多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症儿童与成人患者临床特点比较

目的比较儿童和成人多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MADD)患者的临床和实验室检查特点。方法对12例儿童和19例成人MADD患者进行常规实验室检查、血酰基肉碱谱及尿有机酸分析。对中国人电子转运黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)基因常见突变A84T通过DNA测序方法进行筛检。结果儿童MADD患者临床表现高度异质,可表现为肌无力、肝大、低酮性低血糖、肥厚性心肌病或脑发育不良及脱髓鞘病变;而成人患者均以肌无力起病。成人和儿童MADD有肝酶和CK升高,血多种酰基肉碱升高,多数伴有二羧酸尿。儿童组3例死亡,成人组全部存活。存活患者的症状和生化指标治疗后好转或正常。A84T突变在儿童和成人患者的发生率分别为20.8%(5/24)和21%(8/38)。结论儿童与成人MADD患者的临床表现和预后存在差异,成人患者预后好;A84T突变可能与轻型相关。[临床儿科杂志,2012,30(5):446-449]

他汀类药物治疗肝硬化的时代已经来临?

他汀类药物是羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的抑制剂,具有降低血液低密度脂蛋白胆固醇的作用,目前已作为心血管疾病一级和二级预防的常规用药。近年来,实验性和观察性研究证实他汀类药物除了降血脂外还有其他作用,其中包括阻止肝病进展和延缓肝硬化失代偿的发生。从作用机制的角度来看,辛伐他汀通过增强内皮细胞一氧化氮（NO）合酶的表达和活性,进而提高肝硬化时血液循环中NO的利用度.

应用454测序技术评价非酒精性脂肪性肝病患者肠道菌群结构差异

目的阐明非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者肠道菌群结构特征。方法采用454焦磷酸测序技术,对47例经＂肝活检＂确诊的NAFLD患者和34例健康人新鲜粪便样品16S DNA V3-V5可变区进行测序,通过序列比较及操作分类单元（OTU）划分评价肠道菌群结构差异。结果 NAFLD患者OTUs为（88.32±28.27）,显著低于健康人[（109.65±30.65）,P〈0.01];在＂门＂水平,NAFLD患者厚壁菌门所占比例为（51.2±17.8）%,显著高于健康人的[（46.4±12.8）%,P=0.048],而拟杆菌门为（31.6±18.9）%,显著低于健康人的[（43.3±14.4）%,P〈0.001];在＂纲＂水平上,NAFLD组Erysipelotrichi纲占（3.2±5.1）%,显著高于健康人的[（1.0±1.2）%,P=0.009],而Bacteroidia纲占（31.0±18.8）%,显著低于对照组的[（42.3±14.0）%,P=0.004];在＂属＂水平上,NAFLD组乳球菌占（0.0038±0.0001）%,低于健康组的[（0.0145±0.001）%,P=0.003],普氏菌属也同样显著减少（P=0.022）,而链球菌（Streptococcus）在NAFLD占（1.50±0.03）%,显著高于对照组的[（0.21±0.24）%,P=0.004]。结论 NAFLD患者肠道菌群多样性减少,存在构成显著异常,是致病因素抑或其后果仍有待于进一步研究。

Fibroscan检测肝脏受控衰减参数的重复性研究

目的评价Fibroscan检测肝脏受控衰减参数（CAP值）在不同操作者间的可重复性,以及诊断脂肪肝的一致性。方法 5位不同经验的操作者,分别测量7例受检者（健康志愿者、脂肪肝或其他疾病患者）,比较不同操作者检测CAP值的差异,运用组内相关系数（intraclass correlation coefficient,ICC）和肯德尔和谐系数分析来评价重复性和一致性。结果 5位操作者检测CAP值的ICC为0.959（95%CI：0.880-0.992）,经验丰富的操作者重复性（ICC=0.913）与经验较少者（ICC=0.876,P=0.36）均具有良好的重复性;依据CAP值评估脂肪肝等级的肯德尔和谐系数为0.715,具有较好的一致性（P=0.002）。结论运用Fibroscan技术检测肝脏CAP值在不同操作者间总体重复性和一致性较好。

进食对Fibroscan检测肝脏受控衰减参数的影响

目的探讨进食对Fibroscan检测肝脏受控衰减参数(CAP值)及其诊断脂肪肝的影响。方法使用Fibroscan测量10例志愿者【7名健康人和3名经B超诊断的脂肪肝患者,平均年龄29岁(21~39)岁;体质指数为(19.83~29.70)kg/m^2,平均为(22.7±3.13)kg/m^2)】空腹(CAP0)、进食后30 min(CAP30)、120 min(CAP120)和次日空腹(CAP02)肝脏CAP值的差异,并比较空腹与进食后CAP值诊断脂肪肝的准确性。结果受检者CAP0、CAP30、CAP120和CAP02分别为(227.8±59.5)d B/m、(244.9±42.1)d B/m、(241.1±51.4)d B/m和(245.7±49.4)d B/m,差异无统计学意义(H=0.62,P=0.89);空腹(空腹和次日空腹)与餐后(餐后30 min和120 min)CAP值差值比较,差异也无统计学意义(Z=-1.37,P=0.17),但空腹与餐后检测诊断脂肪肝的误诊率分别为5%和15%(x^2=0.28,P=0.59)。结论进食对Fibroscan检测CAP值的结果影响不显著,但或可增加诊断脂肪肝的误诊率。

肝硬化患者血脂异常分析

目的分析不同病因和不同Child-Pugh分级的肝硬化患者血脂水平和血脂异常类型。方法2013年1月~2017年12月我科住院的448例肝硬化患者,其中乙型肝炎194例,丙型肝炎20例,酒精性46例,病毒与酒精性41例,隐源性85例,自身免疫性肝炎33例,NAFLD相关10例和血吸虫病19例。回顾性分析血脂指标,包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A(APOA)、载脂蛋白B(APOB)。结果在448例肝硬化患者中,221例(49.3%)存在血脂异常,其中低HDL血症207例(93.7%),混合型高脂血症1例(0.5%);186例Child A级患者血TC水平为(3.8±0.9)mmol/L,显著高于183例B级【(3.4±1.3)mmol/L,P<0.01】,或79例C级【(3.1±1.3)mmol/L,P<0.01】;A级TG为(1.1±0.6)mmol/L,显著高于B级【(0.9±0.5)mmol/L,P<0.01】,或C级【(0.9±0.5)mmol/L,P<0.01】;A组HDL为(1.3±0.4)mmol/L,显著高于B级【(1.1±0.4)mmol/L,P<0.01】,或C级【(0.8±0.4)mmol/L,P<0.01】;A级LDL为(2.1±0.6)mmol/L,显著高于B级【(1.8±0.9)mmol/L,P<0.01】,或C级【(1.7±0.8)mmol/L,P<0.01】;A级APOA为(1.1±0.3)mmol/L,显著高于B级【(0.9±0.3)mmol/L,P<0.01】,或C级【(0.8±1.3)mmol/L,P<0.01】;A级APOB为(0.7±0.2)mmol/L,显著高于B级【(0.6±0.3)mmol/L,P<0.01】;随着Child-Pugh分级变差,血脂异常率显著升高,三组分别为32.3%、52.5%和82.3%(P<0.01);NAFLD和丙型肝炎肝硬化患者血脂异常率最高,均为60%,而乙型肝炎肝硬化患者血脂异常率相对较低,为43.8%。结论肝硬化患者血脂异常以低HDL血症最常见,且随着Child-Pugh分级变差而显著升高。NAFLD和丙型肝炎肝硬化患者最容易出现血脂异常,值得关注。

一种高效廉价的H.pylori根除方案——左氧氟沙星、甲硝唑铋剂四联疗法

目的分析奥美拉唑+左氧氟沙星+甲硝唑铋剂四联方案在治疗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)感染的有效性和经济性。方法收集上海交通大学医学院附属新华医院2015年1月至2017年5月行H. pylori根除治疗且治疗后行13C呼气试验复查的患者共622例,其中左氧氟沙星+甲硝唑铋剂四联组442例,阿莫西林+克拉霉素铋剂四联组11例,阿莫西林+左氧氟沙星铋剂四联组21例,阿莫西林+甲硝唑铋剂四联组11例,左氧氟沙星三联组137例,比较各组方案的H. pylori根除率及成本-效益比。结果 5个治疗组的根除率分别为91. 18%、72. 73%、76. 19%、90. 91%、81. 02%,左氧氟沙星+甲硝唑铋剂四联方案根除率优于其他多数铋剂四联方案,且明显优于左氧氟沙星三联方案。在几个方案的成本-效益比比较中,左氧氟沙星+甲硝唑铋剂四联方案成本-效益比较低(2. 33)。结论左氧氟沙星+甲硝唑铋剂四联方案在H. pylori初治患者中可达到满意的根除率,且成本-效益比低,是经济、有效的新抗生素组合。

健康体检成人FibroScan检测肝脏硬度值与受控衰减参数的相关分析

目的探讨普通人群肝脏硬度测量值(LSM)与受控衰减参数(CAP)之间的关联,为临床研究提供参考。方法在207例成功进行FibroScan检查的健康体检者,获取性别、年龄、体质量指数(BMI)和腰高比(WHtR)资料,分析其LSM和CAP的相关性。结果不同年龄人群LSM的差异无统计学意义,但在BMI≥24 kg/㎡的受试者,其LSM和CAP值分别为(4.60±1.15)kPa和(245.24±55.37)dB/m,均显著高于BMI<24 kg/㎡的受试者[(4.25±1.23)kPa和(215.82±55.47)dB/m,P<0.001];WHtR≥0.50的受试者LSM和CAP分别为(4.52±1.22)kPa和(247.04±57.78)dB/m,亦均高于WHtR<0.50的受试者[(4.19±1.15)kPa和(204.65±52.25)dB/m,P<0.05];男性受试者LSM和CAP值亦均高于女性受试者[(4.53±1.23)kPa和(4.11±1.08)dB/m对(4.11±1.08)kPa和(220.08±57.88)dB/m,P<0.05];年龄≥50岁的受试者CAP值[(246.56±59.06)dB/m]高于年龄<50岁的受试者[(222.88±56.60)dB/m];LSM与CAP值呈显著性正相关(r=0.26,P=0.0002);进一步对各组人群分析发现,在BMI≥24 kg/㎡、WHtR>0.50、男性受试者和年龄≥50岁的受试者中,LSM与CAP值呈显著性正相关(P<0.05),其中在BMI≥24 kg/㎡组人群,两者呈非常显著性正相关(r=0.37,P<0.01);通过相关分析发现,LSM和CAP均与BMI、WHtR和性别相关(P<0.05);通过偏相关分析发现,LSM与CAP参数之间呈显著性正相关(r=0.20,P=0.0045);在体质量指数≥24 kg/㎡的超重或肥胖的受试者中,肝脏硬度值和受控衰减参数的相关性更强(r=0.37,P=0.0003)。结论普通人群LSM与CAP均受BMI、WHtR和性别的影响,并且两个参数之间表现出一定的正相关,其相关存在的确切原因有待于进一步研究。

普通人群肝脏受控衰减参数的多元回归分析

目的探讨影响普通人群肝脏受控衰减参数的相关因素。方法使用FibroScan○R-520诊断仪检测208例健康体检者肝脏受控衰减参数(CAP值),同时获取受试者的主要生化指标和性别、年龄、体质量指数、腰高比、腰臀比,对其进行多元线性回归分析和偏最小二乘回归分析,建立回归方程。结果多元线性回归分析显示,CAP值与体质量指数、腰臀比和年龄呈显著性相关,其标准回归系数分别为:体质量指数,β=0.2538,P=0.0007;腰臀比,β=0.1781,P=0.0158;年龄,β=0.1935,P=0.0022;通过多元回归分析和偏最小二乘回归建立的模型分别为:CAP=-137.70+9.40×甘油三脂+5.40×体质量指数+176.34×腰臀比+1.60×年龄,改良的CAP=-135.23+11.57×甘油三脂+4.82×体质量指数+212.81×腰臀比+1.12×年龄。结论普通人群CAP正常值范围受体质量指数、腰臀比和年龄的影响,改良的回归模型能更好地反映肝脏CAP值。

ALDH2 rs671基因多态性与非酒精性脂肪性肝病相关性研究

目的研究乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因rs671多态性与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病的相关性。方法在120例研究对象,行肝脏硬度和受控衰减参数(CAP)及血ALDH2 rs671多态性检测,采用非条件Logistic回归控制混杂因素,计算比值比(OR)及其95%可信区间(CI),判断基因多态性与NAFLD患病的相对风险度。结果根据CAP检测结果发现脂肪肝73例,无脂肪肝人群47例;脂肪肝组和无脂肪肝组ALDH2 rs671基因GA/AA型比例分别为52.1%和34.0%(P<0.05);女性和超重人群中脂肪肝组GA/AA型比例分别为48.8%和53.3%,显著高于无脂肪肝组的22.2%和23.1%(P<0.05);GA/AA型者脂肪肝患病风险升高3.756倍,其体质量、臀围、腰高比超标比例显著高于GG型者(P<0.05),血清GGT水平为(55.57±99.97)U/L,显著高于GG型者[(38.17±48.02)U/L,P<0.05]。结论ALDH2 rs671突变可增加NAFLD的患病风险,其发病机制和防治措施还需要进一步研究。

人环状RNA-0046366与肝细胞脂肪变性的相关性及其机制研究

目的探讨人环状RNA-0046366(circRNA-0046366)表达变化对肝细胞脂肪变性的影响及其机制。方法将肝Hep G2细胞株随机分为正常对照组(n=3)和脂肪变性模型组(n=3),分别给予高糖DMEM、高脂培养基(油酸∶棕榈酸=2∶1,0.5 mmol/L)诱导24 h。采用油红O染色及甘油三酯(Triglyceride,TG)、丙二醛(Malonyldialdehyde,MDA)检测,观察肝细胞的脂肪变性及脂质过氧化。以实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测circRNA-0046366在脂肪变性前后的表达改变。在circ Base数据库搜索、circRNA-miRNA互补序列分析的基础上,预测circRNA-0046366的靶miRNA及其下游基因。通过Spearman相关性分析,揭示circRNA-0046366水平与靶miRNA表达、下游mRNA表达、肝细胞脂肪变性及脂质过氧化指标的相关性。结果与正常对照组相比,脂肪变性模型组的肝细胞内脂滴、TG[(24.4±2.4)μmol/g vs(263.7±17.5)μmol/g,P<0.05]及MDA[(0.6±0.1)μmol/g vs(1.8±0.2)μmol/g,P<0.05]含量明显升高。circRNA-0046366表达水平在脂肪变性的肝细胞中则显著降低(P<0.05)。circRNA-0046366可与过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptorα,PPARα)竞争性结合miR-34a,从而阻断miR-34a对PPARα翻译抑制作用。相关性分析显示,肝细胞的circRNA-0046366与PPARα表达水平呈显著正相关(r=0.78,P<0.05),与miR-34a表达水平(r=-0.83,P<0.05)、TG(r=-0.72,P<0.05)及MDA(r=-0.69,P<0.05)含量则呈显著负相关。结论肝细胞的circRNA-0046366水平与脂肪变性及脂质过氧化呈负相关。其机制可能与靶向结合miR-34a,从而解除PPARα的表达抑制相关。

乙醛脱氢酶2基因多态性在人群中的分布特点及其与肝脏生化学及脂质代谢之间的关系

目的探讨乙醛脱氢酶2基因(ALDH2)多态性在人群中的分布特点及其与肝脏生化学及脂质代谢之间的关系。方法选取非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者237例及健康对照者433例,收集研究对象一般信息、生化指标及腹部超声检查结果,并采用PCR法进行ALDH2基因rs671多态性的检测。结果 670例研究对象中,ALDH2野生型(GG型)439例,ALDH2突变型(GA+AA型)231例。GG型研究对象谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆红素及清蛋白高于GA/AA型(均P<0.05)。与GA/AA基因型相比,GG型研究对象三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇水平更高。结论 ALDH2 GG基因型人群更容易出现GGT的升高及血脂代谢紊乱,需重视不同基因型人群的临床转归。

尼曼-匹克病C型一家系基因突变分析及产前基因诊断

目的 研究1例临床疑诊尼曼-匹克病C型（Niemann-Pick disease type C,NPC）先证者的基因诊断,以及其家系的产前基因诊断.方法 采用DNA抽提试剂盒提取先证者（NPC晚发婴儿型）和其父母外周血白细胞基因组DNA,采用聚合酶链反应-直接测序法进行NPC1基因突变检测.测序结果与GenBank人类NPC1基因（NM 000271）进行比较,突变外显子片段均行DNA双向测序证实.同时选取50例正常人作为对照,通过直接测序法以排除新错义突变为基因多态性.采用ClustalX 1.81分析软件对人类和其他种属的NPC1氨基酸序列进行同源性比较.在先证者母亲再次妊娠18周时抽取羊水细胞,对培养后羊水细胞进行相应的基因突变检测,用于产前基因诊断.抽取新生儿外周血白细胞基因组DNA进行NPC1基因分析.结果 NPC1基因测序发现先证者携带2个新杂合突变c.2284-2287 delCTCT和p.V959G,分别来源于父亲和母亲,50例正常人中未发现这2种突变.通过ClustalX 1.81软件比对人、小鼠、大鼠、兔、猫及猪的NPC1蛋白的氨基酸发现,p.V959为中度保守氨基酸区域,此位点氨基酸错义突变p.V959G可能导致NPC蛋白功能异常.胎儿羊水直接抽提基因组DNA及培养后羊水细胞DNA检测均未发现这2种突变,为正常胎儿.新生儿外周血白细胞的NPC1基因分析未发现携带c.2284-2287 delCTCT和p.V959G突变,与产前基因诊断结果相符.结论 聚合酶链反应-直接测序法可为NPC先证者进行基因诊断,也可为其家系进行产前基因诊断,p.V959突变可能与晚期婴儿型临床表型相关.

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症11例的临床和ACADVL基因突变谱分析

目的 探讨极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（VLCADD）的临床表现,实验室检查特点以及基因型与表型的相关性.方法 对2006年9月至2014年5月在上海新华医院儿科就诊的11例极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症的临床表现、实验室检查、基因型、诊治和预后等进行分析.11例患儿中男9例、女2例,就诊年龄2d～17岁,诊断主要依靠血串联质谱和基因分析结合临床及其他检查.结果 11例均有血十四烯酰基肉碱（C14∶1）特异性升高.6例为新生儿早发型,3例为婴儿型,2例为成人迟发型.其中4例新生儿早发型和2例婴儿型在生后2～8个月死亡,目前存活的2例新生儿早发型患儿均通过新生儿疾病筛查得以早期诊断和治疗.11例中共检出17种ACADVL基因突变,检出率95.45％（21/22）,包括11种已知突变（p.S22X,p.G43D,p.A213T,p.C215R,p.G222R,p.W427X,p.R450H,p.R456H,p.R511Q,c.296-297delCA,c.1605＋ 1G＞T）和6种新突变（p.S72F,p.Q100X,p.M437T,p.D466Y,c.1315delG insAC,IVS7 ＋4 A＞G）.p.R450H检出率最高,占总突变的13.63％ （3/22）,其次为S22X和D466Y突变,各占9.09％（2/22）.结论 11例VLCADD患儿的ACADVL基因突变谱具有高度异质性,新生儿型和婴儿型较成人迟发型患者死亡率高,提示基因型和表型间存在一定相关性.早期的诊断和治疗对患者的预后有重要意义.

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症研究进展

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症是一种较罕见的脂肪酸代谢障碍疾病，根据起病年龄和临床表现分为三型：心肌病型、肝型、肌病型。心肌病型病情重，病死率高。临床诊断可通过血串联质谱（MS／MS）检测血肉豆蔻烯酰基肉碱（C14：1）水平进行，进一步确诊可通过基因诊断、酶学分析及脂肪酸氧化流量分析。治疗上主要包括避免空腹，减少长链脂肪酸的摄入，补充中链甘油三酯等。