近年葡萄病毒病研究的进展

９０年代以来，在国际范围内，葡萄病毒病研究飞速发展。主要病毒，例如扇叶病毒、卷叶相关病毒已在分子生物学水平上定性。许多过去病原不清的病害也逐渐明确了致病病原。葡萄茎痘病（Ｒｕｐｓｔｒｉｓｓｔｅｍｐｉｔｉｎｇ）与斑点病（Ｆｌｅｃｋ）被证明是由病毒造成的...

包埋干燥超低温保存苹果离体茎尖

选用继代培养７０ｄ的苹果离体茎尖，在５℃条件下低温驯化３周，经不同浓度蔗糖预培养及藻酸钠包埋后，在无菌空气中干燥脱水４ｈ直接投入液氮，化冻后茎尖存活率达７０％以上。通过选择材料的生理状态可缩短和简化保存过程。

苹果砧木玻璃化过程中内源激素的含量变化

用ＨＰＬＣ方法测定了苹果砧木茎尖培养苗玻璃化过程中内源激素的含量变化。结果表明，玻璃化苗叶片及茎尖中赤霉素（ＧＡ３）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）、脱落酸（ＡＢＡ）含量极显著降低，同时细胞分裂素（ＣＴＫ）含量则显著上升，在茎叶极度玻璃化时ＣＴＫ含量显著下降。在继代培养过程中，叶片玻璃化症状出现之前５～１０天，已开始了ＧＡ３、ＩＡＡ的下降和ＣＴＫ的上升过程，ＧＡ３／ＣＴＫ、ＩＡＡ／ＣＴＡ比值也急剧下降。培养基高浓度６－苄基腺嘌呤（６－ＢＡ）能引起叶片ＧＡ３、ＩＡＡ含量下降及玻化出现，表明苹果砧木茎尖培养玻化现象与ＧＡ３、ＩＡＡ、ＡＢＡ及ＣＴＫ含量及比值的急剧变化有关。

矮砧及乔砧苹果树嫁接口的解剖观察

苹果栽培品种秋富１与Ｍ７、Ｍ２６、八棱海棠３种砧木“Ｔ”形芽接１、２年生苗的嫁接口部位徒手切片显微镜观察，结果表明，砧木、接芽产生的大量愈伤组织，有不同方向、不同程度的分化，沿砧木和接芽的原有形成层逐渐分化产生新的形成层，使砧术与接穗维管组织连通；接口附近及过渡区域内各种组织均表现异常，维管分子及纤维细胞短、粗、弯曲，上下排列不同轴，射线细胞所占比例大，伸长较短，直径大；矮化砧Ｍ２６的嫁接口内愈伤组织细胞层数最多，导管不同轴程度最高；乔化砧八棱海棠的嫁接口内愈伤组织细胞层数最少，导管不同轴程度较轻；半矮化砧Ｍ７介于二者之间。

果树花粉的超低温保存

将苹果、梨、桃、李和樱桃等树种的39个品种的花粉干燥至含水量10%～20%,直接投入液氮中(-196℃),经过一段时间保存后,再以40℃水浴快速化冻1min,然后鉴定其生活力和萌发力.结果表明,花粉的生活力没有明显变化,其离体萌发率与新鲜花粉相近.新鲜花粉含水量在60%左右,不宜用于液氮保存.花粉含水量是影响保存效果的关键因子之一,只要花粉含水量适宜,可以多次反复冷冻—化冻,生活力不受影响.此项技术可用于果树花粉的长期保存.

脱毒对苹果苗木和砧木的过氧化物酶、硝酸还原酶及蛋白质、氨基酸含量的影响

对王林、乔纳金、长富２、秋富１、Ｍ７、Ｍ２６六个苹果品种及砧木的脱毒与未脱毒苗木进行测定，结果显示，脱毒后成叶中过氧化物酶活性显著降低。王林、长富２的脱毒苗成叶内硝酸还原酶活性比对照极显著增强。王林、乔纳金、长富２三品种脱毒苗成叶中蛋白质及氨基酸含量显著降低，幼叶及嫩梢皮层中蛋白质含量显著增高。脱毒后，三个品种成叶组织提取液褐变度明显降低。

不同处理对无病毒葡萄离体叶片遗传转化的影响

本研究利用无核白、红地球、黑王和红宝石这4个无病毒葡萄试管苗的叶片为外植体,在NN69培养基上获得了稳定高频率的再生植株,并对抗生素浓度、根癌农杆菌不同活化方法、葡萄叶片不同叶位、切割叶片时的不同液体、聚乙烯吡咯烷酮(酚类吸附剂)和维生素C(抗氧化剂)对葡萄叶片遗传转化的影响进行了研究。结果表明,葡萄叶片对卡那霉素敏感,并因不同品种而稍有差异;叶片不同叶位中以取顶端第一幼叶时转化效率最高;根癌农杆菌活化方法中以活化18h后,添加等体积新鲜LB培养基,再培养5h时转化效率最高;聚乙烯吡咯烷酮和维生素C对遗传转化不但没有明显的促进作用,而且明显抑制叶片的再生率。

热激和低温处理对辣椒2n花粉产量的影响

植物自发２ｎ配子在育种中应用的优势逐渐被育种者重视，２ｎ配子的发生受基因型、环境条件和诱变因子的影响，减数分裂基因突变在许多种植物中都有发生，甚至有的基因已经被分离出来。环境及诱变因子对２ｎ配子的发生也起有重要作用，许多研究者曾试验以各种诱变因子诱导...

核果类果树苹果褪绿叶斑病毒的研究

１９９６和１９９７年春天，利用ＰＡＳ—ＥＬＩＳＡ检测方法，对昌黎等地区１９个品种２６２株桃树，３个品种４２株李树和３个品种１４株甜樱桃树的苹果褪绿叶斑病毒进行了检测，结果表明，桃树总感染株率高达６０．３％；李树和甜樱桃的感染率分别为７１．４％和４７．１％。不同品种之间感染株率存在着明显差异。

SH系苹果矮化砧茎尖组培快繁技术研究

从１９８７年开始，以ＳＨ系４个优系为试材，进行了ＳＨ系茎尖组培快繁技术研究。５年研究结果：①筛选出适合分化的１号培养基，有效分化率５０％以上；②４个ＳＨ系优系各自的继代培养基，经过２０～３０代继代培养，增殖倍数稳定在２．９～４之间，正常率９０％以上；③适合ＳＨ系４个优系的生根培养基Ｒ７，生根率９５％以上。此外还改进了传统的外移技术，使外移成活率达８０％以上。

核果矮缩病毒的生物学检测研究

核果矮缩病毒(Prune dwarf virus,PDV)是核果类果树的一种重要病原,在世界各地广泛分布,经花粉快速传播,可引起多种病害。1996年,我国陕西省利用国外生产的PDV等检测试剂盒,首次报道PDV在甜樱桃上普遍存在,带毒株率达90％,但未进行生物学检测。作者在昌黎地区进行核果类果树病毒(苹果褪绿叶斑、核果矮缩和核果坏死环斑病毒等)病调查时,也发现有的甜樱桃树表现矮化、早春叶片褪绿斑、皱缩、褪绿环斑等症状,与国外报道的核果矮缩病毒的症状极为相似。

葡萄叶片植株再生及GFLV-CP基因的转化

利用无核白和黑王等12个品种的无病毒葡萄试管苗叶片为外植体,在NN69培养基(N itsch and N itsch 1969)试验了不同浓度的IBA和BA对其植株再生的影响。其中无核白、黑王、红地球和红宝石4个品种获得了稳定高频率的再生植株。以GUS基因为报告基因,通过根癌农杆菌介导,建立了葡萄离体叶片外源基因的遗传转化体系,而后将葡萄扇叶病毒外壳蛋白(GFLV-CP)基因转入葡萄叶片,通过卡那霉素筛选和PCR检测证明获得了转葡萄扇叶病毒外壳蛋白(GFLV-CP)基因的无核白葡萄植株。

苹果品种资源2n花粉普查

本试验对苹果属６３个品种或类型小孢子母细胞减数分裂四分体时期进行观察，发现有３８个品种或类型四分体时期存在异常分裂相，出现二分体或三分体；同一品种或类型的不同花朵以及同一花朵的不同花药间二分体百分率差异不显著，对９９个品种或类型的花粉粒观察发现，８９个二倍体品种或类型中，有３３个存在２ｎ花粉粒，占品种总数的３７％，其中１６个２ｎ花粉百分率大于０．０４％。

苹果茎痘病毒病原学研究初报

对从苹果上获得的苹果茎痘病毒的分离物ASPV—MX进行了研究 ,人工接种 4科 13种草本指示植物 ,发现ASPV—MV易由汁液摩擦接种 ,能侵染一种藜 (Chenopodiummurale)、西方烟 (Nicotianaoccidentalis - 37B)、西方烟亚种 (Nicotianaoccidentalissubsp‘obligua’)、鸡冠 (Celosiacristata)、千日红 (Gomphrenaglobosa) ,尤其在西方烟及西方烟亚种上症状明显 ,这 2个西方烟可以作为ASPV的鉴别寄主和繁殖寄主 ,在这 2种烟草的接种叶上均产生坏死枯斑 ,在西方烟的系统叶上主要产生明脉现象 ,而在西方烟亚种上的系统叶上产生线纹坏死。通过试验测得ASPV的致死温度为 6 2℃ ,稀释限点为 1× 10 -2 ,体外存活期为室温约 2 4h。

用离体微嫁接法快速检测苹果潜隐病毒

用离体微嫁接法同时检测了苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒。由于苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒 ,症状是在叶部表现黄斑 ,试管内不易观察 ,病毒检出率较低 ,检测带毒率分别为37.5%和 6 1 .1 % ,在检测苹果茎痘病毒上取得成功 ,检出率达 81 .3%以上。用木本指示植物跟踪检测了带毒品种 ,试验证明采用离体微嫁接法检测果树病毒比用木本指示植物检测所需时间短 。

北京地区葡萄扇叶病毒检测

采用酶联免疫吸附技术（ＥＬＩＳＡ）（Ａ－蛋白夹心法）对北京地区的葡萄品种进行扇叶病毒（ｆａｎｌｅａｆｖｉｒｕｓ）的测定。结果表明，北京地区葡萄品种普遍感染扇叶病毒且带毒情况较为严重。

Phytagel^R作为固化剂获得苹果叶片高频率植株再生

以昌红、红世界、红金和群红4个无病毒苹果无性系为试材,用PhytagelR代替琼脂作为固化剂,研究了N6、MS和NN69培养基上附加0.5 mg/L的IBA以及各培养基处理的不同培养方法对其离体叶片植株再生效率的影响。结果表明,NN69培养基优于MS和N6培养基,再生率最高可达到100%;IBA对植株再生有促进作用;暗培养有利于离体叶片植株再生。

无病毒苹果树的生长发育与栽培技术特点

无病毒苹果树的生长发育与栽培技术特点张建阁１张新忠１刘国俭１章德明１曾广娟２（１河北省农业科学院昌黎果树研究所０６６６００２河北省昌黎县农林局）病毒类病害导致苹果生长势衰弱，产量锐减，品质变劣，进入７０年代后，苹果的无毒化栽培已成为果树生产先进国家所...