醉酒人群CYP2E1基因多态性研究

目的:通过对醉酒人群的CYP2E1基因的检测,获得该基因遗传多态性数据,及其在醉酒人群中的分布。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测CYP2E1基因在154例醉酒样本的等位基因、基因型、基因频率。结果:CYP2E1基因在154例醉酒样本中共检出两种等位基因:等位基因c1和c2,观察到3种基因型c1/c1、c1/c2和c2/c2,基因型频率分别是68.8%、29.2%和1.9%。结论:对醉酒人群的CYP2E1基因的检测实验结果与本课题组先前的研究结果(酒依赖和健康对照组CYP2E1基因多态性)做统计分析。统计结果提示:醉酒人群的CYP2E1基因分布和酒依赖组没有差别,而与健康人群的CYP2E1基因分布存在差异,并且差异有统计学意义(P<0.05)。本研究用饮酒量分组与基因型分组,做统计分析,结果没有统计学意义。

云南汉族人群5-羟色胺转运体基因启动子区多态性与酒精依赖的相关性

为了探讨云南汉族人群中5-羟色胺转运体基因启动子区多态性(5-HTTLPR)与酒精依赖的关联性,文章采用PCR扩增和DNA测序技术,对云南地区118例酒精依赖患者和214例健康对照个体进行了5-HTTLPR的基因多态性分析。结果表明:酒精依赖患者组和正常对照组的5-HTTLPR的基因型分布存在显著性差异,L/L和L/S基因的携带者人群嗜酒发生率显著低于S/S基因型人群(OR:0.581,P=0.026)。S和L等位基因频率在两组间无统计学差异(χ2=2.594,P=0.107),但其分布存在种族差异性。因此,云南地区人群中5-HTTLPR多态与酒精依赖存在相关性,L/L和L/S基因型可能是降低酒精依赖发病的影响因子之一。

ADH2,ALDH2和CYP4502E1遗传多态性与云南汉族酒依赖综合征患者的关联研究

背景:酒精依赖综合征,也称为酒精中毒或者酒精成瘾,与遗传、生理、心理、社会环境等诸多因素有关。目前的研究揭示,酒依赖是一种多因子控制的复杂疾病,由多个基因共同控制,并且是遗传因素与环境因素以一种极其复杂的方式相互作用下的产物,而超过一半的饮酒风险度由遗传因素决定。与酒精依赖有关的基因主要包括两大类:一类是药物代谢动力学基因,这类基因编码的蛋白质是乙醇在体内代谢的重要酶类,包括乙醇脱氢酶(alcohol deydrogenase,ADH)基因,乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)基因,细胞色素P450第2家族E亚系多肽1(cytochromeP450,family2,subfamilyE,polypeptide1,CYP2E1);另一类是药物效应动力学基因,这类基因编码的蛋白质与乙醇在大脑的蓄积及随后产生的一系列精神依赖密切相关,主要包括儿茶酚氧位甲基转移酶(catechol-O-methyltransferase,COMT)基因、多巴胺受体D2(dopamine receptor D2,DRD2)基因、5-羟色胺受体(5-hydroxytryptamine receotor,5-HTR)基因、γ-氨基丁酸A受体β3(γ-aminobutyric acid Areceptor β3,GABAAβ3)基因、多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)基因和μ阿片受体基因(Mu opioid receptor gene,OPRM1)。目的:研究ADH2,ALDH2和CYP4502E1基因多态性与云南汉族酒依赖患者的相关性。本课题对云南汉族酒依赖患者组和非酒依赖对照组人群的ADH2、ALDH2和CYP2E1三个乙醇代谢相关基因多态性进行研究,探讨云南汉族ADH2、ALDH2和CYP2E1基因多态性和酒依赖的相关性,旨在从分子遗传学角度探讨酒精依赖综合征的发病机制,寻找其发生的潜在危险因素,为进一步开展酒精依赖综合征的病因学以及遗传学研究寻找理论依据。方法:选择2006-20083a来云南省精神病医院酒精依赖治疗科住院治疗患者80例。入组标准:(1)年龄21-65a,性别不限,汉族;(2)符合《精神疾病的诊断及统计手册》(DSMIV)酒依赖诊断标准;(3)饮酒10a以上,每天饮酒二两以上(白酒)或六瓶啤酒以上。排除标准:(1)精神分裂症、心理障碍、强迫症或其他严重精神障碍病史;(2)其他药物滥用史或成瘾史(烟草除外);(3)精神疾病阳性家族史。以及来自昆明医学院第一附属医院体检中心100例健康体检者作为对照组,其民族、年龄与上述病例组相匹配,既往无精神病史及精神疾病阳性家族史。结果:酒依赖患者组和健康对照组相比较,ADH2基因座ADH2*1/ADH2*1、ADH2*1/ADH2*2、ADH2*2/ADH2*2三种基因型的分布无显著差异(P>0.05),ADH2*1和ADH2*2两种等位基因分布有差异(P<0.05),在健康对照组ADH2*2等位基因频率高于酒依赖患者组;ALDH2基因座基因型及等位基因分布均差异有统计学意义(P>0.05),在健康对照组ALDH2*1/*2基因型及ALDH2*2等位基因频率高于酒依赖患者组;CYP4502E1基因座c1/c1和c1/c2两种基因型的分布差异具有统计学意义(P<0.05),c1/c2基因型在酒依赖患者组升高;c1和c2两个等位基因分布差异有统计学意义(P<0.05),c2等位基因在酒依赖患者组频率升高。结论:ADH2*2和ALDH2*2等位基因对于酒依赖发病有保护作用,而c2等位基因在酒依赖的发生中起一定的作用。

DRD2,DRD4和DAT遗传多态性与云南汉族酒依赖综合征患者的关联研究

背景:酒依赖综合征,也称之为酒依赖,酒精中毒等,是一种渐进性易复发的慢性疾病。酒依赖的发生源于经常性地饮酒过量导致对酒精的渴求,对酒精摄入的失控以及停止饮酒产生的一系列负面情绪等等。世界卫生组织推测酒依赖现已成为发展中国家第三大至死因素。在美国,每年用于酒依赖的支出,包括医疗保健、失业、身体损伤及损伤性质判定,约合1850亿美金。在中国,酒依赖患者的比例呈逐年上升的趋势。目前酒依赖已成为全球关注的一个重要的公共卫生问题。酒依赖综合征是一种复杂疾病,酒依赖的发生与生理、心理、环境及遗传因素等有关。目前酒依赖综合征已被公认为是一种多因素的多基因的复杂疾病,包括基因与基因之间以及基因与环境之间的相互作用。传统的多因素与大样本前瞻性研究提示遗传因素在酒依赖的发病中起重要作用。遗传学研究揭示很多特殊的基因与酒依赖的易感性有关。与酒依赖有关的基因主要包括两类:乙醇代谢相关基因(乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶和细胞色素氧化酶2E1)以及神经递质相关基因(γ-氨基丁酸、儿茶酚氧位甲基转移酶、谷氨酸、多巴胺能系统和阿片系统)。多巴胺与愉悦有关,被称为"抗压分子"或"快乐分子"。当多巴胺被释放至突触,它刺激一系列的受体发挥作用。多巴胺能系统中的多巴胺受体D2、多巴胺受体D4和多巴胺转运体的遗传多态性可能与酒依赖有关。然而,多巴胺能系统中相关基因的遗传多态性与酒依赖的相关性目前尚无定论。目的:本研究通过研究多巴胺D2受体基因中TaqIA、TaqIB、-141CIns/Del,多巴胺转运体基因3′末端非编码区40bp可变数目串联重复序列和多巴胺D4受体基因第3外显子上48bpVNTR多态性,探讨多巴胺能系统遗传多态性与酒依赖综合征的相关性,为探索酒精依赖综合征的发病机理及其基因诊断和治疗提供科学的依据。方法:按照DSM-Ⅳ诊断标准选择酒精依赖综合征病例样本。主要的选择标准包括:(1)过去的六个月内日饮酒量超过6听啤酒;(2)年龄在21-79a之间;(3)追溯三代均为云南汉族;(4)有知情同意能力;(5)除烟草和咖啡因依赖以外,过去的6月内没有使用其他成瘾物质;(5)无其他精神疾病,如精神分裂症、重度抑郁症和躁狂抑郁症等。选择与之匹配的非酒依赖个体作为对照样本。共采集病例组样本80例,对照组样本70例。各样本抽取静脉血3ml,EDTA-Na2抗凝处理,通过饱和酚/氯仿法提取DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)分析技术以及聚合酶链式反应-可变数目串联重复序列多态性(PCR-VNTR)分析技术检测酒依赖组和对照组在3个候选基因中的基因型和等位基因频率。应用SPSS15.0和HWSIM软件进行统计学分析。结果:共检测了云南汉族群体三个候选酒依赖相关基因的5个SNP位点,其中病例80,对照70例。DRD2基因TaqIA多态性在病例组和对照组中共检出2种等位基因:A1和A2。3种基因型:TaqIA1/A1、TaqIA1/A2、TaqIA2/A2。其中,患者组中TaqIA1/A1基因型为7例(8.8%),TaqIA1/A2基因型为45例(56.3%),TaqIA2/A2基因型为28例(35%);对照组中TaqIA1/A1基因型为15例(21.4%),TaqIA1/A2基因型为30例(42.9%),TaqIA2/A2基因型为25例(35.7%)。DRD2基因TaqIB多态性在两组中共检出2种等位基因:B1和B2。3种基因型:TaqIB1/B1(野生型纯合子)、TaqIB1/B2(杂合子)、TaqIB2/B2(突变型纯合子)。其中,患者组中TaqIB1/B1基因型为29例(36.3%),TaqIB1/B2基因型为46例(57.5%),TaqIB2/B2基因型为5例(6.3%);对照组中TaqIB1/B1基因型为21例(30%),TaqIB1/B2基因型为33例(47.1%),TaqIB2/B2基因型为16例(22.9%)。DRD2基因-141CIns/Del多态性在两组中共检出2种等位基因:-141CIns和-141CDel。3种基因型:-141CDel/Del、-141CIns/Del、-141CIns/Ins。其中,患者组中-141CDel/Del基因型为1例(1.3%),-141CIns/Del基因型为12例(15%),-141CIns/Ins基因型为67例(83.8%);对照组中只检出2种基因型,即-141CIns/Del和-141CIns/Ins。其中,-141CIns/Del基因型为11例(15.7%),-141CIns/Ins基因型为59例(84.3%)。DAT基因40bpVNTR多态性在两组中共检出4种等位基因:8、10、11和12。观察到5种基因型:11/8、10/10、11/11、11/10、12/11。其中,患者组中11/8基因型为1例(1.3%),10/10基因型为1例(1.3%),11/11基因型为66例(83.5%),11/10基因型为6例(7.5%),12/11基因型为6例(7.5%);对照组中基因型11/8为1例(1.4%),10/10为2例(2.9%),11/11为55例(78.6%),11/10为10例(14.3%),12/11为2例(2.9%)。DRD4基因48bpVNTR多态性在两组中共检出2种等位基因,分别是2和4。观察到2种基因型:2/2和2/4。其中,患者组中2/2基因型为62例(77.5%),2/4基因型为18例(22.5%);对照组中2/2基因型为62例(88.6%),2/4基因型为8例(11.4%)。上述5个候选基因中,DRD2基因TaqIB多态性的基因型和等位基因频率,统计学分析在酒依赖组和对照组中有差异(P<0.05),具有统计学意义。其余4个位点统计学分析差异均无显著性(P>0.05)。研究结果提示TaqIB多态性与酒依赖相关,进一步对TaqIB进行logistic回归分析时,结果显示携带B2等位基因者能显著降低其嗜酒的发生率(OR:0.225,P<0.05)。同时,在对DRD2基因中的TaqIB、DAT基因40bpVNTR和DRD4基因48bpVNTR进行组合基因型分析时,结果显示:以H1(B1-B1-11-11-2-2)组合基因型为参考时,H14(B2-B2-11-11-2-2)属于酒精依赖综合征的一种保护因素(OR:0.133,P<0.05)。结论:本研究提示,在云南地区汉族人群中,DRD2基因TaqIA、-141C以及DRD4基因48bpVNTR和DAT基因40bpVNTR与酒依赖无关联性,而DRD2基因TaqIB多态性与酒依赖存在相关性,携带B2等位基因者能显著降低其嗜酒的发生率。并且,以H1(B1-B1-11-11-2-2)组合基因型为参考时,H14(B2-B2-11-11-2-2)属于酒依赖综合征的一种保护因素。

云南汉族酒精依赖综合征与COMT遗传多态性的关联研究

目的:研究儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)的不同基因型及等位基因频率在云南汉族酒精依赖综合征患者组和健康对照组的分布差异。方法:应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析法,对COMT基因的rs2075507、rs737865、rs4680、rs165599四个基因位点进行特异性扩增,限制性内切酶酶切分型。结果:上述4个候选基因中,COMT基因rs737865位点C/C基因型频率在健康对照组较酒依赖组高,其基因型分布在两组中有差异,且具有统计学意义(P<0.05)其余3个位点统计学分析均无显著性差异(P>0.05)。单倍型分析:上述四个候选基因构建出12种主要单倍型(每种单倍型在对照组和酒依赖组中的频率至少有一个大于1%),单倍型A-C-A-A有可能是云南汉族酒精依赖发生的一种危险因子(OR:2.865,P=0.003347)连锁不平衡分析显示:云南汉族人群中,COMT基因的rs2075507和rs737865之间存在着强连锁(D>0.8)结论:在云南汉族人群中,COMT基因rs2075507、rs4680和rs165599位点与酒依赖无关联性,rs737865C/C基因型可能是酒精依赖的保护因子,可能降低嗜酒的发生率。单倍型A-C-A-A有可能是云南汉族酒精依赖发生的一种危险因子云南汉族人群中,COMT基因的rs2075507和rs737865之间存在着强连锁。