低分子肝素钠与枸橼酸钠对重症急性肾损伤行连续性肾脏替代治疗患者抗凝及治疗效果的对比

目的探讨局部枸橼酸钠抗凝对连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)的重症急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者炎症状态的影响。方法随机抽取我院重症监护病房(intensive care unit,ICU)2018年1月至2019年12月行CRRT治疗的AKI患者枸橼酸钠组(有出血倾向或外科围手术期)和低分子肝素组(无出血倾向)各50例。枸橼酸钠组给予枸橼酸钠抗凝。低分子肝素组给予低分子肝素抗凝。比较两组治疗前后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞计数(white blood cell,WBC)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophils lymphocytes ratio,NLR)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、血清总钙、血镁、血磷、临床疗效。结果共100例/207台次纳入本研究,枸橼酸钠组50例/103台次,低分子肝素钠组50例/104台次。治疗后,枸橼酸钠组患者TNF-a、IL-6、PCT下降幅度显著高于低分子肝素组,差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗时间越长,下降幅度越大;透析时长>24 h时枸橼酸钠组患者NLR下降幅度显著高于低分子肝素组,差异有统计学意义(P<0.05)。针对明确合并重症感染AKI的这部分患者进一步进行亚组分析,与低分子肝素组相比,枸橼酸钠组在透析6 h、12 h、24 h后,TNF-a、IL-6、PCT明显下降,且治疗时长越长,下降幅度越大,差异均有统计学意义(P<0.05)。透析24 h后WBC下降幅度和12 h、24 h后NLR下降幅度两组差异均有统计学意义(P<0.05),且枸橼酸钠组下降幅度比低分子肝素组大;透析时长>24 h时血磷、血镁、血清总钙下降幅度两组差异有统计学意义(P<0.05),血磷与血镁在枸橼酸钠组下降幅度较大,而血清总钙在低分子肝素组下降幅度较大。透析时长6~12 h时,枸橼酸钠组患者APTT、TT延长幅度比低分子肝素组小,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后,死亡患者比例、肾功能恢复比例、肾功能未恢复比例、持续透析患者比例差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对行连续性肾脏替代治疗的重症AKI患者采用局部枸橼酸钠抗凝不仅安全,而且可以减轻患者体内炎症状态。

内质网应激在缺血再灌注急性肾损伤中的作用

目的观察缺血再灌注急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)大鼠内质网应激相关凋亡蛋白caspase-12、c-Jun氨基端激酶1(c-Jun N-terminal kinase 1, JNK1)、转录因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)表达变化,探讨内质网应激在缺血再灌注AKI中的作用。方法雄性Wistar大鼠75只,随机分为模型组27只,假手术组24只,正常组24只。模型组切除右肾、夹闭左肾动脉45 min后恢复灌流制备缺血再灌注AKI模型,24只造模成功;假手术组仅切除右肾、不夹闭左肾动脉;正常组仅麻醉不开腹。造模成功后1、5、12、24 h时3组分别处死6只大鼠,取腹主动脉血检测血肌酐水平,取肾脏组织行HE染色观察肾脏形态学改变并计算肾小管损伤评分,分别采用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测肾脏组织caspase-12、JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量;造模后24 h采用TUNEL法观察3组肾小管上皮细胞凋亡情况并计算总积分吸光度值;Pearson相关法分析造模后24 h内质网应激相关凋亡蛋白表达与肾小管损伤评分的相关性。结果造模后1、5、12、24 h,模型组血肌酐水平均高于假手术组和正常组(P<0.05),假手术组与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05);模型组造模后12、24 h血肌酐水平高于1、5 h(P<0.05)。模型组造模后1、5、12、24 h肾小管损伤评分均高于假手术组和正常组(P<0.05);假手术组造模后24 h肾小管损伤评分高于正常组(P<0.05);模型组造模后24 h肾小管损伤评分高于1、5、12 h(P<0.05),12 h高于1、5 h(P<0.05),1、5 h比较差异无统计学意义(P>0.05);假手术组造模后24 h肾小管损伤评分高于1、5 h(P<0.05),1、5、12 h比较差异均无统计学意义(P>0.05)。造模后24 h镜下观察模型组肾小管上皮细胞凋亡细胞数量多于假手术组和正常组;造模后24 h模型组总积分吸光度值(22 963.59±10 334.90)高于假手术组(4 186.20±679.96)和正常组(1 668.07±205.05)(P<0.05),假手术组高于正常组(P<0.05)。造模后1、5、12、24 h模型组肾脏组织JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量及造模后1、5、12、24 h模型组肾脏组织caspase-12 mRNA和造模后12、24 h肾脏组织caspase-12蛋白相对表达量均高于假手术组和正常组(P<0.05),假手术组与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05);模型组造模后12、24 h肾脏组织caspase-12、JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量高于1、5 h(P<0.05),1、5 h比较差异无统计学意义(P>0.05);假手术组、正常组造模后1、5、12、24 h肾脏组织caspase-12、JNK1、CHOP mRNA及蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。造模后24 h模型组大鼠肾脏组织caspase-12(r=0.474,P=0.010)、JNK1(r=0.650,P<0.001)、CHOP蛋白相对表达量(r=0.571,P=0.002)与肾小管损伤评分呈正相关。结论缺血再灌注AKI大鼠肾脏组织内质网应激相关凋亡蛋白caspase-12、JNK1、CHOP表达随时间延长逐渐增高,其表达越高反映肾小管损伤程度越重,内质网应激参与了缺血再灌注AKI的发生。