头孢曲松有潜在加剧脓毒症免疫抑制的风险

目的:研究头孢曲松对脓毒症模型小鼠脾脏树突状细胞(DCs)的影响,及其临床意义。方法:96只雄性昆明鼠随机分配入组,正常对照组(A组)40只、脓毒症模型组(B组)32只、头孢曲松治疗组(C组)24只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制模,制模后0、12、24、48、72h分批处死小鼠,流式细胞计数脾脏DCs及凋亡率。结果:与正常观察组比较,模型组所有观察时间点脾脏DCs数量明显减少,凋亡率增加(均P﹤0.05);给予头孢曲松治疗后脾脏DCs的丢失进一步加剧(P﹤0.05),但凋亡率无显著改变(P﹥0.05)。结论:严重脓毒症时脾脏DCs明显减少。常规使用头孢曲松加剧DCs的丢失,但凋亡率无显著改变,推测源于单核细胞向DCs的分化障碍,从而加剧了免疫抑制和炎症失衡。

将心率变异概念引入危重患者监护的体会

目的 探讨危重症患者中不同心率变异（HRV）的机制及对预后判断的指导价值.方法 收集2005-01～2009-12于长海医院急诊科ICU接受治疗的患者35例,男性21例,女性14例,年龄24～92岁.按不同心率变异进行分组,计算APACHEⅡ评分,并以死亡作为终指标观察预后.结果 不同组别间的APACHEⅡ评分及死亡率存在差异,心率加速组和晚期减速组APACHEⅡ评分差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 心率变异可以有效地进行患者危险度分层并估计预后.

IL-6/IL-10指数在脓毒症虚实辨证中的临床价值观察

目的 探讨脓毒症时白细胞介素-6(IL-6)/白细胞介素-10(IL-10)指数在中医虚实证候辨证中的临床使用价值。方法 62例患者分为实热证组34例,气虚津伤证组28例。进行急性生理与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分,检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,遴选并构建脓毒症指数IL-6/IL-10,探讨其指导虚实辨证的临床价值。结果 实热证组和气虚津伤证组患者APACHEⅡ评分比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。实热证组患者血清IL-6浓度高于气虚津伤证组,而血清IL-10浓度则低于气虚津伤证组(均P <0.05);两组间血清IL-1β、IL-8、TNF-α浓度比较,差异均无统计学意义(均P> 0.05)。脓毒症指数IL-6/IL-10取20为截断值时,对中医虚实证候诊断的敏感性为88.24%,特异性为100%,AUC 0.98,95%CI 0.95~1.0。结论 脓毒症指数IL-6/IL-10能有效地指导临床虚实辨证。

血清高迁移率族蛋白B1与脓毒症小鼠心肌细胞凋亡的相关性研究

目的探讨血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)水平与心肌细胞凋亡率及血清脑钠肽(brain natriupeptide,BNP)的相关性;评价正丁酸钠(sodium butyrate,SB)对脓毒症小鼠心肌凋亡的影响及心功能不全的保护效应。方法采用小鼠盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症模型。120只小鼠随机分为假手术组(Sham组)、CLP组及SB组,每组40只。用ELISA法检测各组0、12、24、48、72 h血清HMGB1与BNP浓度,用流式细胞仪测定各组0、12、24、48、72 h心肌细胞凋亡率,分别对HMGB1与心肌细胞凋亡率、HMGB1与BNP进行相关性分析。另外,研究正丁酸钠对脓毒症小鼠心肌细胞凋亡率、血清BNP以及120 h生存率的影响。结果血清HMGB1浓度在CLP术后12 h开始升高,并与心肌细胞凋亡率及血清BNP浓度在12、24、48、72 h各时间点均呈显著相关性(P<0.05);正丁酸钠能明显降低心肌细胞凋亡率及血清BNP浓度,并显著改善脓毒症小鼠生存率(P<0.05)。结论 HMGB1可能参与脓毒症小鼠心肌凋亡的过程,并导致心功能不全;应用正丁酸钠干预能减轻心肌凋亡,改善心功能。

奥曲肽对急性胰腺炎患者的临床疗效及对血液流变学、血清炎症因子的影响

目的探讨奥曲肽对急性胰腺炎患者的临床疗效及对血液流变学、血清炎症因子的影响。方法选取90例急性胰腺炎患者,随机分为观察组和对照组。对照组予以常规基础治疗,观察组在对照组基础上给予奥曲肽,观察治疗前后血液流变学及血清炎症因子变化及临床疗效。结果两组患者治疗后淀粉酶水平、血液流变学指标水平、血清炎症因子水平均显著优于治疗前,且治疗后观察组患者改善程度比对照组显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的腹痛缓解时间、腹部压痛消失时间、血淀粉酶和尿淀粉酶恢复时间均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论奥曲肽辅助治疗对急性胰腺炎患者的临床疗效显著,显著改善血清炎症因子、淀粉酶水平和血液流变学指标,有较大的临床应用价值,值得推广。

脓毒症小鼠CD14^＋单核细胞CD16（FcγRⅢ）表达对预后的影响

目的 探讨脓毒症时小鼠CD14^＋单核细胞CD16表达强度与预后的相关性.方法 雄性昆明鼠30只,随机分为3组（n=10）：正常对照组、脓毒症组、严重脓毒症/感染性休克组.于CLP术后48 h取血备用.流式细胞仪检测各组CD14^＋单核细胞中CD16的表达水平.结果 严重脓毒症组单核细胞CD16表达明显高于对照组和脓毒症组（P〈0.05）;脓毒症组单核细胞CD16表达与对照组比较差异无统计学意义.结论 严重脓毒症时,小鼠血液单核细胞CD16表达明显增加,CD16的表达与预后密切相关.

脓毒症时树突状细胞的病理改变及临床意义

目前,脓毒症仍然是重症监护室的主要死亡原因,其特征性的免疫功能紊乱尤其是晚期特异性免疫抑制越来越被重视.树突状细胞（DC）是体内功能最强的抗原呈递细胞,能够刺激、诱导初始型T细胞增殖、分化,因此被认为是特异性免疫反应的启动者.脓毒症时,DC数量的下降、表达MHCⅡ及其刺激分子能力下降,从而影响T淋巴细胞的活化、分化,直接导致Th1细胞减少,削弱机体的细胞免疫.而通过补充DC或促进其增殖、分化,可以明显改善脓毒症时的免疫抑制状态,提高生存率.因此,针对DC的干预策略可能成为治疗脓毒症的新思路.

外源性粒-巨噬细胞集落刺激因子对脓毒症树突状细胞的生物效应

目的 探讨粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）用于重度脓毒症治疗对于脾脏树突状细胞（DCs）的生物学效应及对预后影响.方法 选取160只雄性昆明鼠,随机（随机数字法）分为4组：健康对照组（n=50,不予特殊处理,正常喂养）,CLP组（n=42,盲肠结扎穿孔）,常规治疗组（n=34,CLP术后12、24、36、48、60、72、84h腹腔注射头孢曲松5 mg/kg）,GM-CSF治疗组（n=34,CLP术后除常规治疗外另于12、36、60、84h皮下注射GM-CSF 20 μg/kg）.于CLP术后0、12、24、48、72 h分批处死,用流式细胞仪测定各组脾脏DCs数量及凋亡率,用ELISA法检测各组血清IL-12质量浓度.并观察96h生存预后.结果 重度脓毒症时所有时间点脾脏DCs凋亡增加、数量明显减少（P＜0.05）,IL-12血清浓度单向曲线型增高（P＜0.05）；头孢曲松治疗可以加剧DCs的丢失（P＜0.05）,而对IL-12质量浓度无影响（P＞0.05）.GM-CSF治疗可增加DCs的数量（P＜0.05）,降低IL-12质量浓度（P＜0.05）.Logistic回归分析GM-CSF的OR值为0.079.结论 GM-CSF治疗重度脓毒症可以增加脾脏DCs数量,降低血清IL-12质量浓度,改善预后.

栀子苷通过调控单核细胞表型改善小鼠盲肠结扎穿孔技术脓毒症模型预后

目的:探讨不同剂量栀子苷治疗脓毒症的疗效和主要生物学机制。方法:雄性BALB/c小鼠通过盲肠结扎穿孔技术(cecal ligation and puncture, CLP)复制脓毒症模型。在生存实验中,动物被随机分为以下各组,每组20只:于CLP术后0 h、24 h经小鼠尾静脉分别注射栀子苷20 mg/kg、40 mg/kg或生理盐水(对照组);于CLP术后24 h经小鼠尾静脉注射栀子苷40 mg/kg或生理盐水(对照组)。观察不同组别的生存预后;并流式检测单核细胞CD16、MHC-Ⅱ、TLR2、TLR4表达水平;ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10浓度;Western Blot测定PPARγ浓度。结果:40 mg/kg栀子苷CLP后0 h和24 h静脉给药能显著改善脓毒症小鼠模型生存预后,小剂量(20 mg/kg)栀子苷和延迟给药(24 h)无显著获益。与对照组相比,有效剂量栀子苷能不同程度地全面抑制脓毒症小鼠血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10浓度,差异有统计学意义(P<0.05);能降低脓毒症小鼠24 h单核细胞CD16表达,差异有统计学意义(P<0.05);能增加脓毒症小鼠24 h单核细胞MHCⅡ表达,差异有统计学意义(P<0.05);对脓毒症小鼠24 h单核细胞TLR2、TLR4表达无显著影响,差异无统计学意义(P>0.05);能恢复脓毒症小鼠24 h单核细胞PPARγ蛋白活性(0.69±0.02 vs.0.44±0.02),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:早期大剂量栀子苷(40 mg/kg)可以通过调节单核细胞表型,调控细胞因子网络显著改善CLP小鼠脓毒症模型的生存预后。对PPARγ的正性作用可能是栀子苷上游的药理学机制。

ILT4促进脓毒症炎性反应并介导免疫麻痹

目的：探讨脓毒症单核细胞表达ILT4的生物学行为和效应，及对于预后的影响。方法：选取BALB/c、BALB/c ILT4–/–雄性小鼠，CLP复制脓毒症模型。用流式细胞仪定量检测CLP术后24h单核细胞ILT4、MHC-Ⅱ表达水平；用ELISA法检测各组0、6、12、24h血清IL-6、TNF-α浓度；并观察168h内生存预后。 结果：CLP术后24小时脓毒症小鼠外周单核细胞高度表达ILT4分子 （193.50 ± 52.54 vs. 1292.00 ± 143.70, p 〈 0.05） ；较WT组ILT4–/–小鼠外周单核细胞表达MHC-Ⅱ比率明显增高（24.25± 6.76% vs. 49.38 ±5.66%, p 〈 0.05） 。CLP术后24h血清IL-6显著增高（54.25± 20.04 vs. 470.75±88.03, p 〈 0.05），ILT4敲除后很大程度的抑制这一趋势（470.75±88.03 vs. 241.25 ± 45.10, p 〈 0.05）；但对TNF-α表达无显著性干扰（53.13 ±5.49 vs. 50.88 ±6.38, p〉 0.05）。且ILT4–/–小鼠CLP术后生存率WT明显增加（p 〈 0.05）。结论：脓毒症时单核细胞高表达ILT4，与高IL-6水平及低MHC-Ⅱ表达率相关，导致死亡率增加。