用低龄动物制备高效价Et免疫血清的探讨

[目的]建立一种用低龄日本大耳白兔制备高效价迟钝爱德华氏菌(Edwardsiellatarda,Et)免疫血清的方法。[方法]先制备迟钝爱德华氏菌(Et)抗原。用日本大耳白兔作免疫动物,分2组试验,一组是2月龄组(T组),另一组是6月龄(S组)。采取耳缘静脉注射的方法,小剂量连续多次免疫日本大耳白兔,免疫后,收集免疫血清,然后用微量凝集反应法测定免疫血清抗体效价。[结果]凝集反应显示,在免疫剂量相同的情况下,第1次试血测Et免疫血清效价,S组的血清效价比T组的血清效价高,但在第2次试血测Et免疫血清效价时T组的血清效价与S组的血清效价一致。[结论]试验中所采用的T组动物(日本大耳白免)月龄较小,免疫后仍产生了与S组一致的高效价抗血清,说明用低龄日本大耳白兔制备高效价Et免疫血清的方法可行。

用低龄动物制备高效价Et免疫血清的探讨(摘要)(英文)

[目的]建立一种用低龄日本大耳白兔制备高效价迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda,Et)免疫血清的方法。[方法]先制备迟钝爱德华氏菌(Et)抗原。用日本大耳白兔作免疫动物,分2组试验,一组是2月龄组(T组),另一组是6月龄(S组)。采取耳缘静脉注射的方法,小剂量连续多次(第1、7、14、21、27、33、41天时免疫剂量分别为0.2、0.2、0.25、0.2、0.25、0.3、0.4ml)免疫日本大耳白兔。免疫后,收集免疫血清,然后用微量凝集反应法分2次试血(第1次是免疫第33天后的第7天,采用1:20抗血清;第2次是免疫第41天时,采用1:40抗血清),测定免疫血清抗体效价。[结果]凝集反应显示,在免疫剂量相同的情况下,第1次试血测Et免疫血清效价,2月龄组T2血清效价最高为1:640,6月龄组S1、S2和S4血清效价均达1:1280,显示6月龄组的体液免疫应答反应强于2月龄组;经继续免疫8d后,第2次试血测Et免疫血清效价可见,2月龄组的T1、T2、T3和6月龄组的S1、S2、S4免疫血清效价一样,均高达1:5120。表明此时在接受相同剂量Et抗原刺激后,2月龄组和6月龄组的体液免疫应答反应已趋相同。[结论]试验中所采用的T组动物(日本大耳白兔)月龄较小,免疫后仍产生了与S组一致的高效价抗血清,说明用低龄日本大耳白兔制备高效价Et免疫血清的方法可行。

牙鲆腹水病病原免疫血清的制备和纯化试验研究

用迟钝爱德华氏菌免疫家兔,制备出高效价迟钝爱德华氏菌免疫血清。先制备迟钝爱德华氏菌抗原,耳缘静脉注射免疫家兔。经微量反应板法检测血清效价,效价达到1∶2560;用Millipore Montage抗体纯化试剂纯化抗体,纯化的抗体经SDS-PAGE电泳,杂带较少,条带主要集中于50 kD处;用斑点酶联免疫吸附试验检测时,迟钝爱德华氏菌呈阳性,温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、河流弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌、腐败希瓦氏菌、产碱普罗威斯登菌、阪崎肠杆菌和大肠杆菌均呈阴性。试验结果表明,特异、高效价的迟钝爱德华氏菌免疫血清,为快速检测牙鲆腹水病病原奠定了基础。