酸性代谢环境对心肌细胞分化影响的研究进展

以干细胞为基础的心肌再生是治疗心肌梗死的前沿课题,控制干细胞的代谢微环境能影响干细胞向心肌细胞的分化,在临床应用中有着广阔前景。pH值是心肌细胞发育过程中代谢环境的重要指标。乳酸作为主要的酸性代谢产物之一,是调节心肌细胞早期发育阶段酸性代谢环境的关键代谢产物。现就pH值在心肌细胞生存与分化过程中的影响及相关机制的研究进展做一综述。

机械牵张对人诱导多能干细胞分化来源的心肌细胞成熟的影响

目的通过使用标准的化学定义和基于小分子诱导方案(chemically defined medium,3 components,CDM3)获得人诱导多能干细胞分化来源的心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPSC-CMs),进一步对其施加机械牵张,探讨机械牵张对hiPSC-CMs成熟的影响及潜在机制。方法复苏、培养和鉴定hiPSCs后,将hiPSCs接种到覆有基质胶的传统培养皿上。24 h后在荧光显微镜下通过DAPI荧光观察细胞生长情况,并通过八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)荧光进行hiPSCs干性鉴定,在细胞汇合度达到80%时更换CDM3分化培养基,分化6 d后将获得的hiPSC-CMs分为对照组和机械牵张组,拉伸结束后重新种板培养24 h后在荧光显微镜下通过DAPI荧光观察细胞生长情况,通过心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和肌球蛋白轻链2V(myosin light chain 2V,MLC2V)荧光进行hiPSC-CMs心肌细胞标志物鉴定,Piezo1荧光进行潜在机制研究。结果hiPSCs培养24 h免疫荧光显示:OCT4发出绿色荧光,hiPSCs保持干性。DAPI发出蓝色荧光:细胞呈克隆生长,细胞形态均一。机械牵张结束后重新种板培养,24 h后免疫荧光显示机械牵张组较对照组心肌标志物cTnT和MLC2V表达增高(P<0.05);机械牵张组较对照组机械敏感型离子通道Piezo1蛋白表达增高(P<0.05)。结论机械牵张可以促进人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞的成熟,这可能与Piezo1蛋白表达增高有关。

80岁以上老年患者心脏手术77例临床分析

目的:对80岁以上患者心脏手术结果资料进行临床分析,评价临床选择标准和手术疗效。方法:2002年7月至2009年5月接受心脏手术的≥80岁患者77例,其中瓣膜病7例,冠心病65例,先天性心脏病1例,大血管病等4例。结果:66例患者手术后痊愈出院,治愈率85.7%。手术死亡11例,全部为冠心病行冠状动脉旁路移植手术患者,病死率为14.3%,其中男性9例,女性2例。死亡原因为心力衰竭(心衰)7例,呼吸衰竭3例,大出血1例。重症监护室时间为(3.5±3.3)d,住院时间为(25.1±13.1)d。并发症发生率为32.5%。结论:虽然80岁以上心脏手术并发症发生率高,住院时间长,手术死亡率高,但是手术使患者摆脱心脏疾病症状,80岁以上老年患者进行心脏手术是可行的。

体外循环与非体外循环冠状动脉旁路移植术临床分析

目的 比较体外循环冠状动脉旁路移植术（on—pump CABG，on—pump）和非体外循环冠状动脉旁路移植术（off—pump CABG，off—pump）的临床应用效果。方法 回顾2003年12月-2005年1月间我院行冠状动脉旁路移植术（CABG）195例的临床资料，依据术中采用不同的手术方式分为on—pump组和off—pump组。并对两组患者的术前、术后临床资料、术后并发症发生情况进行分析。结果 两组患者术前一般临床资料比较差别无统计学意义；术后off—pump组发生并发症17例，on—pump组26例（P=0．000）；off-pump组住院死亡2例，on—pump组死亡6例（P=0．025）。结论 在多支左主干病变中，off—pump和on—pump在再血管化的应用上无差别；off—pump后的心电图改变、死亡率和并发症发生率比on—pump患者低，但是合并瓣膜病或严重的3支血管病变、左主干病变、室壁瘤形成的患者更适宜采用on—pump，off—pump不能取代on—pump。

冠状动脉旁路移植术后心房颤动的危险因素分析

目的为预测冠状动脉旁路移植术(CABG)后是否发生心房颤动(AF),对其术前危险因素进行分析。方法收集安贞医院2007年9月至2008年4月226例体外循环冠状动脉旁路移植术(CABG)或非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCAB)患者的临床资料,根据术后3d内是否出现AF持续5min以上分为非AF组和AF组,分析两组患者超声心动图检查指标及术前一般临床资料。两组患者均采用胸骨正中切口,并在相同条件下完成手术。结果术后24例患者(10.6%)发生AF。AF组中左心房前后径>35 mm的患者高于非AF组[41.7%(10例)vs.22.3%(45例),χ2=4.380,P=0.036)];二尖瓣反流患者高于非AF组[37.5%(9例)vs.17.3%(35例),χ2=5.568,P=0.018)];左主干病变患者高于非AF组[33.3%(8例)vs.12.4%(25例),χ2=7.560,P=0.006];年龄AF组高于非AF组(65.7±9.5岁vs.60.1±10.1岁,t=-2.724,P=0.010)。两组患者单因素分析结果:高龄、二尖瓣反流、左心房大、左主干病变等手术前临床指标是术后发生AF的危险因素;手术后呼吸机使用时间(χ2=4.190,P=0.040),心电监护时间(χ2=5.948,P=0.015),住院费用(χ2=4.110,P=0.043)等两组间比较差异有统计学意义。结论CABG后发生AF与高龄、二尖瓣反流、左心房增大、左主干病变等危险因素有关。临床资料、心电图、超声心动图检查等有助于预测CABG后是否发生AF,以使更好地预防和治疗,降低术后AF的发生率。

13例室壁瘤切除左心室成形术的临床疗效观察

目的：评估冠心病合并室壁瘤左心室成形术的临床效果。方法：完成对13例室壁瘤（男性11例,女性2例）的手术。结果：全组无1例死亡。本组手术前的室壁瘤大小（45.61±10.70）mm,占左心室容积〉50%为12例（92.31%,12/13）；手术后呼吸机使用时间1-2d（其中1例超过2d）,心电监护时间2-3d（其中5例超过3d）,主动脉内球囊反搏（IABP）3例（23.08%,3/13）；本组患者术前（37.31±11.73）与术后（52.31±10.46）的左心室射血分数（P〈0.01）,以及术前（64.28±7.50）mm与术后（57.45±5.11）mm的左心室大小（P〈0.05）比较差异均有显著性。随访10例患者,平均（24±4）个月,除2例出现心力衰竭和胸闷气短症状外,其余均正常生活。结论：冠心病合并室壁瘤的左心室成形手术是安全可靠的,特别是对于大型室壁瘤,该手术能更好保持适当的左心室容积和几何形态,恢复改善左心室功能。

左心室室壁瘤所致心律失常的6例外科治疗

目的:对左心室室壁瘤合并心律失常的患者进行左心室室壁瘤切除,同时行射频消融心脏手术的结果资料进行临床分析,评价其手术疗效。方法:入选我院2008年1月至2011年5月间,接受左心室室壁瘤合并心律失常的患者进行心脏手术6例。心律失常均为药物无法控制的顽固性心律失常,心电图术前证实。结果:6例患者手术后均痊愈出院,治愈率100%。单纯行左心室室壁瘤切除的同时,2例施行左心室室壁瘤颈部内膜射频消融术,4例施行左心室室壁瘤颈部外膜射频消融术。体外循环时间(100.7±48.6)min,循环阻断时间(67.9±36.1)min。本组病例的术前与术后左心室射血分数分别为(35.3±10.2)%与(51.6±10.4)%,术前和术后相比,差异有统计学意义(P<0.05);术前和术后的左心室舒张末径大小分别为(60.5±4.5)mm与(51.2±5.5)mm,术前和术后相比差异有统计学意义(P<0.01);呼吸机辅助时间为(1.2±0.4)d,ICU时间为(1.5±0.8)d,住院时间为(23.3±10.2)d。心电图恢复窦性心律,无各种心律失常出现。随访5例,随访时间3～14个月,治疗效果良好,心电图显示为窦性心律,无心律失常复发,心脏超声示心功能正常,心功能均达Ⅰ～Ⅱ级,生活质量较术前明显提高。结论:左心室室壁瘤患者进行左心室室壁瘤切除,同时进行射频消融术,使患者摆脱心脏疾病症状,这种心脏手术是安全可行的。

体外培养人大隐静脉新内膜形成模型的建立

目的 为了更好地研究静脉再狭窄的机制及预防治疗 ,建立一种人的大隐静脉体外培养模型 ,并对新内膜进行初步研究。 方法 取 6例冠状动脉旁路移植手术患者大隐静脉 ,体外培养 14天 ,常规病理学染色 ,图象分析 ;通过α-平滑肌细胞骨架 (α- actin)免疫组织化学染色方法检测内膜增生细胞 ,末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口末端标记 (TUNEL)方法检测内膜凋亡细胞。 结果 培养的大隐静脉在 14天后有新内膜形成和显著的中膜增厚 ,与正常血管相比差别具有显著性意义 (P<0 .0 1)。新内膜细胞α- actin免疫组织化学染色结果呈阳性细胞 ,较正常血管内膜明显增多。在新内膜中荧光和核边聚分裂数目极少 ,与正常血管相比差别无显著性意义。 结论 在人的大隐静脉体外培养中有新内膜形成和中膜增厚 ,增生的细胞可能是肌成纤维细胞 ,故抑制肌成纤维细胞增生迁移的同时 ,促进凋亡将是静脉移植血管病变潜在的治疗方法。

维生素C明显提高小鼠诱导多能干细胞分化为心肌细胞的诱导效率

目的:将维生素C作为诱导剂,观察其对小鼠诱导多能干细胞(miPSC)分化为心肌细胞效率的影响,寻找一种更安全、更高效的诱导方法。方法:复苏miPSC,传代培养后,利用悬滴培养法使miPSC形成拟胚体(EBs),用含维生素C的分化培养基对其进行诱导分化,对照组不添加诱导剂,记录两组拟胚体出现搏动的时间、数量,计算分化率,观察维生素C作为诱导剂,对miPSC分化为心肌细胞效率的影响。结果:在用含10^(-4)mmol/m L维生素C的分化培养基时,大概有62.5%的拟胚体出现搏动,而不加任何诱导剂组约有8.3%的拟胚体出现搏动。各组搏动拟胚体cTnT,a-actinin免疫染色阳性。结论:维生素C作为一种诱导剂,能显著提高miPSC分化为心肌细胞的效率,并且心肌特异性蛋白cTnT,a-actinin染色阳性,应用维生素C作为诱导剂,诱导miPSC向心肌细胞分化是一种非常理想的诱导方法。

临床路径式教学法在住院医师规范化培训心血管外科教学中的应用

临床路径(Clinical Pathway,CP)是针对某种疾病的监测、治疗、康复和护理所制定的一个有严格顺序、有准确时间要求的诊疗计划,使病患获得最高效的医疗服务。CP理念计划性强,程序规范统一,与住院医师规范化培训标准化要求相一致。临床路径式教学法在住院医师规范化培训心血管外科疾病教学中的应用,对于规范培训住院医师心血管外科疾病的诊治、管理行为以及提高综合素质有非常重要的意义,不仅培养了住院医师正确的临床思维方式、训练了临床实践能力,还可以规范带教教师的教学行为,增强教学科学性和系统性,使规范化培训更加符合要求。

小鼠颈动脉狭窄模型与T细胞免疫缺陷的初步研究

目的 建立一种血管再狭窄模型 ,排除T淋巴细胞的免疫排斥反应 ,更好地进行血管狭窄机制研究。方法 新近建立了一种新型BALB c nude裸鼠的颈动脉再狭窄模型 ,对其左颈总动脉进行了结扎 ,在 2周后作病理学观察。结果 BALB c nude在手术后 2周有明显的血管狭窄 ,并且结扎的动脉和周围组织粘连较轻 ;同时另一品系C57BL 6J小鼠在手术后 4周才出现明显的血管狭窄 ,而且动脉和周围组织粘连严重。结论 血管再狭窄是血管再构和新内膜形成的共同原因 ,在动脉狭窄模型的建立上BALB c nude较C57BL

两种品系小鼠左颈总动脉结扎建立血管再狭窄模型实验研究

为了建立一种与临床上冠脉搭桥手术和经皮腔内冠状动脉成形术 ( PTCA)等病理过程相似的血管再狭窄模型 ,探讨血管再构和新内膜形成的机理 ,及在血管再狭窄中所起的重要作用 ,我们用不同品系 ( BAL B/ c A和 C57BL / 6J)小鼠的左颈总动脉进行了结扎 ,在 2周和 4周后 ,分别作病理学观察。结果发现两种品系小鼠产生了不同的病理结果 ,C57BL/ 6J小鼠有明显的血管狭窄和炎症细胞浸润 ,而 BAL B/ c A小鼠虽有炎症细胞的浸润 ,但血管内膜无炎症细胞浸润 ,也无血管狭窄表现。结果提示

腺病毒对内皮及成纤维细胞和血管环转染及基因表达的研究

目的 比较腺病毒对不同血管内皮及成纤维细胞的转染和对人冠状动脉搭桥动脉静脉血管的转导,为携带目的基因的腺病毒治疗血管狭窄提供更好的转染途径。方法 腺病毒Ad5CMVLacZ体外转染血管内皮细胞（HUVEC）和成纤维细胞（PA317）并间接转导入胸廓内动脉和大隐静脉血管环,运用β-半乳糖苷酶活性X-gal组织化学染色,观察转染情况,并进行动态分析。结果 腺病毒载体能使外源性基因有效地转入HUVEC、PA317及两种血管环并获得蛋白表达;两种血管环在转染10d后仍有β-半乳糖苷酶蛋白的表达,且大隐静脉有新内膜形成和中膜的增厚。结论 从细胞水平上证明腺病毒载体能将治疗性目的基因导入各种血管细胞及动静脉血管并获得表达,提示血管内膜和外膜都是腺病毒有效转染的途径;临床上无论动脉或静脉的血管狭窄都可能通过用腺病毒作为载体进行基因治疗和预防。

NO与心血管疾病细胞凋亡

NO是重要生物活性物质 ,介导着心肌、血管平滑肌、巨噬细胞、血管内皮细胞等程序性死亡与凋亡 ,与心血管疾病有密切的关系。

心肌缺血预适应的延迟性保护作用

内源性缺血预适应(IPC)、特别是IPC的延迟性保护作用是目前研究的热点,本文综述最新IPC的延迟性保护作用——抗心肌缺血再灌注损伤的机理。

心室壁瘤切除左心室成形术治疗冠状动脉正常心室壁瘤患者的临床效果

目的观察心室壁瘤切除左心室成形术治疗冠状动脉正常心室壁瘤患者的临床疗效。方法收集2008年1月至2011年5月北京安贞医院心脏外科行心室壁瘤切除左心室成形术的冠状动脉正常心室壁瘤患者共14例，所有患者均有心前区疼痛不适，伴心悸、气促和胸闷等，活动后加重。观察患者手术前后的左心室射血分数和左心室舒张末内径。结果14例患者手术后均痊愈出院，术前与术后左心室射血分数分别为（37±9）％与（50±8）％，术前与术后比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；术前和术后的左心室舒张末内径大小分别为（62±10）mm与（53±6）mm，术前术后左心室舒张末内径指标比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。14例患者治疗效果良好，心功能均达Ⅰ～Ⅱ级，随访2～12个月。结论通过心室壁瘤切除左心室成形术治疗，患者恢复顺利，没有心脏手术并发症的发生，可以明显改善左心室的功能，这种心脏手术是安全可行的。

P-选凝素与心肌缺血-再灌注损伤

研究心肌缺血 -再灌注损伤中 P-选凝素 ( P- selectin)的重要作用。P- selectin是一种糖蛋白黏附因子 ,存在于内皮细胞和血小板 ,并介导血小板、内皮细胞和多形核白细胞 ( PMNs)等之间的相互作用 ,且与一氧化氮有着密切的关系 ,形成了许多复杂的炎症病理过程 ,在心肌缺血 -再灌注损伤中起到了关键的作用。特别是 P- selectin与晚期再灌注损伤、血小板及心肌损伤中治疗作用、最新的 P- selectin基因缺陷小鼠和糖尿病小鼠等的心肌缺血 -再灌注损伤中表现的深入研究 ,使其在缺血 -再灌注损伤中的重要性和复杂性显得更加突出。

循证医学在心血管外科进修生带教中的应用

循证医学的实质就是遵循证据,即医疗决策应以客观研究结果为依据。循证医学是指慎重、准确和明智地应用目前可获得的最好临床证据,同时将临床医师的临床实践经验与客观的科学研究证据结合,考虑患者的价值和愿望,将三者完美地结合起来,制定每个患者最佳的治疗方案。心血管外科是外科学中专业性最强的学科之一,如何在有限的时间内把进修医生培养成为具有一定专业水准的心血管外科医生,笔者将循证医学的精神贯彻于心血管外科进修生带教中,取到了较好的带教效果。