BC-5800五分类血液细胞分析仪警示标志与参数在异常细胞检测中的作用

目的探讨BC-5800五分类血液细胞分析仪(简称BC-5800)警示标志与参数在异常细胞检测中的价值。方法收集683例患者血常规检测标本,使用BC-5800进行常规全血血细胞分析,并进行手工镜检。运用受试者工作特征(ROC)曲线分析等方法对警示标志及参数进行分析。结果 BC-5800警示标志的出现比例为57.0%;BC-5800警示标志与手工镜检对异常细胞检测的阳性符合率为43.70%。单个警示标志出现的比例较高,其中警示标志"未成熟细胞"出现最多,但其手工镜检阳性率不高。对多个警示标志联合出现的情况,手工镜检的阳性率有显著提高。BC-5800参数异常淋巴细胞(ALY)、巨大未成熟细胞(LIC)的百分比(ALY%、LIC%)与绝对值(ALY#、LIC#)ROC曲线的曲线下面积(AUC)分别为0.860、0.820、0.870、0.805。结论 BC-5800各类警示标志及参数能起到较好的提示作用,各临床实验室的手工镜检复检规则应根据仪器性能制定,以提高检测效率。

miRNA-802表达与炎症性肠病患者炎性反应关系的相关性研究

目的探讨miRNA-802的表达变化与炎症性肠病(IBD)患者炎症因子的相关性及意义,了解IBD发生发展的相关机制。方法选取2015年8月至2017年2月在泰州市人民医院住院的80例活动期IBD患者作为活动期IBD组。另选取同期40例非活动期IBD患者和40例健康体检者分别作为非活动期IBD组和健康对照组。采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组受试者的肠黏膜及外周血单核细胞中miRNA-802表达水平。此外,检测经英夫利西单克隆抗体(IFX)治疗的43例克罗恩病(CD)患者肠黏膜及外周血单核细胞中miRNA-802的相对表达量,并分析其与血清TNF-α的相关性。结果活动期IBD组患者肠黏膜及外周血单核细胞中miRNA-802的表达水平均显著高于非活动期组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。IFX治疗后12周,CD患者肠黏膜组织及外周血单核细胞miRNA-802表达水平显著低于治疗前,血清中TNF-α表达水平低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.01)。相关性分析发现,血清中TNF-α表达水平与外周血单核细胞中miRNA-802表达水平呈正相关,使用TNF-α刺激体外培养的外周血单核细胞,能显著提高miRNA-802的mRNA表达量。结论 IBD患者中升高的miRNA-802表达与血清TNF-α表达水平密切相关,miRNA-802可能成为IBD治疗新靶点。

Toll样受体mRNA在人肾癌细胞786—0和正常肾细胞HK-2中的表达及意义

目的探讨Toll样受体（TLR）在肾癌发生、发展中的作用和意义。方法培养人肾癌细胞786-0（786-0实验组）和正常肾细胞HK-2（HK-2对照组）。实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PcR）检测TLR1～TLR10mRNA在786-0实验组及HK-2对照组细胞中的表达规律。结果786-0实验组和HK-2对照组细胞均表达TLRl～TLR6、TLR8～TLR10，而不表达TLR7。TLR1、TLR2、TLR4～TLR6、TLR8、TLR10在786--0实验组表达均高于HK-2对照组细胞[（4．40±0．19）×10^-2、（1．77±0．24）×10^-2、（5．03±0．62）×10^-2、（3．93_4-0．86）×10^-2、（6．11±0．48）×10^-2、（1．89±0．47）×10^-2、（2．84±0．57）×10^-2比（0．84±0．27）×10^-2、（0．40±0．04）×10^-2、（0．95±0．73）×10^-2、（0．56±0．25）×10^-2、（0．49±0．16）×10^-2、（0．20±0．07）×10^-2、（0．27±0．08）×10^-2，P〈0．01]，而TLR3、TLR9在786-0实验组与HK-2对照组细胞的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TLR在人肾癌细胞和正常肾细胞细胞中的表达有差异，TLR1、TLR2、TLR4～TLR6、TLR8、TLR10在人肾癌的发生、发展中可能发挥一定的作用。

艰难拟梭菌PaLoc致病决定区基因座敲除突变株转录组学分析及其减毒验证

目的对艰难拟梭菌630(Cd630)菌株和致病决定区基因座(PaLoc)敲除突变株(ΔPaLoc)进行转录组测序和分析,获得Cd630野生型菌株和ΔPaLoc基因的差异性表达谱,并测定野生型Cd630菌株和ΔPaLoc突变株的细胞毒力,为构建艰难拟梭菌全菌减毒疫苗奠定基础。方法对Cd630菌株和ΔPaLoc敲除突变株进行转录组测序,接着对差异表达基因进行筛选,随后对差异基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。最后在非洲绿猴肾细胞(Vero)和人克隆结肠腺癌细胞株(Caco-2)中进行Cd630野生型菌株和ΔPaLoc敲除突变菌株的细胞毒性验证实验。结果转录组数据表明ΔPaLoc突变株毒素基因tcdA、tcdB未转录。CD630_36010、CD630_020910、CD630_02080和cel等基因分别上调17.92、11.40、8.93和7.55倍;编码高丝氨酸脱氢酶的hom2基因、孢子形成蛋白基因CD630_15810、锌结合脱氢酶基因CD630_23230、1-磷酸半乳糖醇5-脱氢酶基因CD630_23240分别下调为野生型的0.06、0.075、0.133和0.183倍。GO和KEGG富集分析结果表明,ΔPaLoc突变株差异转录基因主要富集于密度感应系统、ABC运输系统、双组分系统、磷酸转移酶(PTS)系统、糖代谢通路以及万古霉素耐药相关的通路等。细胞毒力实验结果表明野生型Cd630菌株对Vero细胞和Caco-2细胞具有毒力,ΔPaLoc突变株丧失对Vero细胞和Caco-2细胞的毒力。结论通过对Cd630和ΔPaLoc突变株进行转录测序,表明毒素基因未转录,其他差异性基因可为进一步研究ΔPaLoc突变株生理生化特征提供指引。细胞毒力实验表明,ΔPaLoc突变株丧失了对Vero细胞和Caco-2细胞的毒力,ΔPaLoc突变株为艰难拟梭菌全菌减毒疫苗的构建奠定了基础。