肝毒性风险的体外早期发现和预测

现如今,随着疾病谱的变化,肝脏疾病、心血管疾病等各种疾病发病率呈不断上升的趋势。药物治疗是当前临床治疗疾病的最有效的手段之一,为患者治愈疾病,维持身体健康状况,促进疾病转归。患者用药后,药物进入人体内是由肝脏进行代谢,因而肝脏受到的有毒代谢物的伤害更大。药物性肝损伤(Drug-induced liver injury,DILI)是由于使用肝毒性药物所引起的肝脏损伤,也是导致药物研发失败的首要原因。基于此,近年来关于人源性体外肝毒性预测模型易受到医疗界的高度重视。本研究主要围绕体外肝毒性预测模型进行分析,并探讨了肝细胞培养方式,以期为临床药物的研究提供有利于的参考价值。

N-乙酰半乳糖胺偶联小干扰RNA类药物的非临床毒性研究进展

小干扰核糖核酸(siRNA)作为核苷酸类药物,通过RNA干扰(RNAi)特异性诱导基因沉默而发挥作用,在代谢性疾病、抗感染及肿瘤等领域被广泛应用。目前已获批上市4款基于N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)偶联技术siRNA药物,汇总分析已上市GalNAc偶联药物的非临床毒性特征及临床不良反应,初步明确非临床研究中毒性常见类型,包括脱靶与非脱靶毒性等。结合GalNAc-siRNA类药物非临床研究实践,了解可预测的脱靶毒性及对于非临床安全性评价中的毒性关注点,以期为GalNAc-siRNA药物临床研究提供参考。

治疗用乙型肝炎腺病毒注射液TC007食蟹猴免疫原性、免疫毒性和生物分布研究

目的重复给予食蟹猴治疗用乙型肝炎腺病毒注射液(TC007),观察其免疫原性、免疫毒性、生物分布。方法普通级食蟹猴随机分为溶媒对照组,TC007低、中、高剂量(1.0×10~9、1.0×10^(10)、1.0×10^(11 )VP/只)组,Ad5-Null(1.0×10^(11 )VP/只,空载对照)组,每组10只,背部肩胛区sc给药,每周给药1次,共7次,停药恢复28 d。应用流式细胞仪进行外周血中淋巴细胞分群检测,检测经TC007刺激后分泌干扰素-γ(IFN-γ)的特异T细胞水平;免疫组化检测肝脏IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)表达;试剂盒法测定血清中抗Ad5抗体的中和活性,补体成分C3、C4及免疫复合物(CIC)水平;给药期及恢复期结束,进行多个组织取材,HE染色后进行病理学阅片,TaqMan探针qPCR法进行Ad5分布检测。结果与溶媒对照组比较,各组动物血浆中CD3^+CD8^+T细胞、CD4^+/CD8^+、CD3^-CD56^+NK细胞、CD3^+CD56^+NKT细胞、巨噬细胞CD45^+CD14^+百分率均未见明显异常;Ad5-Null组特异T细胞均未见明显改变,TC007各剂量组针对HBV 3种抗原(Core、Env、Pol)分泌IFN-γ的特异性T细胞水平显著增加(P<0.05、0.01),停药恢复末期(d68),效应值仍略高;TC007各剂量组和Ad5-Null组食蟹猴肝脏组织中IFN-γ、TNF-α、IL-2均高于溶媒对照组,且呈剂量相关性,但TC007各剂量组与Ad5-Null组比较未见明显差异;TC007各剂量、Ad5-Null组动物均产生抗Ad5抗体,39/40例具有中和活性;TC007各剂量组补体C3、C4未见明显异常,高剂量组CIC轻微升高(P<0.05)。Ad5主要分布于给药局部,在腋下淋巴结有少量分布,其他组织未见分布。TC007及Ad5-Null组均可见给药局部轻微至轻度皮下组织炎性细胞浸润,停药恢复28 d,病变可见明显恢复,其他组织未见病理学改变。结论TC007在食蟹猴体内具有一定免疫原性,抗Ad5抗体具有中和活性,高剂量组可见轻微免疫复合物形成,未见免疫器官损伤,生物分布主要集中于给药部位,可产生特异性T细胞。