腹腔镜技术治疗胆总管囊肿经验总结及技巧探讨

目的总结腹腔镜技术治疗先天性胆总管囊肿的临床经验，探讨手术技巧及术中、术后处理经验。方法回顾性分析作者于2003年6月至2013年12月收治的134例胆总管囊肿患儿临床资料，其中51例采用开放手术，为开腹手术组，83例采取腹腔镜手术，为腹腔镜手术组。结果两组均获治愈，无一例死亡。腹腔镜手术组中有1例因二次手术粘连严重而中转开放手术；腹腔镜手术组手术时间较开放手术组长，（202．3±20．30）min铘（162．4±17．8）min，P〈0．05；出血量少于开放手术组，（13．6±5．7）mLvs（58．3±9．34）mL，P〈0．05；手术后进食时间早，术后（3±1．2）dvs（5±1．6）d；住院时间短于开放手术组，（7±1．3）dvs（10±1．8）d，P〈0．05；肝总管狭窄的发现率较高（21．3％vs7．8％），术后胆管炎（0vs4）、胆管梗阻（0vs2）和肠梗阻（0vs4．5％）的发生率低。结论腹腔镜胆总管切除胆肠吻合术安全、有效、出血少、创伤小，住院时间短，是治疗先天性胆总管囊肿的首选方法。

β_2受体阻滞剂对胰腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

目的研究β2受体阻滞剂对胰腺癌细胞的增殖及侵袭转移能力的影响及其作用机制。方法β2受体特异性阻滞剂ICI118,551、广谱β受体阻断剂普萘洛尔和β1受体特异性阻滞剂美托洛尔干预胰腺癌细胞MIA PaCa-2和BxPC-3后,通过MTT分析、流式细胞术,细胞侵袭实验,Western blot和EMSA等技术阐明β2受体阻滞剂对胰腺癌侵袭能力的抑制作用,进一步检测核转录因子NF-κB和AP-1的活性及其下游相关分子VEGF、MMP-2、MMP-9和COX-2的表达。结果在优势浓度(100μmol/L)下:普萘洛尔、ICI118,551诱导胰腺癌细胞周期G1/S期阻滞和抑制增殖、侵袭效应强于美托洛尔(P<0.05);三种阻滞剂均可下调NF-κB和AP-1的活性,并降低其相关下游分子VEGF、MMP-2、MMP-9和COX-2的表达(P<0.05),普萘洛尔、ICI118,551对上述分子抑制率强于美托洛尔,对BxPC-3的抑制强于MIA PaCa-2细胞。结论β2受体阻滞剂通过下调核转录因子及其相关下游分子的表达而抑制胰腺癌细胞的增殖及侵袭转移能力。

ICI118,551诱导胰腺癌细胞凋亡及其机制的实验研究

目的研究ICI118,551通过调控细胞信号通路抑制抗凋亡分子的表达所产生的促凋亡效应及其机制.方法应用β2受体阻滞剂ICI118,551和β1受体阻滞剂美托洛尔干预胰腺癌细胞,通过电镜检测细胞凋亡、Hoechst 33324荧光染色检测细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡、Western blot等技术检测β2受体阻滞剂对ERK和Akt磷酸化改变,调节细胞凋亡和细胞周期下游相关分子caspase-3、caspase-9、Bcl-2及Bax的表达.结果 ICI118,551可显著诱导胰腺癌细胞凋亡,细胞凋亡率显著大于美托洛尔组(P<0.05);ICI118,551干预组抑制Akt和ERK的磷酸化,并激活Bax、caspase-3和caspase-9活性片段的表达,同时抑制Bcl-2的表达.结论β2受体阻滞剂可以阻断相关细胞通路而进一步抑制下游相关促侵袭和抗凋亡分子的表达,并产生促凋亡效应.

腔镜技术在小儿肿瘤切除手术中的应用及技巧探讨

目的探讨腔镜切除小儿肿瘤的可行性、临床效果、操作技巧与应用前景等,总结临床经验。方法回顾性收集2009年1月至2016年12月经胸腔镜、腹腔镜治疗的221例肿瘤患儿作为研究对象,分析治疗效果。结果221例肿瘤患儿中胸腔镜切除肺及纵膈肿瘤53例,腹腔镜切除腹腔、盆腔及腹膜后肿瘤168例。其中2例腹膜后肿瘤中转开腹手术;5例回盲部肿瘤,33例卵巢囊肿及19例卵巢畸胎瘤腹腔镜探查后经脐部拖出切除;其余手术均在腔镜下完成。术中无副损伤、无输血,术后Trocar口感染9例,瘢痕疙瘩5例;术后住院时间平均(5±1.6)d。术后随访发现2例肺囊肿出现复发,行2次手术切除后治愈;1例肠系膜淋巴管瘤出现黏连性肠梗阻,保守治疗后好转;1例膀胱横纹肌肉瘤术后半年死亡;1例腹膜后未成熟畸胎瘤化疗后死亡;其余恶性肿瘤患儿生存良好,恶性肿瘤生存率为80%(8/10)。结论腔镜切除小儿肿瘤就安全可行的;囊性肿瘤抽吸减压后经脐部拖出操作便捷、创伤小,囊实性肿瘤可以减压后拖出切除,也可全腔镜下切除;小的实性肿瘤不论良性、恶性均可腔镜更好切除;瘤体较大人实性肿瘤要适时中转开放手术。

腹腔镜气膀胱改良乳头式输尿管膀胱再植术的临床研究

目的介绍腹腔镜气膀胱改良乳头式输尿管膀胱再植术的手术方法,通过与开放手术和Cohen术的比较探讨这种术式的安全性、可行性。方法回顾性分析山东大学齐鲁医院小儿外科2010年1月至2019年3月实施腹腔镜气膀胱改良乳头式输尿管膀胱再植术的病例资料,包括临床效果、膀胱造影检查结果、并发症等,与开放手术和Cohen术式对比,分析优缺点及应用前景。共收集到179例患儿资料,分三组进行比较。开放手术组63例,其中男44例,女19例。年龄<6个月32例,6个月至1岁23例,>1岁8例。左侧30例,右侧17例,双侧16例。输尿管末端狭窄58例,膀胱输尿管反流4例,狭窄伴反流1例,合并肾积水53例,泌尿系统感染33例,输尿管开口异位7例,输尿管末端囊肿3例。气膀胱Cohen组55例,其中男38例,女17例,年龄<6个月10例,6个月至1岁5例,>1岁40例。左侧27例,右侧13例,双侧15例。输尿管末端狭窄50例,膀胱输尿管反流3例,狭窄伴反流2例,合并肾积水44例,出现泌尿系统感染症状38例,输尿管末端囊肿3例,输尿管开口异位2例。气膀胱改良乳头式再植组61例,其中男36例,女25例,年龄<6个月22例,6个月至1岁28例,>1岁11例。左侧33例,右侧19例,双侧9例。输尿管末端狭窄50例,膀胱输尿管反流7例,狭窄伴反流4例;均出现肾积水,出现泌尿系统感染症状56例,输尿管末端盲端1例,输尿管开口异位不与膀胱相通2例,开口膀胱憩室1例。结果三组均无死亡病例,气膀胱Cohen组有2例中转开放,气膀胱改良乳头式再植均在腹腔镜下顺利完成;气膀胱Cohen组与气膀胱改良乳头式再植组之间,手术时间[(97.2±49.4)min比(77.4±37.0)min,P>0.05]、出血量[(3.7±1.5)ml比(2.9±1.8)ml,P>0.05]及住院时间[(6.8±2.3)d比(6.2±1.3)d,P>0.05]的差异均无统计学意义,抗反流效果相当,术后未见严重并发症,肾盂及输尿管积水均有明显减轻。气膀胱的两组手术时间略长于开放手术(P<0.05),血量明显减少(P<0.05),住院时间明显缩短(P<0.05),并发症少。结论腹腔镜气膀胱改良乳头式输尿管膀胱再植术符合生理特点,抗反流效果可靠,是治疗输尿管末端狭窄以及反流引起巨输尿管的一种应用前景广阔的术式。

肠神经胶质细胞在先天性巨结肠中异常发育的研究

目的研究肠神经胶质细胞(enteric glial cells, EGCs)在先天性巨结肠(Hirschsprung’s disease, HD)病变肠管肌层中的异常发育。方法收集2018年12月至2020年12月于山东大学齐鲁医院小儿外科行手术治疗的20例HD患儿在手术中切除的病变肠管。20例患儿中, 男14例, 女6例, 年龄范围为21 d至9岁。对每例病变肠管分别留取无神经节段、移行段、扩张段及近端段4个部分, 每部分样本重量≥500 mg, 留取长度为0.5 cm的全层组织浸泡于4%多聚甲醛溶液, 其余组织剥除黏膜及黏膜下层后取部分保存于RNA Wait中, 连同剩余部分于-80℃保存。选择胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)、S100钙结合蛋白β(S100 calcium-binding protein β, S100β)作为EGCs的标志物。用蛋白质印迹法检测各样本中目的基因的蛋白质表达水平。用实时定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)分析各样本目的基因的mRNA的表达水平。用组织免疫荧光(immunofluorescence, IF)及免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)染色比较不同节段肌间EGCs及肠神经元(enteric neuron cells, ENCs)的发育及相对位置关系。结果①相对于管家基因GAPDH, 目的基因GFAP和S100β从无神经节段到近端段的蛋白表达量存在明显增加的趋势。而目的基因mRNA转录水平与蛋白表达量的趋势基本相同, 近端段中GFAP和S100β表达量明显高于无神经节段。②EGCs与ENCs在不同病变节段肌间神经丛中的发育及位置存在对应关系, 无神经节段、移行段中同时存在肌间ENCs及EGCs的发育缺失或异常, GFAP和S100β的表达量明显低于近端段, 近端段肌间的EGCs位于ENCs周围, 共同参与肌间神经丛的构成。③通过IHC显示不同节段GFAP和S100β的表达位置及表达水平的变化, 并对单位面积阳性染色进行量化。显示在近端段肠管中, 纵行肌及环行肌之间肠道肌间神经丛的位置呈现明显阳性染色棕褐色颗粒, 扩张段、移行段阳性染色颗粒明显减少, 无神经节段未见明显阳性染色, 其阳性染色面积变化趋势与蛋白表达量一致。结论在HD病变肠管肌层中, 合并有EGCs的发育异常, 可能对ENCs的发育及缺失产生影响。