hFXYD6反义核酸对胆管癌细胞体外增殖和侵袭能力的影响

目的:研究hFXYD6基因反义核酸对人胆管癌QBC939细胞体外增殖和侵袭能力的影响.方法:构建hFXYD6基因反义核酸真核表达载体pcDNA3.1(-)/hFXYD6(-)并转染人胆管癌QBC939细胞,同时设pcDNA3.1(-)空载体对照组和空白对照组.SYBR GreenⅠ荧光定量RT- PCR和免疫组化分别检测hFXYD6 mRNA及蛋白表达;MTT、平板克隆形成实验检测细胞体外增殖活性:流式细胞仪检测细胞周期;Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭能力.结果:与空白组和空载组比较,反义组细胞hFXYD6 mRNA及蛋白表达量降低;细胞群体倍增时间增加(46.8 h vs 34.5 h,35.3 h),细胞克隆形成率降低(24.3%±5.3% vs 61.0%±8.5%,58.0%±5.6%,P<0.001);细胞周期中G1期细胞比例明显升高(66.4%±2.9% vs 33.5%±2.3%,39.4%±3.7%,P<0.001),S期比例明显减少(18.6%±1.6% vs 36.2%±2.1%,34.1%±1.6%,P<0.001);Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数无显著改变.空白组和空载组细胞间均无明显差异.结论:hFXYD6反义核酸抑制人胆管癌QBC939细胞体外增殖能力,但对其侵袭能力无明显作用.

免疫抑制剂FK506预处理对内毒素休克的干预作用

目的 探讨FK5 0 6预处理对内毒素休克的干预作用。方法 以脂多糖 (LPS)诱导内毒素休克小鼠 15 5只为研究对象 ,将实验小鼠随机分为LPS组 (n =80 )、LPS +FK组 (n =75 )。随机抽取LPS组小鼠 2 0只 ,LPS+FK组小鼠 15只进行生存率观察 ,两组剩余小鼠给予LPS注射后 ,分时间段采血 ,剖胸、腹取肺脏及肝脏组织 ,测定肺干重/湿重比值 (W/D) ,血清TNF α、IL 1β和ALT、AST值。HE染色光镜观察肝脏病理改变。结果 与LPS组相比 ,LPS +FK组小鼠平均存活时间明显延长 ,72h存活率达 4 6 .6 % ;各时间点肺干重/湿重比值及血清ALT、AST含量均显著降低 ;血清TNF α、IL 1β含量明显降低 ,肝、肺组织病理学改变明显改善。结论 FK5 0 6预处理可减轻内毒素休克所致的多器官损害 ,具有下调炎症反应的作用。

FK506预处理对内毒素诱导急性肝损伤的保护作用

目的 :探讨FK5 0 6预处理对内毒素急性肝损伤小鼠的保护研究作用及其可能机制 .方法 :LPSip诱导小鼠急性肝损伤模型 ,实验小鼠随机分为LPS、LPS +FK组 ,绘制生存曲线 ,行两组间生存率动态分析 ;测定LPS注射后 0 ,0 .5 ,2 ,4 ,6 ,8h血清TNF α ,IL 1 β ,ALT ,AST含量 ,光镜下观察肝组织病理改变 .结果 :LPS +FK组小鼠 72h存活率为4 6 .6 7% ,而LPS组小鼠仅 1 0 .0 0 % (P <0 .0 1 ) .两组小鼠血清TNF α、IL 1 β含量变化均呈先升后降趋势 ,TNF α于 2h达峰值 ,IL 1 β于 4h达峰值 ,相同时间LPS +FK组TNF α、IL 1 β含量低于LPS组 (P均 <0 .0 1 ) .LPS +FK组小鼠 8h血清ALT、AST含量分别为 (1 .0 6± 0 .1 5 )、(1 .2 1± 0 .1 3)μkat/L ,低于LPS组 (2 .5 1± 0 .4 7)、(3.97± 0 .36 ) μkat/L(P均 <0 .0 1 ) .肝组织病理示LPS +FK组小鼠肝细胞肿胀坏死、胞质嗜酸性变及肝小叶炎细胞浸润均较LPS组减轻 .结论 :FK5 0 6预处理可减轻内毒素所致的急性肝损伤 ;FK5 0 6可能通过降低血清TNF α、IL 1 β含量 ,下调炎症反应而发挥抗炎作用 .

选择性入肝血流阻断在腹腔镜肝切除术中的应用

目的探讨选择性入肝血流阻断在腹腔镜肝切除术中的临床效果,并与全入肝血流阻断法进行比较。方法选取2010年1月至2015年12月于本院进行阻断肝门血流后腹腔镜肝切除术的62例患者为研究对象,根据术中血流阻断方式将其分为对照组(间断性全入肝血流阻断)和观察组(选择性入肝血流阻断)。比较两组患者的手术时间、术中出血量、术后住院天数、术后肝功能指标及并发症发生率。结果两组患者术中出血量、手术时间、术后住院天数比较差异均无显著性(P>0.05)。术后1、3、7天,观察组患者谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平均低于对照组(P<0.05),前白蛋白水平均高于对照组(P<0.05),两组患者白蛋白、总胆红素及直接胆红素水平比较均无显著差异(P>0.05)。两组患者术后并发症发生率比较无显著差异(P>0.05)。结论在腹腔镜肝切除术中,选择性肝门血流阻断能够取得与全入肝血流阻断相同的控制入肝血流及降低出血量的效果,且对肝功能的保护作用优于后者。

他克莫司对炎症反应血清TNF-α、IL-1β含量的影响

目的 :探讨他克莫司 (FK5 0 6)预处理对炎症反应血清肿瘤坏死因子 (TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)含量的影响。方法 :以内毒素休克和重症急性胰腺炎造成的急性肺损伤动物作为研究对象。脂多糖 (LPS)腹腔注射法诱导内毒素休克小鼠模型 ,牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法建立大鼠重症急性胰腺炎 (SAP)模型。实验动物随机分为AII组、AII +FK5 0 6组 ,实验前 2d开始 ,AII +FK5 0 6组动物给予他克莫司 2 0mL·kg 1 ,sc ,每 12h给予相同剂量维持 ;AII组以 0 .9%氯化钠注射液替代他克莫司。分别测定 0 ,3 ,6,9h两组血清TNF α、IL 1β含量并观察肺湿重 干重 (W D)比值 ,肺组织病理学改变。结果 :两组血清TNF α、IL 1β含量均呈先升后降趋势 ,TNF α于 3h达峰值 ,IL 1β于 6h达峰值 ,各时间AII +FK5 0 6组TNF α、IL 1β含量均较AII组低 ,均差异有极显著性 (均P <0 .0 1) ;各时间点AII、AII +FK5 0 6组大、小鼠W D比值均较 0h相显著升高 ,AII +FK5 0 6组升高幅度低于AII组 ,均差异有极显著性 (均P <0 .0 1)。肺组织病理显示 :AII组大小鼠肺实质及间质广泛性损害 ,肺间隔明显水肿、增厚 ,肺泡结构紊乱伴大量炎性渗出及PMN浸润 ;AII +FK5 0 6组肺组织损伤程度减轻。结论 :他克莫司干预可减少炎症反应时血清TNF

继发性肝外胆管结石患者腹腔镜下经胆囊管胆总管探查取石术的疗效

目的:探讨腹腔镜下经胆囊管胆总管探查取石术(LTCBDE)手术治疗继发性肝外胆管结石患者病情的疗效。方法:选择我院收治的继发性肝外胆管结石患者87例,随机分为腹腔镜下胆道探查"T"管引流术(LCBDE)治疗组(对照组)和腹腔镜下经胆囊管胆总管探查取石术(LTCBDE)治疗组,统计两组的手术时间、手术出血量、术后补液量、术后引流时间、术后住院时间、住院费用、术后恢复时间、相关并发症等,比较临床疗效。结果:LTCBDE组患者手术时间大于对照组(2.1±0.5)d vs.(1.6±0.4)d,P<0.001],LTCBDE组手术出血量、术后补液量、术后引流时间、术后住院时间、住院费用、术后恢复时间分别为(17.4±5.4)m L、(6 550.4±1 076.9)m L、(3.5±1.6)d、(4.1±1.7)d、(12 243.5±2 379.6)元、(11.3±3.5)d均小于LCBDE组的(22.1±7.5)m L、(8 304.2±1 394.8)m L、(32.9±10.4)d、(6.4±2.4)d、(14 098.1±2 897.3)元、(16.1±5.7)d(P值分别为0.001、0.000、0.000、0.015、0.001、0.000);LTCBDE组患者发生胆漏、急性腹膜炎的比例分别为1/46、1/46,均小于LCBDE组的6/41、7/41(P值分别为0.033、0.016)。结论:在一定的适应证情况下,LTCBD手术治疗具有损伤小、花费少、并发症少等优点,对继发性肝外胆管结石患者的病情改善具有重要意义。

FK506对急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的 :实验观察FK5 0 6对大鼠胰腺炎肺损伤的保护作用。方法 :牛磺胆酸钠胰胆管逆行注入法诱导大鼠急性胰腺炎模型。SD大鼠随机分为 3组 :对照组实验前 12h及 1h分别以生理盐水(4mL kg)灌胃 ,实验时经胰胆管逆行注入生理盐水 ;胰腺炎组实验时经胰胆管逆行注入 5 %牛磺胆酸钠(80mg kg) ;FK组实验前 12h及 1h分别以FK5 0 6 (4mL kg)灌胃。观察 2 4h存活率 ,血清TNF α水平 ,肺湿重 干重比值和肺组织病理切片的变化。结果 :胰腺炎组 2 4h大鼠存活率 5 0 % ,FK组 10 0 % ,FK组肺湿重 干重比值和显微镜下病理损伤程度较未预防组明显减轻 ,血清TNF α水平也降低。结论 :FK5 0 6对急性坏死性胰腺炎导致的肺损伤具有明显的保护作用 ,其机理可能是通过抑制TNF

一种新型严重肝外伤模型的建立及评价

目的建立一种严重肝外伤动物模型并对其进行评价。方法选取中国实验用小型猪11只,使用自行研制的MT-1型体内爆炸致伤装置,以0.4g黑火药制成标准化爆炸物,开腹并将爆炸物置于小型猪拟致伤肝叶表面,周围脏器以绵质医用纱布隔离保护,引爆致伤。测定肝脏毁损面积(S)、失血量(V)、平均动脉压(MAP),用以评价模型动物的局部伤情及伤后血流动力学的变化情况。结果肝脏毁损面积为12.19±2.28cm2。MAP于伤后早期(2～7min)呈线性下降,下降速率为6.58±2.30mmHg/min,下降至伤前一半水平的时间为7.22±0.37min。MAP下降至伤前一半水平时的失血量为466±79ml。前3只实验动物未行救治,致伤至死亡时间为23～31min。结论所制备的严重肝外伤小型猪模型伤情符合人类肝外伤AASTⅣ级标准,且具有重复性好、可控性强等优点,可用于野战外伤及交通伤的救治研究。

肝复乐胶囊联合索拉非尼治疗晚期肝癌的临床研究

目的评价肝复乐胶囊联合索拉非尼治疗晚期肝癌的临床疗效。方法选取2014年5月—2016年5月在中国人民解放军总医院第一附属医院接受治疗的晚期肝癌患者80例,根据治疗方案的差别分成对照组(40例)和治疗组(40例)。对照组患者口服甲苯磺酸索拉非尼片,0.4 g/次,2次/d。治疗组在对照组的基础上口服肝复乐胶囊,6粒/次,3次/d。两组患者均治疗4周。评价两组患者治疗前后近期疗效、生存质量改善情况和血清学指标差异。结果治疗后,对照组的客观缓解率(ORR)为40.00%,临床获益率(CBR)为75.00%,治疗组的ORR为67.50%,CBR为92.50%,两组ORR、CBR比较差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,对照组的生存质量改善率为75.00%,显著低于治疗组的92.50%,两组生存质量改善情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和骨桥蛋白(OPN)水平均明显降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P<0.05);且治疗后治疗组患者降低更明显,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肝复乐胶囊联合索拉非尼治疗晚期肝癌的临床疗效较好,可以提高患者免疫能力和改善生活质量,具有一定的临床推广应用价值。

肝癌组织中miR-338-3p的表达及与临床病理参数的关系

目的:探讨肝癌组织中微小RNA-338-3p(miR-338-3p)的表达及与临床病理参数的关系。方法:选取2015年1月至2016年6月我院手术获得的67例肝癌组织标本,同时每例标本均取癌旁正常组织标本作为配对对照,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)对两组组织标本中的miR-338-3p进行检测,并分析其与肝癌临床病理特征的关系。结果:45例(67.16%)miR-338-3p表达下调,22例(32.85%)表达上调;RT-qPCR结果显示,肝癌组织中miR-338-3p的相对含量为(0.76±0.38),低于癌旁正常组织中的(1.23±0.45),差异有统计学意义(t=-6.259,P=0.000)。miR-338-3p在低分化、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤浸润深度T3+T4期、有淋巴结转移肝癌患者肝癌组织中的表达下调率高于中高分化、Ⅰ+Ⅱ期、T1+T2期、无淋巴结转移肝癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、病理类型、肿瘤大小肝癌患者肝癌组织中miR-338-3p表达下调率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-338-3P在肝癌组织中呈低表达水平,与分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关,可能参与了肝癌的发生发展过程,早期检测可作为评估肝癌病情的指标。

经脐单孔腹腔镜辅助整形术治疗急性胆囊炎的临床效果

目的:探讨单孔腹腔镜辅助整形术(TUES)对急性胆囊炎患者腹壁美观及其肝功能的影响。方法:选取我院急性胆囊炎择期手术患者130例,随机分为观察组和对照组。观察组采用经脐单孔腹腔镜胆囊切除术联合整形术,对照组采用三孔腹腔镜胆囊切除术。观察并比较两组手术时间、术后疼痛评分、切口满意度及肝功能指标的变化情况。结果:与对照组比较,观察组患者手术时间长,术后疼痛评分低,患者对切口美观满意度高,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组住院日无显著差异(P>0.05)。两组患者术前ALT、AST和ALP水平无显著差异(P>0.05)。两组患者术后ALT、AST和ALP水平均高于术前,组内比较差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者术后ALT、AST和ALP水平低于对照组,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:单孔腹腔镜辅助整形术能够改善急性胆囊炎患者病情,提高腹壁美观效果,而且对肝功能影响较小,值得临床推广。

良性胆管狭窄242例的外科疗效分析

目的 分析影响良性胆管狭窄外科疗效的因素。方法 总结1990-2005年242例良性胆管狭窄的资料，对胆管狭窄的病因、狭窄部位、手术时机、手术方式与疗效的关系进行分析。结果 （1）病因：损伤性胆管狭窄、胆结石继发胆管狭窄、胆总管囊肿所致胆管狭窄外科疗效的优良率分别为94．1％、71．4％、100％；（2）狭窄部位：胆肠吻合口狭窄最多见，在损伤性和结石性胆管狭窄中，其手术治疗优良率分别为100％和88．2％；（3）手术时机：紧急手术＋早期手术及早期手术者效果最佳，优良率100％；（4）手术方式：胆肠吻合、胆管修复、介入治疗的优良率分别为90．9％、92．3％、63．2％。结论 根据不同的病因和狭窄部位的特点，选择恰当的手术时机和手术方式可有效提高良性胆管狭窄的治疗效果。

arresten对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长的抑制作用的研究

目的探讨arresten抑制人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长的作用。方法构建包含arresten cDNA的分泌型真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ss-arresten,并以脂质体法将重组质粒转染至SGC-7901细胞。蛋白印迹法(W estern b lot)检测SGC-7901是否分泌表达arresten,同时,通过生长曲线绘制及生长周期测定的方法了解上述转基因措施本身对SGC-7901细胞的体外生物学特性的影响。将转基因的SGC-7901细胞株接种至裸鼠皮下,使其在接种局部表达arresten,观察肿瘤生长情况。结果成功构建了分泌型真核表达载体pcDNA3.1(+)-ss-arresten,并获得了可分泌表达arresten的人胃癌SGC-7901细胞株。质粒转染对SGC-7901细胞增殖特性无影响。转基因SGC-7901细胞的裸鼠移植瘤生长缓慢。结论arresten抑制人胃癌SGC-7901移植瘤的生长,其途径可能是通过抑制其滋养血管的生长而实现。

腹腔镜胆囊切除术中Rouviere沟引导定位的临床应用价值

目的:研究Rouviere沟引导定位对腹腔镜胆囊切除术的应用价值。方法:选择2010年7月至2014年10月在我院进行胆囊切除术的患者300例,根据手术方式不同将患者分为研究组和对照组,每组各150例。研究组患者在Rouviere沟引导下行腹腔镜胆囊切除术,对照组采用传统定位手术。观察并比较两组手术时间、并发症及手术效果。结果:研究组患者Rouviere沟分型为开放型89例(59.33%)、融合型32例(21.33%)、缺失型29例(19.33%),分型的性别构成存在统计学意义(P<0.05);与对照组比较,研究组手术时间较短、并发症少和中转开腹率低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后未出现任何病例胆管损伤和手术死亡,手术后恢复较好。结论:Rouviere沟引导定位行腹腔镜胆囊切除术的临床效果较好,值得临床进一步推广应用。

胆总管探查并T管引流术后胆管狭窄再手术23例临床分析

目的探讨常规开腹胆总管探查、T管引流术后发生胆管狭窄的特点、原因以及再手术处理。方法回顾性分析中国人民解放军总医院肝胆外科1990-2005年间收治的因常规开腹胆总管探查、T管引流术后胆管狭窄并再手术的23例良性胆管狭窄的病例资料,对其既往手术史、此次就诊、再手术及疗效情况加以总结分析。结果23例胆管狭窄首次诊断均为胆囊结石、单纯胆总管结石,既往有1～3次手术史。狭窄分型以BismuthⅠ型和Ⅱ型为主,其中Ⅰ型7例（30.4%）;Ⅱ型8例（34.8%）,Ⅲ型4例（17.4%）;Ⅳ型4例（17.4%）。手术方式修复手术和胆肠吻合各11例（47.8%）,介入治疗1例（4.3%）。随访13例病人中胆道修复和胆肠吻合术疗效均为优良,1例介入治疗病人因长期胆道梗阻致肝功能衰竭死亡。结论肝门部胆管是极易受损的部位,不可轻视常规经典胆总管探查、T管引流手术不当所带来的严重并发症。

PP2对人胆管癌细胞株QBC939侵袭能力的影响

目的:探讨Src激酶特异性抑制剂PP2对人胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响和机制。方法:通过Western Blotting技术检测PP2对人胆管癌QBC939细胞中Src激酶活化的影响;用Transwell小室法观察PP2对QBC939细胞的影响;用RT-PCR和Western Blotting技术检测PP2对QBC939细胞侵袭能力相关分子的作用。结果:实验组p-Src蛋白表达水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组QBC939细胞体外侵袭能力较对照组显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,实验组E-cadherin表达显著增强,CD44表达明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PP2通过抑制Src激酶活化,增强E-cadherin表达、减弱CD44表达,抑制人胆管癌QBC939细胞侵袭能力。