走马胎中的三萜皂苷类成分及其体外抗肿瘤活性研究

目的研究走马胎根茎的三萜皂苷类成分及其体外抗肿瘤活性。方法采用溶剂萃取和柱色谱方法分离纯化,根据理化性质和波谱学数据鉴定化合物结构。采用MTT法测试三萜皂苷化合物的抗肿瘤活性。结果分离得到了7个三萜皂苷类化合物,包括3β-O-{β-D-吡喃木糖基-(1→2)β--D吡-喃葡萄糖基-(1→4)α--L吡-喃阿拉伯糖基}西-克拉敏A(1);3β-O-{α-L吡-喃鼠李糖基-(1→3)-[β-D-吡喃木糖基-(1→2)]β--D吡-喃葡萄糖基-(1→4-[β-D吡-喃葡萄糖-(1→2)]α--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(2);lysikoianoside(3);3β-O-β-L吡-喃鼠李糖基-(1→3)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃木糖基-(1→2)]β--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]α--L吡-喃阿拉伯糖基-西克拉敏A(4),3β-O-{β-L吡-喃鼠李糖基-(1→3)-[β-D吡-喃木糖基-(1→2)]β--D吡-喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-6-O乙-酰氧基-吡喃葡萄糖基(1→2)]α--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(5),Ard isiacrisp in A(6)和3β-o-{α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-[β-D-xylopyranose-(1→2)]β--D-glucopyranosyl-(1→4)α--L-arab inopyranosyl}-3β-hydroxy-13β,28-epoxy-oleanan-16-oxo-30-al(7)。结论化合物1和3为首次从该植物中分离得到,化合物7首次从该属植物中分离得到。其中化合物2对BCG-823,EJ和Hepg2细胞有较好的抑制活性(IC50分别为0.29,9.99和2.03μg/m l)。化合物3对EJ细胞有选择性抑制作用(IC50为7.20μg/m l),化合物7对Hepg2细胞有选择性抑制活性(IC50为8.53μg/m l)。

胡椒碱及其衍生物对SH-SY5Y细胞的保护作用研究

对胡椒碱进行结构改造,合成了4个胡椒碱衍生物。以高浓度皮质酮(corticosterone)模拟抑郁及焦虑症神经细胞损伤状态。对包括胡椒碱在内的5个化合物进行了SH-SY5Y细胞保护作用的研究。结果表明:胡椒碱、5-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2E,4E-pentadienoic acid n-propylamine amide(2)以及5-(3,4-methylenedioxyphenyl)-2E,4E-pentadienoic acid N-methyl piperazine amide(4)对SH-SY5Y细胞有较好的保护作用。其中化合物2对SH-SY5Y细胞具有明显和持久的保护作用。

紫荆化学成分的研究

目的：研究紫荆Cercischinensis的化学成分。方法：通过多种柱色谱方法进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果：分离并鉴定了9个化合物：3-甲氧基槲皮素（1），槲皮素（2），（2R，3R）-3，5，7，3’，5-五羟基黄烷（3），3’，5，5’，7-四羟基双氢黄酮（4），[＋]-紫杉叶素（5），（2R）-柚皮素（6），无羁萜（7），β-谷甾醇（8），胡萝卜苷（9）。结论：化合物1和化合物3—7是首次从该属植物中分离得到。

胡椒碱及其衍生物抗疲劳和心肌细胞保护作用研究

目的对胡椒碱母核结构修饰,并研究胡椒碱及其衍生物的抗疲劳和心肌保护作用。方法胡椒碱及其衍生物(胡椒酸乙酯,胡椒酸甲酯,四氢胡椒碱)的水溶液灌胃给药,通过小鼠力竭游泳实验,测定血浆肌酸激酶,血浆乳酸脱氢酶,血浆尿素氮,血乳酸,血糖等指标;采用异丙肾上腺素损伤原代培养乳鼠心肌细胞,通过MTT法检测心肌细胞存活率,探讨胡椒碱及其衍生物对心肌细胞的保护作用。结果胡椒碱及其衍生物的水溶液能明显的改善小鼠外周血血象,降低小鼠血清中尿素氮、肌酸激酶,血乳酸;其中四氢胡椒碱和胡椒酸甲酯对异丙肾上腺素损伤的心肌细胞有明显的保护作用。结论胡椒碱及其衍生物可以通过其抗疲劳作用和心肌保护作用,提高机体运动机能。

皂苷体外生物转化水解反应的研究进展

皂苷(Saponin)是苷元为三萜或螺旋甾烷类的一类较复杂的糖苷类化合物。皂苷分子中糖链的结构与其生物活性密切相关,皂苷中糖链结构的复杂性给糖基的选择性水解研究带来了许多困难。生物转化是利用各种酶体系对天然活性化合物进行合成与结构修饰。利用生物转化技术能对皂苷完成一些有机合成难以进行的水解反应,得到更具新药开发价值的目标化合物。本文综述近几年微生物和游离酶转化技术对皂苷水解反应的研究进展,为皂苷生物转化研究的发展提供方向。

HPLC-ELSD同时测定走马胎中3种三萜皂苷含量

目的建立同时测定走马胎中3种三萜皂苷类成分的RP-HPLC-ELSD方法。方法选用HPLC Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇55%CH3OH^90%CH3OH梯度洗脱40 min,流速0.8 mL·min-1。Althche 2000ES ELSD检测器,漂移管温度:100。C,空气流速2.8 L·min-1。结果结果表明3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(a),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-6-O-乙酰基吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(b),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)--D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-16-羟基-13,28-环氧-齐墩果烷(c)的检测分别在3.000~9.000μg,8.685~37.635μg,3.300~10.450μg线性关系良好。药材中三种成分的平均回收率(n=9)为99.64%(RSD 0.78%),99.93%(RSD 0.65%),100.07%(RSD 1.37%)。结论该方法操做简单、结果准确具有较好的重复性和稳定性,为走马胎药材质量控制提供了一个很好的依据。

HPLC测定天葡片中红景天苷的含量

目的建立天葡片中红景天苷含量测定方法。方法采用YMCC18柱（4．6mmx250mm，5岬），流动相为甲醇一水（17：83），流速0．8mL／min，检测波长223nm，柱温为25℃，外标法测定。结果红景天苷进样量在1．04-10．4μg（r=O．9999）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率（n=6）为96．14％，RSD为0．2％。结论本方法简便、快速、准确，适用于天葡片中红景天苷的测定，为天葡片的质量控制提供一定依据。

远志抗抑郁有效部位中寡糖酯单体的分离及活性研究

目的:研究远志的抗抑郁活性成分。方法:用色谱法分离远志的化学成分,根据波谱学分析鉴定了化合物的结构,用MTT法评价其细胞毒活性。结果从远志分离得到8个化合物,分别鉴定为:西伯利亚远志糖A1(sibiricose A1,1),西伯利亚远志糖A5(sibiricose A5,2),tenuifoliside A(3),西伯利亚远志糖A6(sibiricose A6,4),3,4,5-三甲氧基肉桂酸甲酯(3,4,5-trimethoxycinnamate,5),远志酮Ⅲ(polygalaxanthoneⅢ,6),tenuifolioses A(7),tenuifolioses H(8)。结论:化合物1为首次从远志中分离得到,远志中的寡糖酯类成分对谷氨酸造成的PC12细胞损伤均有一定的保护作用。

走马胎中皂苷成分AG4对MCF-7肿瘤细胞增殖的影响及机制研究

目的研究走马胎皂苷成分AG4对不同肿瘤细胞株增殖的影响,检测其对MCF-7细胞凋亡、细胞周期、Caspase-3和Caspase-9的活性、以及SOD活性和GSH、MDA含量的影响。方法终浓度为0.51～8.13μmol.L-1的AG4作用于肿瘤细胞株24～72 h后,采用MTT比色法检测AG4对9种肿瘤细胞株增殖的影响;筛选出对AG4敏感的细胞株,Hoechst染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化;采用相应试剂盒分别进行SOD活性和GSH、MDA含量的测定;采用Caspase-3和Caspase-9活性检测试剂盒对Caspase-3和Caspase-9活性进行检测。结果AG4作用于A549、BeL-7402、BGC-823、C6、EJ、HeLa、HepG2、MCF-7、LS180细胞24 h、48 h和72 h的IC50为3.67～11.1μmol.L-1,其中MCF-7细胞株对AG4较为敏感,24 h、48 h和72 h的IC50值分别为(3.67±0.61)、(3.76±0.66)和(4.03±0.47)μmol.L-1。高、中两剂量的AG4作用MCF-7细胞24 h后,细胞凋亡形态明显,发生早期凋亡;细胞阻滞在S期;SOD活性和GSH含量降低,MDA含量明显升高;Caspase-3和Caspase-9的活性均明显高于正常对照组。结论AG4对MCF-7细胞的增殖抑制作用最为明显。AG4干预MCF-7细胞内的氧化还原系统、阻滞周期并通过激活线粒体凋亡信号转导通路来诱导细胞凋亡。

远志寡糖酯化合物的神经保护作用及初步构效关系研究

目的研究远志中寡糖酯类化合物的神经保护作用和探讨化合物的初步构效关系。方法采用MTT法和BrdU标记法评价寡糖酯单体化合物对神经细胞的保护作用。结果在体外皮质酮诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤模型上,化合物tenifoliside A、tenuifoliose J、tenuifolioses A、1-o-(E)-Benzoyl-[3-o-(E)-Alphatolluyl]-β-D-fructofuranosy-(2→1)-[β-D-glu-copyranosyl-(1→2)]-α-D-gluc-opyranosid表现出了很好的神经保护作用,并呈一定的剂量依赖性。结论远志寡糖酯类化合物对皮质酮诱导损伤的SH-SY5Y神经细胞有保护作用,其保护作用强弱与化合物类型及其浓度,化合物的母核结构,取代基位置和取代基种类有关。

HPLC测定迪可颗粒中芍药苷和粉防己碱的含量

目的建立迪可颗粒(赤芍、防己、红花、山药等)中芍药苷和粉防己碱的高效液相测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为diamonsilODS(5μm,250mm×4.6mm)分析柱;芍药苷流动相为0.025moL·L-1KH2PO4乙腈(80∶20),检测波长230nm;粉防己碱流动相甲醇乙腈0.003moL·L-1KH2PO4二乙胺(55∶25∶20∶0.06),检测波长230nm;流速均为1.0mL·min-1。结果精密度和稳定性良好;芍药苷在0.3034～6.0672μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均回收率为97.19。粉防己碱在0.0278～0.2227μg范围内峰面积和进样量呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为98.38。结论本方法简便、专属、重现性好,可有效控制迪可颗粒的质量。

Tenuifoliside A基于ERK通路保护皮质酮损伤C6细胞作用研究

目的探讨远志寡糖酯成分Tenuifoliside A(TFSA)对皮质酮诱导大鼠神经胶质瘤细胞(C6)损伤的保护作用及其分子机制。方法建立以0.8 mmol.L-1的皮质酮作用于C6细胞48h的损伤模型;用皮质酮预处理C6细胞30 min后加入30、10和3μmol.L-1的TFSA,共同作用48 h,CCK试剂盒检测TFSA对皮质酮诱导C6细胞损伤的存活率;荧光显微镜观察C6细胞Hoechst 33258染核后凋亡形态变化;Western blot检测C6细胞内ERK及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达;Caspase检测试剂盒检测C6细胞内Caspase激酶活力的变化。结果与正常对照组比,0.8 mmol.L-1的皮质酮对C6细胞有明显的损伤作用,其细胞存活率降低至69.58%(与正常组相比,P<0.01);细胞核形态改变,出现凋亡小体;胞内ERK蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显降低(与正常组相比,P<0.01),Caspase-3激酶的活力增加(P<0.01)。与模型组相比,各剂量组的TFSA均有不同程度对抗皮质酮损伤的作用,细胞存活率明显提高至84.48%(与模型组相比,P<0.01),同时细胞核形态有明显改善;细胞内的ERK蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显增加(P<0.01);Caspase-3激酶活力明显降低。结论 TFSA对皮质酮诱导损伤的C6细胞具有保护作用,其机制可能与TFSA能激活C6细胞内ERK通路,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,降低Caspase-3激酶活性有关。

走马胎中化合物AG4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的影响

目的:研究走马胎中化合物AG4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:建立人鼻咽癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,以抑瘤率为指标研究化合物AG4的体内抑瘤作用及AG4干预对裸鼠的一般情况(体质量、活动、食欲等)的影响;同时采用实时荧光定量PCR法观察AG4对肿瘤内凋亡相关基因表达的影响。结果:阳性药顺铂组(2.00 mg·kg-1)对荷瘤裸鼠的抑瘤率为49.41%,3.02 mg·kg-1AG4组的抑瘤率为42.34%,AG4对裸鼠体质量及肝、脾、肾的脏器指数没有明显影响;AG4能明显升高Bax和Bad基因的相对表达量,降低Bcl-2基因的相对表达量。结论:AG4在裸鼠体内对人鼻咽癌细胞有较强的抑制作用,对裸鼠没有明显的毒副作用,其作用机制可能与激活线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡有关。

胡椒碱及其衍生物对原代培养心肌细胞损伤的保护作用

背景:胡椒碱是滇产回心草心脏保护作用的主要物质基础,同时,其化学结构相对简单,可进行结构修饰,为进一步研发新型的抗心肌缺血的化合物奠定基础。目的:观察胡椒碱及其7个衍生物对异丙肾上腺素和过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用。方法:采用异丙肾上腺素和H2O2诱导原代培养大鼠心肌细胞致心肌细胞损伤模型,MTT法检测不同剂量胡椒碱及其衍生物对损伤心肌细胞的影响。结果与结论:7×10-8mol/L胡椒碱、7×10-8,7×10-7mol/L胡椒酸甲酯、7×10-8,7×10-7,7×10-6mol/L吡咯烷产物、7×10-8,7×10-7,7×10-6mol/L二乙胺产物可不同程度地提高异丙肾上腺素诱导的心肌细胞损伤模型中心肌细胞的存活比例(P<0.05),但未见剂量相关性;7×10-8mol/L胡椒碱(P<0.05)、7×10-8,7×10-7mol/L吡咯烷产物和7×10-8,7×10-7mol/L二乙胺产物可提升过氧化氢诱导的心肌细胞损伤模型中心肌细胞存活比例,未见明显的剂量相关性。由此推测胡椒碱及其衍生物可显著缓解异丙肾上腺素和过氧化氢所致的心肌细胞损伤,且其吡咯烷产物和二乙胺产物作用效果优于胡椒碱。

RP-HPLC法同时测定迪可颗粒中粉防己碱和防己诺林碱的含量

目的:建立迪可颗粒中粉防己碱和防己诺林碱含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为 Kromasil C_(18)(5μm,250mm×4.6mm)分析柱;流动相:甲醇-乙腈-0.003mol·L^(-1)磷酸二氢钾-二乙胺(55:25:20:0.06);流速1.0mL·min^(-1);检测波长为230nm。结果:精密度和稳定性均良好;粉防己碱浓度在1.392～11.14μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为98.4%;防己诺林碱浓度在0.575～6.90μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为97.9%。结论:本方法简便、专属,重复性好,可用于迪可颗粒中粉防己碱和防己诺林碱的含量测定。

医院药学科学学位研究生培养教育模式初探

目的:依托医院教学培养基地,探索药学科学学位研究生培养的特色模式。方法:针对新形势下高层次药学科研人才培养的要求,注重临床和基础结合的创新意识、实践能力的培养,强化导师团队等措施,完善药学科学学位研究生教学培养模式。结果:医院科研和临床相结合的研究平台,有益于研究生的创新素质和个性化培养;同时研究生读写能力培养,参与实践能力,团队合作精神,导师团队青年科研骨干在研究生培养中的带头作用,都与研究生培养绩效显著相关。结论:发挥医院办学的优势,有利于提高研究生的科学思维和创新能力,推动学科发展。

RP-HPLC法同时测定芍枣胶囊中3种主要成分的含量

目的：建立同时测定芍枣胶囊中3种主要成分的RP-HPLC方法。方法：采用RP-HPLC法,选用Kromasil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相：乙腈（A）和水（B）;洗脱梯度：0~10 min 10%~19%A,10~16 min 19%~20%A,16~22 min20%~90%A,22~25 min 90%A,25~25.1 min 90%~10%A,25.1~35 min 10%A;流速：0.8 m L·min-1。Alltech 2000ES ELSD检测器,漂移管温度：115℃,空气流速3.3 L·min-1。结果：结果表明芍药苷,斯皮诺素,3,6＇-二芥子酰基蔗糖的检测分别在0.975~5.850μg,0.060~0.660μg,0.100~0.600μg范围内线性关系良好。上述3种成分的平均回收率（n=9）分别为99.5%（RSD 0.69%）,100.2%（RSD 1.03%）,99.9%（RSD 1.20%）。结论：该方法操作简单、结果准确,具有较好的重复性和稳定性,为芍枣胶囊的质量控制提供理论参考。