医学遗传学教学反馈信息的初步分析

在我国，“医学遗传学”是近年发展起来的新兴学科，大部分医学院校开设该门课程仅１０年左右时间，课程设置、教学内容、教学方式等方面目前仍在不断探索过程中，从教学对象－学生处收集反馈信息，并加以认真分析总结，无疑对于促进课程的改革、完善、提高，加快课程建设...

结合珠蛋白遗传多态性与呼吸系统疾病关系的研究

目的：探讨血清结合珠蛋白的遗传多态性与呼吸系统几种常见疾病的关联。方法：应用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术，分析四川泸州地区肺气肿、支气管哮喘和肺癌患者的HP表型分布。结果：三种疾病患者的HP1基因频率都显著高于正常对照组。结论：HP1基因与呼吸系统常见的三种疾病发生有关，可能是促使机体对这三种疾病易感的遗传因子。

粉防己碱对豚鼠心肌细胞钾通道的影响

目的 :研究粉防己碱对豚鼠心肌细胞钾通道的影响。方法 :用内面向外膜片钳单通道记录法。结果 :Tet10 μmol·L-1时对钾通道影响不大 (P >0 .0 5 ) ,2 0 ,30 μmol·L-1使开放概率分别由药前的 0 .775± 0 .35 6降至 0 .2 31± 0 .2 73和 0 .2 2 1± 0 .2 30 ;变化幅度 (% )为 - 6 9.13± 2 9.6和 - 74 .93± 2 3.6 3(P <0 .0 5 )。结论 :一定浓度下Tet对心肌细胞钾通道具有阻滞作用。

先天性智能发育不全患儿的细胞遗传学研究

作者自1989年以来，对220例先天性智能发育不全患儿进行了细胞遗传学研究，结果发现53例具有染色体异常，检出率为24．1％．异常核型共18个种类，涉及15号染色体，既有数目畸变，又有结构畸变，其中以21三体居多（66．0％）146，XX，t（4；14）（P16；q24）枝型为国内首报．对这些异常核型的成因进行分析，认为①与接触致畸因素有关；②由亲代遗传而来；③与母亲高龄有关。本文的研究结果揭示，广泛开展染色体技术，是诊断和预防智能发育不全、实行优生的一项重要措施。

婴儿型进行性脊肌萎缩症2例报告及遗传方式探讨

婴儿型进行性脊肌萎缩症是一种少见的运动神经元性疾病。本文报告2例本病患者，系同胞姐弟，追查家族史发现其祖母一同胞亦为类似患者。对2例患者进行了临床检查、组织活检及染色体分析，并对该病的遗传方式进行了探讨，认为婴儿型进行性脊肌萎缩症符合常染色体隐性遗传的特点。

孪生子猫叫综合征的细胞遗传学分析(附1例报告)

本文孪生之长子具典型的猫叫综合征的临床表现,次子表型正常。外周血淋巴细胞染色体G显带分析显示,本双胎都为5P^-和正常细胞的嵌合核型。染色体多态比较分析发现,两个正常细胞和异常细胞分属同一细胞系;手皮纹分析二者亦不具一致性。因此,作者认为多本双胎为异卵双生,外周血染色体出现的嵌合现象,可能系在胚胎期发生了造血细胞互换所致。

结合珠蛋白的遗传多态性与哮喘的关系

目的 :探讨支气管哮喘与结合珠蛋白的遗传多态性的关系。方法 :聚丙烯酰胺凝电泳技术研究患者和正常人HP型分布特点 ,并计算HP1基因频率 ,比较两组间的统计学差异。结果 :0～ 5 0岁哮喘病人HP1基因频率显著高于正常人 ;外源性哮喘组HP1基因频率高于正常对照组 ,内源性组则与正常对照组无显著差异。结论 :四川地区HP1基因与哮喘发生有关 ,可能主要在外源性哮喘中起作用。

甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用(英文)

用膜片钳单通道技术 ,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱 (Nef)后 K+通道特性的改变 ,以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K+通道的作用 .结果 :Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上 K+通道开放概率 (PO)降低 . 1 0 ,2 0μmol· L-1Nef分别使心肌细胞 K+通道降低 (50± 32 ) %和 (96± 5) % ,30 ,50 μmol· L-1的 Nef分别使猪冠脉平滑肌细胞上 K+通道 PO 降低 (51±2 1 ) %和 (71± 1 4) % .结果表明 ,Nef可从通道内口阻断心肌及平滑肌细胞上 K+通道 。

乳腺癌组织中端粒酶活性的定量检测及其与临床病理的关系

背景与目的:端粒酶是一种在细胞永生化及癌症发生过程中起重要作用的核蛋白酶。最近关于乳腺癌中端粒酶活性与预后因素间的关系,因研究方法的差异而呈现出不一致的报道。本研究旨在建立一种可行的银染端粒酶定量检测法,以探讨乳腺癌中端粒酶活性与临床病理学预后因素间的关系。方法:运用银染端粒重复序列扩增法(SS-TRAP)检测了52例新鲜乳腺癌及其癌旁组织,32例乳腺良性病变和14例正常乳腺组织中端粒酶的活性表达,对结果予以定量并结合临床资料进行分析。结果:乳腺癌、癌旁组织、良性病变及正常乳腺组织中端粒酶阳性率分别为90.38%(47/52)、28.85%(15/52)、31.25%(10/32)、0(0/14)。端粒酶分别为36.91±15.35、8.27±4.37、14.10±5.28、0(TPG单位),单因素方差分析结果显示,乳腺癌组端粒酶活性水平明显高于其他3组(P值均<0.01)。Logistic回归分析结果表明,乳腺癌中端粒酶的表达与病理类型、分化程度明显相关(P=0.003及0.004),即随着肿瘤的进展,端粒酶活性亦增加。其中,浸润性非特殊癌端粒酶活性水平明显高于浸润性特殊癌(P<0.05);中、低分化癌端粒酶活性均高于高分化癌(P<0.05),中、低分化癌间无显著性差异(P>0.05)。端粒酶活性表达在患者病程、年龄、绝经状况间均无显著性差异(P>0.05)。

研究型教学与合作学习模式的创建与实践

如何培养学生解决实际问题的能力和创新能力是当前高等教育改革的重要课题之一。创新能力是在创造性解决问题的过程中培养出来的综合能力[1]。启发学生主动实践,是创新能力培养的关键所在。医学是一门不断创新与发展的学科。高等医学院校在培养学生的过程中,不仅要培养学生的专业知识水平,而且要培养学生的自学能力及敏捷的科学思维[2]。

21-三体综合征患儿发病与母亲年龄和环境因素的关系

目的:探讨21-三体综合征患儿发病与母亲年龄和环境因素的关系。方法:常规取外周血培养,制备染色体G显带标本,镜下核型分析。对21-三体综合征患儿母亲年龄及其接触环境因素的情况进行分析。结果:95例患儿中出生时母亲年龄在30岁以下者85例占89.5%,其母亲均接触过化学、物理等有害因素。结论:发生21-三体综合征患儿的母亲年龄有偏低倾向,其发病与有害的环境因素密切相关。应扩大产前诊断的年龄范围,加大优生优育环境因素重要性的宣传力度。

脂质体介导c-myc反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响

目的研究c-myc反义寡核苷酸(ASODN)经脂质体LipfectAMINETM(LR)介导转染对MCF-7细胞中c-myc蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响。方法用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)评价脂质体介导c-myc ASODN对细胞增殖的影响;免疫细胞化学ABC方法检测转染前后c-myc蛋白表达;流式细胞仪(FCM)定量分析细胞凋亡。结果ASODN/LR转染与正义、错义寡核苷酸相比,显著抑制MCF-7细胞增殖(P<0.01)。FCM分析结果显示,转染后可见明显细胞凋亡峰,72h相点细胞凋亡率达(28.76±2.09)%。免疫细胞化学显示c-myc蛋白水平明显降低,阳性表达率为(21.40±1.16)%。结论LR介导c-myc ASODN能明显抑制MCF-7细胞增殖、诱导细胞凋亡和下调c-myc蛋白水平。

hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTCAGCGTGCTCAACTA,构建重组siRNA表达质粒pGenesil-hTERT,同时构建不针对任何基因的阴性对照重组pGenesil-HK。两种重组质粒经酶切、电泳分析和测序鉴定后,用脂质体转染法分别转染乳腺癌MCF-7细胞,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。转染pGenesil-hTERT的MCF-7细胞,凝胶电泳见端粒酶特征性条带明显减少,端粒酶活性受到明显抑制;pGenesil-hTERT转染细胞后凋亡率较对照组明显升高(P<0.01),且转染48h凋亡率最高,达54.7%±2.41%。结论hTERT-siRNA可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性、促进细胞凋亡,此法有望应用于肿瘤基因治疗。

人TRF2基因有效siRNA序列的筛选

目的设计合成干扰端粒重复序列结合因子2(telomeric repeatbinding factor 2,TRF2)基因表达的不同小型干扰RNA(siRNA),筛选出能高效抑制TRF2基因表达的siRNA。方法根据人TRF2 mRNA的序列,设计合成3对不同的针对TRF2的siRNA、应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂将三对siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞,实时荧光定量RT-PCR技术检测TRF2 mRNA表达水平、Western印迹法检测TRF2蛋白表达以确定干扰效果。结果设计合成的3对TRF2 siRNA中有2对siRNA可有效抑制TRF2基因表达。结论成功设计合成了针对TRF2基因的siRNA,并从中筛选出能特异且高效阻断TRF2表达的siRNA,为进一步应用RNAi技术抗TRF2基因进行肿瘤基因治疗研究奠定实验基础。

siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究

目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。

c-myc反义核酸对乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响

目的探讨脂质体介导c-myc基因反义寡核苷酸(Antisense phosphorothioate oligodeoxynucle-otide,ASODN)对MCF-7细胞生长及其人体端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因表达的影响。方法将c-myc正、反义寡核苷酸(ODN)分别导入各组MCF-7细胞中,MTT法、逆转录-聚合酶链法及流式细胞术分别检测各组细胞生长情况、hTERTmRNA的表达水平以及细胞凋亡率。结果c-mycASODN转染MCF-7细胞24h后,细胞生长受到抑制(P<0.05),并且hTERTmRNA表达明显降低;随着反义核酸作用时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多,细胞生长及hTERT表达的下降随时间延长逐渐明显。对照组、LR-SODN组、LR-ASODN24h组与LR-ASODN48h、72h组相比有明显统计学差异(P<0.05)。结论c-myc反义寡核苷酸能显著下调细胞中hTERT基因的表达活性,诱导MCF-7细胞凋亡,并抑制MCF-7细胞生长;在一定程度上,其效果与时间呈正相关。

特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应

为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中hTERT mRNA的表达。与对照组相比,4段siRNA中有3段在转染后12h即对hTERT mRNA的表达产生抑制,48h抑制率最高,72h后下降,其中位于hTERT mRNA二级结构中的结构相对简单区域的siRNA抑制率最高,达到75%,说明特异性siRNA对hTERT基因有明显的抑制效果,且该抑制效应具有位置及时间依赖性。

Y染色体异常的临床表现与遗传学相关分析

采用外周血淋巴细胞培养技术对 72 0例检查者实施染色体分析 ,其中有 34例存在Y染色体异常 ,主要表现为不良孕产史、性别畸形、无精子症等。