日本血吸虫PROHIBITIN 2克隆和表达及免疫保护效果评估

为研究日本血吸虫PROHIBITIN的生物特性,利用PCR和3’RACE扩增到日本血吸虫抗增殖蛋白2(Schistosoma japonicum Prohibitin 2,Sj PHB2)基因,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-SjPHB2,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达,用Western blot检测其免疫原性。将重组蛋白免疫小鼠评估其免疫保护效果,ELISA检测其特异性抗体水平。结果显示:日本血吸虫Sj PHB2基因编码299个氨基酸,含PHB结构域;含GST标签的r Sj PHB2融合蛋白的分子量为59 kDa;r Sj PHB2能被GST单克隆抗体抗和免疫血清识别,表明其具有较好的免疫原性;将r Sj PHB2结合ISA206佐剂免疫BALB/c小鼠可诱导较高水平的特异性IgG抗体,但未能诱导显著的减虫率和减卵率。本文结果为开展日本血吸虫Sj PHB2的表达特性和生物学功能提供了基础。