黄芩苷改善肝纤维化动物模型的系统评价与Meta分析

目的:采用Meta分析方法,系统评价黄芩苷干预肝纤维化动物模型的疗效。方法:计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed和the Cochrane Library中关于黄芩苷治疗肝纤维化的动物实验[实验组采用黄芩苷干预;对照组采用0.9%氯化钠溶液或阳性药物(如水飞蓟素等)干预],检索时限均为建库至2022年11月18日。根据纳入、排除标准筛选文献,提取资料并采用SYRCLE动物实验偏倚风险评估工具对纳入研究进行质量评估,使用RevMan 5.4软件进行Meta分析。结果:最终纳入9项研究。Meta分析结果显示,在改善肝纤维化方面,黄芩苷组动物模型的透明质酸酶、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、羟脯氨酸和转化生长因子β1水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);黄芩苷组动物模型的肿瘤坏死因子α水平与对照组相比有明显降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);在改善肝功能方面,黄芩苷组动物模型的丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶和白蛋白水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但碱性磷酸酶水平与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芩苷对肝纤维化模型动物的肝纤维化相关指标和肝功能相关指标水平有明显的改善作用,该结果可为黄芩苷的临床研究提供支撑。

六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的Meta分析

目的:基于荟萃分析(Meta分析)方法,对六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的有效性进行系统评价。方法:计算机检索七个中英文数据库(中国知网,维普数据库,万方数据库,中国生物医学文献数据库,PubMed,Embase,Cochrane library),纳入六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的随机对照实验(观察组患者使用六味五灵片联合恩替卡韦,对照组患者使用恩替卡韦)。进行文献质量评估后,运用RevMan5.3软件进行数据分析。结果:最终纳入8篇文献,共计912例慢性乙型肝炎肝硬化患者。Meta分析结果显示:在谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)等肝功能指标、肝纤维化指标变化上,不同疗程的观察组均明显优于对照组(P<0.05);同时观察组总有效率、HBV DNA转阴率均明显高于对照组(P<0.05);观察组脾厚度较对照组显著降低(P<0.05)。当疗程≤6个月时,观察组可显著降低总胆红素(TBIL)水平(P<0.05),但两组患者血清白蛋白(ALB)、透明质酸酶(HA)水平差异无统计学意义(P>0.05)。当疗程>6个月时,观察组ALB、HA水平明显优于对照组(P<0.05),但两组患者TBIL水平差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者凝血酶原活动度(PTA)水平、HBeAg转阴率、门脉主干内径、门脉最大流速无明显差异(P>0.05)。结论:与单纯使用恩替卡韦治疗相比,六味五灵片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化临床疗效更优。

安络化纤丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的Meta分析更新

目的:评价安络化纤丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效。方法:计算机检索中国知识资源总库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库(Wang Fang Data)、维普数据库(VIP)、Pub Med、Embase、Cochrane Library等文献数据库,查找安络化纤丸联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝纤维化的随机对照试验。按照纳入排除标准进行文献筛选,资料提取,并对其进行质量评价,采用Rev Man5.3版软件进行Meta分析。结果:符合纳入标准的文献共有17篇,包括1388例患者。Meta分析结果表明安络化纤丸联合恩替卡韦在改善肝功能指标如谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)等方面及肝纤维化指标透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(IV-C)、层粘连蛋白(LN)、脾脏厚度等方面均有显著性差异。其中安络化纤丸联合恩替卡韦治疗还能改善HBVDNA转阴率。结论:安络化纤丸联合恩替卡韦治疗改善肝纤维化有效性优于对照组,且具有较高安全性,结果可为安络化纤丸治疗肝纤维化提供临床依据。

基于胆汁酸代谢组学探讨芍药苷改善α-萘异硫氰酸酯诱导胆汁淤积的作用机制

目的 基于胆汁酸代谢组学及分子生物学探讨芍药苷调控胆汁酸改善胆汁淤积的作用及机制。方法 雄性SD大鼠连续7 d ig熊去氧胆酸(ursodesoxycholic acid,UDCA)或芍药苷,于实验第4天ig α-萘异硫氰酸酯(α-naphthylisothiocyanate,ANIT)建立胆汁淤积模型。通过血清生化指标、肝脏病理组织染色、胆汁酸体积流量明确芍药苷缓解胆汁淤积的药效学基础。收集大鼠胆汁进行胆汁酸代谢组学分析,收集肝脏检测法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)和胆酸盐外排泵(bile salt export pump,BSEP)表达。结果 药效学实验显示,与对照组比较,模型组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)和直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)水平均显著升高(P<0.01);给予芍药苷后,上述指标显著降低(P<0.01),且呈剂量相关性。同时芍药苷能够改善大鼠肝组织水肿和炎性浸润,减少汇管区胆管增生,抑制肝细胞脂肪变性。胆汁酸代谢组学结果显示,与对照组比较,模型组牛磺胆酸(taurocholate acid,TCA)、牛磺α鼠胆酸(tauro-α-muricholic acid sodium,TαMCA)、胆酸(cholic acid,CA)、牛磺熊脱氧胆酸(tauroursodeoxycholicacid,TUDCA)、甘氨熊脱氧胆酸(glycoursodeoxycholicacid,GUDCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)、甘氨胆酸(glycocholic acid,GCA)、熊脱氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA-7S)、牛磺石胆酸(taurocholic acid,TLCA)、牛磺猪脱氧胆酸(taurohyodeoxycholic acid,THDCA)、甘氨猪胆酸(glycohyocholic acid,GHCA)、甘氨脱氧胆酸(glycodeoxycholic acid,GDCA)、甘氨猪脱氧胆酸(glycohyodeoxycholic acid,GHDCA)、甘氨石胆酸(glycolithocholic acid,GLCA)、熊胆酸(ursocholic acid,UCA)、牛磺脱氧胆酸(taurodeoxycholate acid,TDCA)含量明显降低(P<0.05、0.01),牛磺β鼠胆酸(tauro-β-muricholic acid sodium,TβMCA)含量显著升高(P<0.01);上述胆汁酸含量在芍药苷干预后明显回调(P<0.05、0.01)。分子生物学验证结果显示模型组大鼠肝组织FXR和BSEP的m RNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05、0.01),经芍药苷治疗后二者表达明显上调(P<0.05、0.01)。结论 芍药苷能够调节胆汁酸池组成,降低毒性胆汁酸含量,上调FXR和BSEP活性,恢复胆汁酸池稳态,改善ANIT诱导的胆汁淤积。

基于紧密连接通路探讨芍药苷改善胆汁淤积的作用机制

目的基于蛋白组学和实验验证探讨芍药苷通过紧密连接通路改善胆汁淤积的作用。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、熊去氧胆酸(60 mg/kg)组和芍药苷高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组,每组8只。连续7 d ig相应药物,于第4天给药2 h后igα-萘异硫氰酸酯(60 mg/kg)诱导肝内胆汁淤积大鼠模型。末次给药后,采用试剂盒测定大鼠血清中肝功能指标;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏组织病理变化;蛋白组学及生物信息学技术筛选芍药苷改善胆汁淤积的关键通路;分子对接确定芍药苷与相关靶点的结合能;qRT-PCR和Western blotting验证大鼠肝组织中关键靶点闭锁小带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、密封蛋白1/2/3(Claudin 1/2/3)和连接黏附分子-A(junctional adhesion molecule-A,JAM-A)的表达。结果药效学结果显示,与对照组比较,模型组大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)活性及总胆汁酸(total bile acid,TBA)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)水平均显著升高(P<0.01),肝组织可见大量炎性细胞浸润,伴随着肝细胞变性坏死,而经芍药苷治疗后上述指标得到显著改善(P<0.05、0.01)。蛋白组学结果表明芍药苷主要通过凋亡途径、免疫炎症过程、代谢通路、细胞周期通路、胆汁酸分泌通路与紧密连接通路等发挥改善胆汁淤积的作用。选择紧密连接通路进行验证,验证结果表明,与对照组比较,模型组大鼠肝组织ZO-1、Occludin、Claudin 1、Claudin 2、Claudin 3和JAM-A mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),ZO-1、Occludin和Claudin 3蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),经芍药苷干预后以上紧密连接通路相关蛋白及基因表达显著升高(P<0.05、0.01)。结论芍药苷可以多途径、多靶点缓解大鼠胆汁淤积,是治疗胆汁淤积的潜在药物,紧密连接通路可能是芍药苷改善胆汁淤积的关键通路。

芍药苷通过调控肠道菌群改善α-异硫氰酸酯诱导胆汁淤积大鼠的作用机制研究

目的确证芍药苷对α-异硫氰酸酯(α-isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠的药效作用,通过16S rRNA技术探究芍药苷对肠道菌群的调节作用机制。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组及芍药苷高、中、低剂量(200、100、50mg/kg)组和熊去氧胆酸(60 mg/kg)组,每组10只。给予药物干预7 d,第4天ig ANIT(60 mg/kg)诱导胆汁淤积模型。测定胆汁体积流量;检测血清中血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)活性及总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理变化;收集大鼠肠内容物进行肠道菌群测序,探索芍药苷对肠道菌群的影响。结果与模型组比较,芍药苷有效改善胆汁体积流量(P<0.05),显著下调大鼠血清中肝功能指标AST、ALT、γ-GT活性及胆汁淤积指标TBIL、DBIL、TBA水平(P<0.01),改善肝细胞损伤。肠道菌群测序结果可知,芍药苷显著上调厚壁菌门与拟杆菌门比值及异杆菌属Allobaculum、布劳特氏菌属Blautia丰度(P<0.05),降低颤螺菌属Oscillospira、瘤胃球菌属Ruminococcus丰度(P<0.05、0.01)。结论芍药苷可能通过改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠肠道菌群失调,从而发挥对胆汁淤积肝损伤的改善作用。