胞浆Ca^(2+)和某些激酶对NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用

为澄清中性粒细胞胞浆 Ca2 +和某些 O-·2 产生相关激酶对 NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用 ,利用分化为中性粒细胞样的 HL- 60细胞研究了胞浆 Ca2 +螯合剂 BAPTA- AM和激酶抑制剂对这些激酶激活、NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的影响 .使用 1 0 μmol/L的 Ca2 +螯合剂 BAPTA- AM去除胞浆 Ca2 +后 ,趋化肽 f MLP诱导的 O-·2 产生明显减少 ,但不影响 f MLP诱导的肌动蛋白聚合 ;8μmol/L的 PKC激酶抑制物 GF1 0 92 0 3x几乎完全抑制 O-·2 产生 ;50 μmol/L的p38激酶抑制物 SB2 0 3580、50 μmol/L的 ERK激酶抑制物 PD0 980 59和 0 .1 μmol/L的 PI3激酶抑制物渥曼青霉素 (Wortmannin)使 f MLP诱导的 O-·2 产生大约减少一半 ;其中 Wortmannin还抑制 f MLP诱导的肌动蛋白聚合 ;f MLP刺激细胞后 ,PI3- K、p38和 ERK激酶迅速激活 ,但这些激酶的激活对 Ca2 +是非必需的 .这些结果说明 Ca2 +依赖途径 (PKC)和 Ca2 +非依赖途径 (PI3- K、p38和ERK)对 NADPH氧化酶激活都起着重要作用 ,而 Ca2 +非依赖途径中的 PI3- K激酶还参与中性粒细胞样 HL- 60细胞的肌动蛋白聚合 .

FMLP刺激HL-60细胞NADPH氧化酶激活的信号转导途径

目的澄清中性粒细胞中 [Ca2 + ]i 及某些激酶在 NADPH氧化酶激活中的作用和 NADPH氧化酶激活的信号转导途径。方法利用中性粒细胞样 HL- 60细胞 ,研究 [Ca2 + ]i 和某些激酶对 f ML P刺激 NADPH氧化酶激活的影响。结果用 10μm ol/ L BAPTA- AM去除 [Ca2 + ]i 后使 O- 2 生成明显减少 ;8μm ol/ L的 PKC抑制物 GF10 92 0 3 x显著地抑制了 O- 2 产生 ;5 0 μmol/ L 的 p3 8抑制物 SB2 0 3 5 80、5 0 μm ol/ L 的 ERK抑制物 PD0 980 5 9和 0 .1μm ol/ L 的 PI3K抑制物 Wortm annin使O- 2 产生受到不同程度抑制 ;PKC、PI3K、p3 8和 ERK激活对 [Ca2 + ]i 升高没有影响 ;[Ca2 + ]i、PKC和 PI3 K对 p3 8激活有一定作用 ,而 ERK和 Akt激活主要受 PI3- K的调控。结论试验说明 [Ca2 + ]i 依赖途径 ( PKC)和 [Ca2 + ]i 非依赖途径 ( PI3K、p3 8和ERK)对

在fMLP刺激的HL-60细胞中PI3-K介导的肌动蛋白聚合

趋化肽fMLP能够诱导中性粒细胞粘附、游走和吞噬 .为了澄清这种趋化反应的发生机理 ,将HL 6 0细胞诱导分化为中性粒细胞样细胞 ,然后利用激酶特异性抑制剂研究了在fMLP刺激下细胞内PI3 K、p38和ERK激酶在肌动蛋白聚合中的作用 .结果 0 1μmol/L的PI3 K抑制物Wortmannin抑制fMLP诱导的肌动蛋白聚合 ;而 5 0 μmol/L的 p38激酶抑制物SB2 0 35 80和 5 0 μmol/L的ERK激酶抑制物PD0 980 5 9对fMLP诱导的肌动蛋白聚合没有影响 ,但 p38和ERK在不同程度上受到PI3 K的调节 .这说明PI3 K介导的肌动蛋白聚合信号传导途径不同于PI3 K介导的 p38和ERK激活途径 .