员A重复检测HBV(3 IU·mL^(-1))样本、HCV(20 IU·mL^(-1))样本及HIV-1(40 IU·mL^(-1))样本各20次,CT值CV分别为2.08%,1.82%,4.70%,均≤5%,实验员B重复检测样本各20次,各项目CT值CV分别为1.33%,2.08%,4.70%,均≤5%;中间精密度:2名实验员各项目CT值CV分别为2.80%,2.26%,3.80%,均≤10%。线性验证:HBV/HCV/HIV-1企业工作参考品10~5, 10~4, 10~3, 10~2浓度水平扩增线性梯度明显,重复性好。特异性验证:将系统性能验证盘作为供试品进行检测,检测结果应与系统性能验证盘预期结果一致。干扰因素验证:当样本中分别含0.19%~1.52%的枸橼酸钠、48~431 mg·dL的溶血血红蛋白及141~1 269福尔马肼浊度的乳糜均对检测无影响。1 140 601份原料血浆中有175份反应性样本,NAT反应性样本:HIV-1样本3份,HCV样本11份,HBV样本132份;ELISA反应性样本:HIV样本0份,HCV样本15份,HBV样本14份。男性样本(100份)高于女性样本(75份)。血型占比O型(37.71%)>A型(29.71%)>B型(21.14%)>AB型(11.43%)。45~55岁年龄段占比最高达64.57%,18~30岁年龄段占比最少仅为4.57%。结论:该方法稳定准确、精密度高、特异性强、抗干扰能力强,适用于原料血浆中HBV/HCV/HIV-1核酸检测。核酸检测与血清学检测有机结合可有效降低输血感染风险,必要的献血浆者追踪随访和更进一步的实验室确证分析有助于血清学检测和核酸检测不一致结果的解释和分析。