菠萝蛋白酶应用的性质研究

本文研究了pH、温度、金属离子、EDTA、还原剂对菠萝蛋白酶单宁复合物酶促反应速度的影响 ,结果表明 ,该酶的最适pH为 7.1,最稳定的pH范围为 3.9～ 4 .2 ,最适反应温度为 5 5℃ ,一般的金属盐NaCl、kCl对酶反应影响不大 ,MgCl2 、CaCl2 在高浓度下对酶有一定程度的抑制作用 ,在低浓度下影响不显著 ,半胱氨酸在一定浓度的范围内 ,对酶反应速度有促进作用。EDTA本身对菠萝蛋白酶没有激活作用 ,它能鳌合酶反应所需的金属离子 ,使酶活降低。

飞扬草药理作用研究概况

飞扬草资源丰富,有清热解毒、杀虫止痒功效。本文综述了飞扬草在消炎、止泻、退热、止痛、镇静、抗疟疾、抑制肿瘤等方面的研究情况,为资源的合理利用提供了依据。

菠萝蛋白酶的研究与应用进展

综述了菠萝蛋白酶在抑制肿瘤和心血管疾病防治方面的研究及应用进展。

菠萝蛋白酶的保存稳定性研究

针对菠萝蛋白酶稳定性方面存在的实际问题,研究了湿度条件、温度条件及60Coγ辐射对菠萝蛋白酶活性的影响,结果表明,随着储存时间的延长,湿度条件比温度条件更能影响酶的活性;选用60Coγ辐射（8 kGy）对菠萝蛋白酶进行杀菌,酶活损失率为11.0％。

果糖—1，6—二磷酸镁中6—磷酸果糖镁和果糖的检测

目的 分离检测果糖-1,6-二磷酸镁中6-磷酸果糖镁和果糖.方法 采用纸电泳法.结果 该法操作简便,分离效果好.结论 该法可用于果糖-1,6-二磷酸镁的质量控制.

禽蛋壳膜的综合利用

禽蛋是人们日常生活中的一大副食品,市场需求量很大。近年来,随着我国大规模机械化养禽业和农村经济的不断发展,禽蛋产量以每年10％左右的速度递增。1990年全国禽蛋产量达到79.5万吨。

五味子有效部位及其药理作用研究进展

对近年来五味子有效部位及其药理作用研究情况进行综述,为进一步研究开发五味子资源提供文献参考。

广东海风藤提取物HS_2对老年痴呆小鼠的药效学研究

目的 研究广东海风藤提取物HS2 对老年痴呆 (AD)模型小鼠的治疗作用及作用机制。方法 选用昆明种小鼠 ,腹腔注射D 半乳糖和灌胃三氯化铝 90d制备老年痴呆小鼠模型 ,3个治疗组在造模的后 4 0d分别灌胃低、中、高剂量HS2 。通过Morris水迷宫、RT PCR ,常规HE染色及Aβ1～ 40免疫组化染色 ,来观察HS2 对AD模型小鼠学习记忆、脑内早老素 1(PS1)、β位点APP内切酶 (BACE)基因表达及海马、皮层中老年斑的影响。结果 低、中、高剂量的HS2 均能改善AD小鼠学习记忆 ,下调PS1和BACE基因的表达 ,减少老年斑的生成。结论 不同剂量的HS2 能改善AD小鼠的学习记忆能力 ,降低PS1,BACEmRNA的含量 。

五味子乙素对M146L细胞分泌β淀粉样蛋白的影响

目的:探讨五味子乙素对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)的影响。方法:体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样前体蛋白(Amyloid beta-protein precursor,APP)基因及突变型早老素1(prsenilin-1,PS1)基因的CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白42(amyloid β-protein,Aβ_(42)),建立Aβ_(42)过度表达的细胞模型。加入待筛选的药物五味子乙素,用四甲基偶氮唑蓝比色法(microculture tetrazolium assay,MTT法)检测不同浓度的五味子乙素(1.67,5,15μg·mL^(-1))对M146L细胞毒作用,应用ELISA法(enzyme-linked immunosorbent assay)观察细胞分泌的Aβ_(42)的变化。结果:不同浓度的五味子乙素对M146L存活率没有影响,不具有细胞毒作用。5和15μg·mL^(-1)的五味子乙素对细胞分泌的Aβ_(42)有抑制作用,以高剂量组最为明显。结论:一定剂量的五味子乙素对M146L细胞分泌的Aβ_(42)有明显的抑制作用。

丹参酮ⅡA对U251胶质瘤细胞的增殖抑制和原癌基因表达的影响

目的 :探讨丹参酮ⅡA对人胶质瘤细胞株U2 5 1的增殖抑制作用及其作用机理。方法 :应用MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA对U2 5 1细胞的增殖抑制 ,应用流式细胞仪观察丹参酮ⅡA对U2 5 1细胞周期的影响 ,应用RT -PCR观察相关基因C -myc表达的变化。结果 :丹参酮ⅡA对U2 5 1细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性 ,当浓度为 0 10g·L-1时 ,对U2 5 1细胞增殖的抑制率达到 (5 3 7± 6 0 ) %。流式细胞仪分析显示 ,用 0 10g·L-1丹参酮ⅡA培养 3d ,细胞周期中G0 /G1期所占比例增高 ,S期占细胞周期的比例降低。RT -PCR结果显示 ,随着丹参酮ⅡA作用剂量的增加 ,c -myc基因的表达被明显抑制。结论 :丹参酮ⅡA对人胶质瘤细胞系U2 5 1的增殖具有明显的抑制作用 ,并对原癌基因c -myc的表达具有抑制作用。

苦参碱对U251胶质瘤细胞的增殖抑制和原癌基因表达的影响

目的 探讨苦参碱对胶质瘤细胞株 (U2 5 1细胞株 )的抑制作用及其作用机制。方法 用MTT比色法检测不同浓度苦参碱对U2 5 1细胞的增殖抑制 ,流式细胞仪观察苦参碱对U2 5 1细胞周期的影响 ,RT PCR观察原癌基因C myc表达的变化。结果 苦参碱对U2 5 1细胞增殖抑制作用成剂量依赖性 ,当浓度为 0 10g·L-1时 ,对U2 5 1细胞增殖的抑制率达到 5 3 7%± 6 0 %。流式细胞仪分析显示 ,用 0 10g·L-1苦参碱培养 3d ,细胞周期中G0 /G1期所占比例增高 ,S期占细胞周期的比例减低。RT PCR结果显示 ,随着苦参碱作用剂量的增加 ,C myc基因的表达被明显抑制。结论 苦参碱对人胶质瘤细胞系U2 5 1的增殖具有明显的抑制作用 ,并对原癌基因C

丹参酮ⅡA对C6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

目的:探讨丹参酮ⅡA对大鼠胶质瘤细胞株C6的增殖抑制作用及其作用机理。方法:应用MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA对C6细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪观察丹参酮ⅡA对C6细胞周期的影响,应用琼脂糖凝胶电泳观察C6细胞DNA的变化,应用RT-PCR观察相关基因c-myc表达的变化。结果:丹参酮ⅡA对C6细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性。细胞周期分析显示:用1.0mg/L丹参酮ⅡA作用C6细胞,在作用72h出现凋亡峰,凋亡细胞占细胞总数7.7%;用2.0mg/L丹参酮ⅡA作用C6细胞,在作用72h出现凋亡峰,凋亡细胞占细胞总数21.6%。琼脂糖凝胶电泳结果显示:一定剂量丹参酮ⅡA作用后,C6细胞具有明显的凋亡特征,细胞核DNA呈梯状降解。RT-PCR结果显示:随着丹参酮ⅡA作用剂量的增加,c-myc基因的表达被明显抑制。结论:丹参酮ⅡA对大鼠胶质瘤细胞系C6的增殖具有明显的抑制作用及诱导凋亡的作用,并对原癌基因c-myc的表达具有抑制作用。

含去痴灵水提物血清抑制M146L细胞分泌Aβ

目的研究含去痴灵水提物血清对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白(βamyloidprotein)的影响,探讨去痴灵治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)的可能性及作用机制。方法采用血清药理学方法,制备含去痴灵水提物血清。体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样前体蛋白(betaamyloidproteinprecursor,APP)和突变型早老素1(prsenilin1,PS1)基因的中华仓鼠卵巢上皮细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白42(Aβ42),建立Aβ42过度表达的细胞模型。加入含去痴灵水提物血清,用MTT法检测不同浓度(12%、6%、3%)的含药血清对M146L细胞毒作用,用ELISA法测定其对M146L细胞分泌Aβ42的影响。结果3个浓度的含药血清对M146L存活均无影响,对细胞分泌的Aβ42有抑制作用,并呈现一定的量效关系。结论一定剂量(12%、6%、3%)的含去痴灵水提物血清对M146L细胞分泌的Aβ42有明显的抑制作用,其机制尚待进一步研究。

广东海风藤中木脂素和五味子乙素的含量测定

目的:对广东海风藤药材超临界二氧化碳萃取物中木脂素的含量进行测定。方法:采用超临界二氧化碳萃取广东海风藤药材,萃取压力10MPa,萃取温度45℃,分离压力5MPa,分离温度50℃。采用比色法和HPLC法分别测定了萃取物中总木脂素和五味子乙素的含量。结果:广东海风藤药材超临界二氧化碳萃取物中总木脂素平均含量以五味子酯甲计为96.6mg·g-1,RSD为2.77%;五味子乙素平均含量为25.53mg·g-1,RSD为2.71%。结论:采用超临界二氧化碳萃取法能有效地提取出广东海风藤中木脂素成分。本实验所采用方法可作为广东海风藤药材及其制剂的质量控制方法。

人参皂苷Rg1对脂多糖抑制的U251细胞株脑啡肽酶表达的影响

目的 为寻找治疗阿尔茨海默病的药物及方法 ,探讨人参皂苷Rg1对脂多糖 (LPS)诱导的U2 5 1细胞株脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法 应用MTT比色法检测一定剂量LPS(10 0mg·L- 1)和不同浓度人参皂苷Rg1(2 .5 ,5和 10 μmol·L- 1)对U2 5 1细胞存活率的影响 ,应用RT PCR观察细胞中NEP表达的变化。结果 LPS 10 0mg·L- 1作用于U2 5 1细胞株 ,U2 5 1细胞存活率降低 ,细胞内NEP的表达下降。人参皂苷Rg1能提高LPS诱导的U2 5 1细胞的存活率 ,使细胞内NEP的表达增高。结论 人参皂苷Rg1对LPS造成的细胞毒性具有一定的保护作用 ,并可减轻LPS对细胞内NEP表达的抑制。

新生小鼠小脑提取液对成年小鼠神经干细胞分裂与增殖的影响

目的:探讨新生小鼠小脑提取液(ECNM)对成年小鼠脑内神经干细胞分裂与增殖的影响。方法:采用脑立体定位给药技术,将ECNM注入前脑和海马,应用Nestin单抗做免疫组化染色,显示神经干细胞。结果:给予ECNM后7d和14d。在前脑和海马均可见密集的神经干细胞,对照组未见阳性染色。结论:ECNM可诱导成年小鼠神经干细胞分裂与增殖。

骨骼肌提取液促进体外培养神经干细胞增殖作用研究

目的寻找促神经干细胞分裂增殖物质,为神经系统发育研究和神经系统疾病的治疗研究提供新的依据。方法用硫酸铵盐析及超滤离心法分离骨骼肌蛋白质,体外培养新生小鼠神经干细胞,通过神经球生成的观察、特异性蛋白质免疫细胞化学染色和MTT比色检测法鉴定神经干细胞并判断其增殖能力。结果在培养物中有大量神经球生成,且与对照组差异有显著性(P<0.01),神经干细胞的特异性蛋白质(Nestin)免疫细胞化学染色呈阳性。结论骨骼肌提取液可促进体外培养神经干细胞增殖分裂,且呈一定量效关系,其有效成分为分子量≤100 ku的蛋白质分子。

果糖－1，6－二磷酸－镁中果糖二磷酸检测方法的研究

目的：建立测定果糖-1，6-二磷酸一镁中果糖二磷酸的方法。方法：样品溶液用0．5mol·L^-1的氢氧化钠调pH5．5-6．2后。利用3-磷酸甘油脱氢酶、磷酸丙糖异构酶和醛缩酶，通过测定还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)在340nm处吸光度的变化来测定果糖-1，6-二磷酸-镁中果糖二磷酸的含量。结果：在0-400mg·L^-1范围内，线性关系良好(r=0．9996)。高、中、低浓度的平均回收率分别为99．2％，100．0％，99．8％；RSD分别为0．48％，0．58％，0．52％(n=3)。结论：本法适合果糖-1，6-二磷酸-镁中果糖二磷酸的测定。