宫颈癌p16基因甲基化研究新方法

目的建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测宫颈癌p16基因甲基化的方法,以期达到早期诊断宫颈癌。方法正常基因组DNA经修饰后进行PCR,构建含有DNA甲基化β-actin的重组质粒,克隆阳性质粒作为标准品用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR进行检测,建立检测的标准曲线。利用建立好的方法进行检测临床60例宫颈癌组织中p16基因启动子区域5’CpG岛甲基化状态。结果结果显示正常对照组织及癌旁p16基因无甲基化,60例宫颈癌标本的甲基化率为28.33%(17/60)。结论SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR用于p16基因甲基化检测为宫颈癌的早期诊断提供了一种有效的方法。