肠易激综合征细胞功能实验室诊断指标的建立

背景:肠易激综合征(IBS)是肠道功能紊乱性疾病,其实验室诊断标准仅限于肠动力紊乱和一些介质的测定,缺乏针对肠道组织功能和病理生理变化的指标,尤其是肠黏膜上皮细胞功能变化的指标。目的:观察IBS模型大鼠肠黏膜上皮细胞功能的变化与临床表现的联系,建立肠道局部细胞功能变化的实验室诊断指标。方法:对肠黏膜上皮细胞进行分层刮片、荧光染色和还原能力测定,用原子力显微镜和激光共聚焦扫描显微镜测定细胞膜蛋白分子颗粒振荡和胞内pH值。结果:IBS模型大鼠的肠黏膜上皮细胞功能处于抑制状态,确定了与这种抑制状态相应的实验室诊断指标。对IBS患者结肠活检组织黏膜上皮细胞的检验初步证实了这一点。结论:初步建立了IBS肠黏膜上皮细胞功能变化的实验室诊断指标。

三步层析法分离毕赤酵母工程菌中表达的新疆家蚕抗菌肽

通过离子交换层析、疏水作用层析和分子排阻层析等三步层析的方法,分离纯化了毕赤酵母工程菌所表达的新疆家蚕抗菌肽。结果表明,三步层析后,SDS电泳显示单一条带,分子量约为7.0 kDa;所纯化的新疆家蚕抗菌肽具有较强的抗菌活性。该纯化工艺的建立,为新疆家蚕抗菌肽在饲料添加剂、农用抗生素等方面的广泛应用奠定基础。

革兰阴性杆菌节律性释放调控物质的研究

目的研究奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,PM)波动生长过程中生物波调控因子(biological wave regulating factor,BRF)的节律性释放及作用。方法应用MTT实验和激光共聚焦显微镜观察BRF对细菌代谢的影响;采用凝集抑制实验检测PM周期性释放BRF;原子力显微镜观察PM在潜-生序变化中BRF生成情况。结果PM在波动生长过程中周期性释放BRF,潜生体可合成大量的BRF。BRF能提高细菌的代谢水平,促进细胞内pH值的变化。结论PM的波动生长过程是细菌生长代谢的消长与环境平衡-远离平衡变化之间互为因果的动态过程,是与细菌自身调控物质BRF协同作用的结果。

重组真核表达载体pEGFP-C1/cecropin-XJ的构建及其在胃癌细胞MGC80-3中的表达

目的构建新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ)基因的真核表达载体pEGFP-C1/cecropin-XJ(pEGFP-cec),检测其在肿瘤细胞中的表达情况,探讨抗菌肽对肿瘤细胞的作用机制和抗菌肽抑瘤作用效果.方法应用基因重组技术,将新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ)基因克隆到真核表达载体pEGFP-C1,通过酶切和测序的方法鉴定重组质粒pEGFP-cec的正确性.将pEGFP-cec经脂质体法转染到胃癌细胞MGc80-3,48 h后观察EGFP瞬时表达情况;72 h后,应用RT-PCR,检测抗菌肽cecropin-XJ基因的表达;96 h后,消化细胞,经台盼蓝染色,检测重组质粒pEGFP-cec表达产物对肿瘤细胞的影响.结果细胞转染48 h后,荧光显微镜下可观察到EGFP的表达,发出绿色荧光;转染72 h后,RT-PCR检测到胞内有抗菌肽cecropin-XJ基因的表达;表达产物能够抑制肿瘤细胞的生长.结论成功构建了真核表达载体pEGFP-cec,并在肿瘤细胞中可见抗菌肽cecropin-XJ和EGFP基因的有效表达以及表达产物具有显著的抗肿瘤活性.为深入开展抗菌肽抑制肿瘤的研究奠定基础.

抗菌素诱导的绿脓杆菌色素变异及其生物学意义

通过对经抗菌素诱导的绿脓杆菌色素变异株的理化特性、胞外多糖含量的测定 ,探讨绿脓杆菌产生色素变异的生物学意义 ,结果表明色素变异株能耐受高浓度的盐、长时间紫外线的作用 ,并且其耐药谱和耐药性也发生了改变 ;胞外多糖的含量高于原始菌株 5倍 (P <0 .0 1) ,说明细菌在不利的环境条件下通过自我调控 ,改变代谢方式 ,适应环境 ,给临床用药策略造成困难。

西藏阿里自然人群HAV、HBV和HCV感染血清流行病学研究

西藏阿里自然人群ＨＡＶ、ＨＢＶ和ＨＣＶ感染血清流行病学研究窦君刘栓奎周新荣马德新王天祥（新疆军区后勤部卫生防疫大队，乌鲁木齐市８３００１１）西藏阿里地区具有独特的地理位置和自然环境，各种疾病的流行与其他地区有所不同，在国内肝炎研究较为普遍的情况下，仍...

肠道细菌潜生体诱导因素及其生物学特性与肠易激综合征相关性的研究

目的:肠道感染是与肠易激综合征(IBS)发病密切相关的因素之一,微生物学研究提示,在大多数IBS患者的粪便中有大量细菌潜生体(cryptic growth ceus,CGC)存在,因此,本研究探讨肠道产生CGC的条件及诱导因素,并初步观察与其致病作用相关的生物学特性。

新疆玫瑰花提取物体外降糖活性

目的评价玫瑰花提取物的体外降糖活性,研究玫瑰花多酚作用的胰岛素信号通路并阐明其降糖作用机制。方法采用脂质体介导的质粒转染法构建蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP1B)蛋白过表达的CHO-K1细胞模型,通过蛋白印迹分析法(Western blotting)研究玫瑰花多酚对细胞内信号分子蛋白表达量的影响。结果体外玫瑰花提取物抑制PTP1B酶活性,半数抑制浓度(IC50)为62.31 ng·m L-1。玫瑰花提取物可提高细胞葡萄糖消耗,与阳性对照药作用相当;在细胞内可明显提高磷酸化的胰岛素受体底物1(IRS-1)、磷脂酰肌醇依赖性激酶1(PDK1)、蛋白激酶B(AKT)以及糖原合成激酶3β(GSK-3β)蛋白表达量。结论玫瑰花提取物对PTP1B有良好的抑制活性,可促进葡萄糖消耗,具有潜在降糖活性;玫瑰花提取物通过增加IRS-1、下游信号分子PDK1、AKT以及GSK-3β蛋白的磷酸化水平来激活PI3K/AKT胰岛素信号通路,从而促进胰岛素信号传导和糖原合成,达到降低血糖的效果。

新疆家蚕抗菌肽的抗体制备及鉴定

目的:制备鼠抗新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)的抗体,用于抗菌肽的体外细胞定位分析。方法:将编码抗菌肽的cDNA序列亚克隆到真核表达载体pcDNA3上,构建重组真核表达载体pcDNA3/Cecropin-XJ,进行核酸免疫昆明白小鼠;同时构建原核表达载体,对抗菌肽进行融合表达,以表达的融合蛋白作为检测抗原。采用免疫电镜技术分析Cecropin-XJ的作用部位。结果:间接ELISA表明,重组质粒第5次免疫的效价最高;免疫胶体金实验显示,所制备的抗血清能够对抗菌肽作用部位进行准确清晰的定位。结论:所制备的鼠抗Cecropin-XJ的抗血清具有较高的免疫反应性和特异性,为Cecropin-XJ的抑菌机制研究提供了有力的工具,同时也为小分子肽抗体的制备提供了参考。

靶向二肽基肽酶维药体外筛选模型的建立及应用

二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidaseIV,DPPIV)是治疗II型糖尿病的新靶点,糖依赖性胰岛素释放肽和肠促胰岛素胰高血糖素样肽-1在体内有促进胰岛β细胞分泌胰岛素,胰岛素的生物合成,β细胞的生长并抑制其凋亡和抑制血糖升高等功能.二肽基肽酶Ⅳ可快速降解糖依赖性胰岛素释放肽和肠促胰岛素胰高血糖素样肽-1,使其失去生物活性.本实验利用Caco-2细胞中所得到的二肽基肽酶IV,优化酶活筛选体系.确定了二肽基肽酶Ⅳ最适底物Gly-Pro-pNA浓度为0.064 mg/mL、反应温度37?C、反应时间30 min和竞争性抑制剂Ile-Pro-Ile浓度0.68mmol/L,从而建立了靶向二肽基肽酶Ⅳ的快速筛选体系.应用该模型,对18种维药提取物进行了筛选.本研究结果将为维药的进一步开发和利用提供了理论依据.

番茄有效成分含量测定及其综合利用产业化构想

番茄叶、茎、主干、根等部位中含有很多抗氧化成分,以前都废弃。经研究发现,在番茄结果及果实成熟采摘后,番茄叶、茎、主干、根等不同部位中维生素C、总黄酮类物质含量仍很高。因此,可以从这些部分中提取维生素C和总黄酮类物质,为所有食品、医药提供辅助剂,从而使其被有效开发和利用,变废为宝,实现产业化。

西藏阿里地区银盾革蜱的分布及与疾病的关系

本文概述了银盾革蜱在西藏阿里地区的分布及与疾病的关系，并证实有该蜱的为４个县，其中３个县存在野兔热自然疫源地。

西藏阿里地区啮齿动物及其体外寄生蚤生态调查

1991年至1995年4—8月,对西藏阿里地区的啮齿动物及体外寄生蚤进行调查,结果表明:该地常见啮齿动物1目4科4属5种,数量组成以白尾松田鼠最多(49.0％),其次为高原鼠兔(25.4％),高原兔(17.8％),体外寄生蚤4科8属11种,数量构成以冰武蚤宽指亚种(49.4％)、方指双蚤(36.3％)为优势种,高原兔带蚤最多,带蚤率67.6％,指数3.01。不同生境啮齿动物组成及体外带蚤率、带蚤指数亦不相同,草原灌丛生境中高原兔的带蚤率(85.7％)及指数(4.71)最高。

DPPH法评价草棉花不同提取物体外抗氧化作用

目的利用酶标仪,通过DPPH方法对草棉花不同提取物的抗氧化活性进行研究。方法以VC为对照I,C50值作为评价试样清除自由基能力为指标,建立草棉花提取物抗氧化活性快速筛选的方法。结果通过比较草棉花不同提取物对自由基的清除作用,经大孔树脂处理富集所得的总黄酮部位抗氧化活性最好。结论该实验为草棉花总黄酮的应用及药理研究提供理论依据。

西藏阿里野兔热自然疫源地景观特征和影响因素分析

本文分析了西藏阿里野兔热自然疫源地景观特征和影响因素 ,着重探讨了自然疫源地存在的客观条件及其与自然疫源性疾病的内在关系 。

西藏阿里地区自然疫源性疾病血清流行病学调查

目的：调查西藏阿里地区人、畜间５种自然疫源性疾病的感染情况。方法：采用间接免疫荧光实验（ＩＦＡ）、间接血凝实验，检查人、畜血清抗体水平。结果：当地人群斑点热、斑疹伤寒、恙虫病、Ｑ热及野兔热的自然感染率，抗体检出率分别为５７．５％（２３９／４１６）、３２．７％（１３６／４１６）、９．４％（３９／４１６）、４９．５％（２０６／４１６）、１．２％（４／３４９）；羊血清抗体检出率分别为５２．２％（３０６／５８６）、３３．３％（１９５／５８６）、４２．２％（２４７／５８６）、４０．３％（２３６／５８６）、２１．２％（９０／４２５）。

细菌潜生体相关的肠易激综合征动物模型的建立及细菌潜生体在肠易激综合征中的意义

目的:建立一种与细菌潜生体(cryptic growth cell,CGC)相关的肠易激综合征(IBS)动物模型,探讨细菌潜生体在IBS发病中的作用。方法:采用Wistar大鼠分组试验,对照组包括空白对照组、单纯灌喂辣椒液刺激组。

阿勒泰黄芪提取物对蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B的抑制作用

本文探讨了阿勒泰黄芪不同提取物对蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)的抑制作用。采用分光光度法测定了提取物中的黄酮和皂苷含量;通过体外酶促动力学方法检测了不同提取物对PTP1B的影响,并确定了抑制类型;并采用氧化酶法检测了阿勒泰黄芪提取物对细胞利用葡萄糖能力的作用。结果表明,阿勒泰黄芪8种提取物(E1～8)中黄酮含量分别为5.09、10.46、3.58、3.23、53.91、21.77、5.76和7.49 mg/mL,其中E1、E2、E6、E7、E8皂苷含量分别为16.53、27.45、21.90、10.21和8.96 mg/mL;各提取物对PTP1B活性均表现出抑制作用,其中E1、E2、E7、E8的IC50分别为34.8、4.7、7.35和7.15μg/mL,E1、E7和E8是竞争性抑制,E2是混合型竞争性抑制。E1、E2、E5、E7和E8较明显的提高了CHO-K1细胞对葡萄糖的利用。提示皂苷可能是阿勒泰黄芪抑制PTP1B活性的主要物质,通过PTP1B途径有效了提高细胞利用葡萄糖的能力。本研究为阿勒泰黄芪开发为防治糖尿病及改善胰岛素抵抗的药物或保健品提供实验依据。

西藏阿里地区土拉菌病初步调查

1992年4～7月,对西藏阿里部分地区进行了土拉菌病调查,结果表明人感染血清阳性检出率平均为2％(7/349);羊血清阳性检出率平均为19％(68/366),个别地区阳性检出率可达50％(17/31)以上。在普兰、噶尔、日土3个县境内的山地高寒荒漠灌丛草原型地带,其海拔高度在4200～4800米处,所采集的银盾革蜱(Dermacentor niveus)3千余只中,分离出13株土拉菌,另外从实验室内孵化出的幼蜱中分离出1株菌,鉴定均为旧大陆变种,按Олсуфъев分类属生物Ⅱ型。从血清学和细菌学角度,首次证实西藏阿里地区存在土拉菌病自然疫源地。