藏药防治高尿酸血症的机制及临床研究进展

高尿酸血症是嘌呤代谢紊乱所致代谢性疾病,为痛风、高血压、糖尿病、心血管疾病和慢性肾脏疾病的独立危险因素。藏药因在防治高尿酸血症方面独具特色的方法和疗效,且毒副作用小,故倍受医药学界的关注。现代药理学研究表明,多种藏药方剂及单味药材可通过抑制黄嘌呤氧化酶活性、减少炎症因子表达和调整单胺类神经递质释放等方式发挥抗高尿酸血症作用。该文通过归纳总结现有文献,从藏医病因病机、临床用药及药效机制等方面对藏药防治高尿酸血症的研究进行综述,以期为其临床合理应用开发藏药提供参考。

高尿酸血症轻度认知功能障碍模型大鼠肠道菌群变化

目的探究高尿酸血症轻度认知功能障碍模型大鼠肠道菌群的变化。方法给予大鼠含有2%尿酸和2%氧嗪酸钾的高尿酸复合饲料12周,构建高尿酸血症轻度认知功能障碍模型。采用Morris水迷宫、血生化等指标对模型进行评价,并利用16S rDNA测序研究该模型的肠道菌群变化。结果与对照组相比,模型大鼠血清尿酸明显升高,逃逸潜伏期明显延长,以及目标象限停留时间明显缩短。且模型大鼠肠道菌群多样性发生改变,14种菌群的相对丰度显著变化,结论尿酸持续性升高可诱导肠道菌群结构失衡,而肠道菌群失调与轻度认知功能障碍的发生发展密切相关,可能是高尿酸血症轻度认知功能障碍的机制之一。

基于网络药理学与分子对接技术的菊苣抗高尿酸血症作用机制研究

运用网络药理学与分子对接技术研究菊苣抗高尿酸血症的主要活性成分及作用机制.通过TCMSP收集菊苣的化学成分及靶点并使用Uniprot进行筛选,建立"菊苣有效成分-靶点数据库".在GeneCards、Drugbank、Disgenet及OMIM数据库中搜集高尿酸血症靶点,预测菊苣中抗高尿酸血症的活性成分的潜在作用靶基因.用Cytoscape3.8.0软件构建菊苣的"药物-活性成分-作用靶点"可视化网络.在STRING中导入预测靶点,并构建菊苣治疗高尿酸血症靶点的PPI网络.用R语言中"clusterProfiler"安装包进行GO功能富集和KEGG通路分析,采用AutoDockVina进行分子对接.经筛选共得菊苣活性成分10个.共预测到活性靶点98个,疾病靶点860个,去重结合得疾病靶点菊苣抗高尿酸血症潜在作用靶点39个,构建PPI网络分析得核心靶点有TP53、IL6、TNF等.GO富集分析结果77条,KEGG分析结果127条,主要涉及细胞因子受体结合、细胞因子活性等生物过程,通过IL17和AGE-RAGE信号通路发挥作用.分子对接结果为木犀草素和β-谷甾醇与靶蛋白亲和力最好.菊苣中的多种活性成分如木犀草素、β-谷甾醇等可能通过TP53、IL6、JUN、CASP3和TNF等靶点对信号通路进行调控,涉及多种生物过程,从而发挥抗高尿酸血症的疗效.

基于多元数据融合分析的彝药两头毛治疗胆汁淤积型肝损伤药效及机制研究

采用网络药理学结合分子对接技术,多元数据融合分析彝药两头毛治疗胆汁淤积型肝损伤的作用机制,并进行相关药效验证.通过构建“成分-靶点”网络,蛋白相互作用网络,利用DAVID 6.8数据库进行KEGG通路富集分析,借助Cytoscape 3.7.1软件构建“成分-靶点-通路”网络,将活性成分与核心靶点进行分子对接验证,并建立小鼠胆汁淤积型肝损伤模型进行药效验证.网络药理学分析筛选出两头毛有效活性成分共84个,治疗疾病的潜在靶点有283个,KEGG分析结果显示TNF、PI3K-Akt、NF-kB等信号通路是发挥其治疗胆汁淤积型肝损伤的关键通路.分子对接结果表明,胡椒碱、Diincarvilone A、熊果酸等与AKT1、STAT3、MAPK3、IL6等靶点均具有较好的结合活性.动物实验结果显示,两头毛能明显或部分降低模型小鼠血清中ALT、AST、ALP、TBIL及DBIL的含量/活性.网络药理学及分子对接分析结果与药效实验结果基本相一致,表明两头毛对胆汁淤积型肝损伤具有较好的治疗作用.

基于肠道菌群和系统药理学探讨藏药十五味乳鹏丸抗高尿酸血症肾病的作用机制

目的基于肠道菌群、网络药理学和分子对接技术多维度挖掘藏药十五味乳鹏丸(Shiwuwei Rupeng Pills,SRP)抗高尿酸血症肾病(hyperuricemic nephropathy,HN)的作用机制。方法腺嘌呤联合乙胺丁醇构建HN大鼠模型,设置对照组、模型组、别嘌醇(50 mg/kg)组和SRP高、低剂量(1.2、0.4 g/kg)组。连续给药14 d后,检测大鼠血清中尿酸(uric acid,UA)、肌酐(creatinine,CREA)及尿素氮(urea nitrogen,BUN)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肾组织病理变化。获取SRP和HN核心靶点,构建“药物-活性成分-作用靶点”和蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并对潜在靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;采用分子对接技术模拟关键成分与核心靶点的结合活性。采用qRT-PCR法验证各组大鼠肾组织中关键靶点的mRNA表达;收集大鼠粪便,采用16S rDNA高通量测序法检测肠道菌群变化。结果SRP显著降低HN大鼠血清中UA、CREA及BUN水平(P<0.05),并改善肾组织病理损伤。SRP可能通过作用于晚期糖基化终末化产物(advanced glycation end products,AGE)-晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等信号通路发挥抗HN作用。白蛋白(albumin,ALB)、TNF、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG)、信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和骨髓细胞瘤病毒癌基因(myelocytomatosis viral oncogene,MYC)与木犀草素、槲皮素、山柰酚、表没食子酸儿茶素没食子酸酯和儿茶素有较好的对接活性。SRP显著下调HN大鼠肾组织中TNF、STAT3和ALB mRNA表达水平(P<0.05),显著上调PPARG mRNA表达水平(P<0.05)。与模型组比较,SRP组大鼠肠道菌群丰富度和多样性显著升高,且在门水平上降低拟杆菌门和厚壁菌门的比例;主要降低Acteroides、Akkermansia、Ralstonia及Prevotellaceae Ga6A1 group菌属,增加Lactobacillus及Ruminococcaceae UCG-014的相对丰度。结论SRP可以通过调节肠道菌群结构,调控AGE-RAGE、IL-17、TNF等信号通路及相关靶点的表达发挥抗HN作用,具有多成分、多靶标及多通路的治疗特点。

基于多层次交互网络和体内实验探讨藤茶总黄酮抗痛风性关节炎的作用机制

基于网络药理学预测分析藤茶总黄酮(total flavonoids from Ampelopsis grossedentata,AGTF)防治痛风性关节炎(gouty arthritis, GA)的作用机制,并进行实验验证。利用相关数据库,结合文献资料,筛选出AGTF的主要活性成分、作用靶点及疾病靶点,并分别构建蛋白质相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络和“药物-关键成分-潜在靶点-核心通路”网络,预测AGTF抗GA潜在的作用靶点和机制。通过建立高尿酸血症(hyperuricemia, HUA)合并GA大鼠模型,对大鼠的步态行为评分,观察踝关节肿胀度;检测大鼠血清中尿酸(uric acid, UA)水平和黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)活性,以及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;采用免疫组化法测定大鼠踝关节滑膜组织中Toll样受体-4(toll-like receptor 4,TLR4)、髓性分化因子-88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的蛋白表达。网络药理学筛选出AGTF有效活性成分10个,AGTF抗GA的候选靶点73个;KEGG富集显著的信号通路86条,其中与AGTF抗GA密切相关的通路有TNF信号通路、NF-κB信号通路、Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路及嘌呤代谢等。动物实验结果显示,AGTF能有效改善GA大鼠异常步态行为、缓解踝关节炎症反应、降低踝关节肿胀度;同时,AGTF能显著降低UA水平,抑制XOD活性,减少TNF-α、IL-6和IL-1β含量,下调踝关节滑膜组织TLR4、MyD88和NF-κB的表达(P<0.05,P<0.01)。网络药理学预测与验证实验结果相吻合,均表明AGTF通过调控尿酸代谢、改善尿酸水平异常、减少炎症因子释放、调节免疫及炎症TLR4/MyD88/NF-κB通路等多途径综合发挥防治GA的药效作用。