重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂纯度的控制方法

目的建立分析重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂(recombinant human TNK tissue type plasminogen activator,rh TNKt PA)纯度的方法。方法单体、聚合体直接采用分子排阻色谱法(size-exclusion high performance liquid chromatography,SECHPLC)测定;双链含量的检测需用二硫苏糖醇(DDT)打开二硫键,再采用分子排阻色谱法(SEC-HPLC)测定。色谱柱:TSKgel G3000SWXL;流动相:3%NaH2PO4-0.1%SDS(p H6.8)水溶液;流速:0.3 mL·min-1;检测波长:214 nm;柱温:25℃;检测时间:50 min;进样量:10μL。结果方法的专属性和精密度良好; 3批原液的单体含量为98.8%、98.9%、99.0%;聚合体的含量为1.2%、1.1%、1.0%;双链含量为8.0%、7.5%、7.5%。结论此方法准确、全面,经方法学验证可严格控制本品质量。