检测活性氧的荧光探针新进展

活性氧对于人体是十分重要的。然而,过量的活性氧是相当有害的,它们会对人体产生氧化损伤,导致细胞死亡。活性氧现在已经引起了化学、生物、医药等多个领域学者的浓厚兴趣,它们被认为和多种病理条件有密切的联系。由于活性氧寿命短、反应活性高,并且大部分都存在于体内很难被捕获,因此它们的分析测定是一项国际性难题。荧光探针作为活性氧的高灵敏的检测分析物,已经得到越来越广泛和深入的研究。由于每一种活性氧都有它独特的生理学活性,因此设计高选择性的,能够检测具体一种活性氧的荧光探针分子就显得十分重要。本文主要对近三年来检测单线态氧、过氧化氢、超氧阴离子和羟自由基这四种活性氧的荧光探针的研究进展进行综述,关注这类荧光探针的检测机理以及具体应用。

α-山竹黄酮与β-环糊精包合作用

目的研究α-山竹黄酮与β-环糊精的包合作用。方法制备了α-山竹黄酮与β-环糊精的包合物,用紫外分光光度法测定了包合物的溶解度和表观稳定常数。利用紫外和红外吸收光谱、差示扫描量热分析等测试方法对α-山竹黄酮与β-环糊精的包合物进行了表征。通过热力学实验获得了包合反应的热力学函数ΔG,ΔH和ΔS。结果α-山竹黄酮与β-环糊精能形成稳定的包合物,包合比为1∶2,表观包合稳定常数为7.6×104L2/mol2。结论加入β-环糊精后,α-山竹黄酮的溶解度和热稳定性都得到明显提高。包合反应主要由焓变控制,驱动力为范德华力。

微波溶样-电感耦合等离子体质谱法测定婴幼儿配方奶粉中钼和硒

探讨微波溶样—电感耦合等离子体质谱法测定婴幼儿配方奶粉硒、钼的方法。标准溶液配制中加入1%甲醇,微波消解过程中加入0.5 mL质量浓度5 mg/L的Ni和Te溶液作为内标,测定过程中使用NH3消除基体干扰。结果:微波溶样—电感耦合等离子体质谱法测定婴幼儿配方奶粉硒、钼,相对标准偏差分别为1.4%～2.1%和0.3%～1.0%,方法检出限可以达到为3μg/kg和1μg/kg;回收率99%～102%之间。该方法有良好的精密度和准确度,消解彻底,加人试剂少,空白值低,提高了方法的检出限。

电感耦合等离子体质谱直接进样测定奶粉中碘质量浓度

建立了一种快速测定奶粉中碘的方法,称取一定量奶粉样品用质量分数为0.5%乳化剂和10%氨水的混合溶液定容混匀,在线加入Te元素作为内标,使用ICP-MS直接测定,减少了复杂的前处理环节。通过对国家标准物质GBW 10017奶粉的多次测定考察了方法检出限,准确性,加标回收率等指标,同时进行此使用此方法对实际样品进行测定并与国标方法进行方法比对,以上指标和测定结果均能满足实际检测的需要。经过了实验室间比对和大批次长时间的测定的实践,该方法可以作为企业生产中的实时监控手段,有很强的实用价值。

商品化酪蛋白磷酸肽中通用型标记肽的筛选及其在婴幼儿配方奶粉中应用

目的对4种常见的商品化酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides, CPP)的多肽组成迚行鉴定,筛选通用型标记肽,幵且应用于婴幼儿配方奶粉中CPP含量的定量检测。方法采用液相色谱-串联飞行时间质谱法对多肽迚行鉴定和筛选;采用同位素稀释液相色谱-串联质谱技术,建立婴幼儿配方奶粉中CPP含量的检测方法。结果所筛选获得的多肽VLPVPQK普遍存在于4种商品化CPP中,定量检测方法的标准曲线线性r2>0.99,平均回收率在99.0%～101.5%之间,批间精密度在3.8%～5.7%之间,方法精密度在2.0%～7.6%之间,符合检测要求。结论该通用型标记肽普遍适用于中国市场上常见的商品化酪蛋白磷酸肽,适合婴幼儿配方奶粉企业用于产品质量控制,方法简单高效,可应用于常规理化实验室。

元素分析-稳定同位素质谱同时测定δ^(13)C/δ^(15)N在原料乳粉检验中的应用

建立了元素分析-稳定同位素质谱(EA-IRMS)同时测定原料奶粉中δ13 C/δ15 N的检测方法。该方法稳定性(标准偏差):参考气体δ13 C<0.02‰/δ15 N<0.04‰、实际样品δ13C<0.18‰/δ15 N<0.06‰;线性(斜率):参考气体δ13 C<0.04/δ15 N<0.01,实际样品δ13C<0.04/δ15 N<0.01,长期稳定性能满足以上指标。对来源各异的原料乳粉(含半成品原料、牛初乳粉)持续性的检测结果表明,多种原料乳粉均有各自稳定且差异性显著的δ13 C区间:新西兰(-26‰～-29‰)、澳大利亚(-26‰～-27‰)、美国(-16‰)、丹麦(-22‰～-24‰)、内蒙古(-25‰)、新疆/宁夏(-17‰～-22‰)。同时在半成品原料乳粉中,δ13C值在1段到3段呈现规律性变大的趋势,而δ15 N无明显变化,多集中在6‰～8‰这一区间。对部分原料乳粉中可能非法加入的,用以提高乳粉中氮含量的外源物质进行测定发现,常见化工类高氮化合物如尿素、三聚氰胺δ15 N为负值,与原料奶粉及其他蛋白类高氮物有显著差异。将三聚氰胺作为添加物,按提高蛋白含量10%的比例加入某一原料乳粉中,经过此方法检测,发现其δ15 N从6.344‰降至5.660‰。EA-IRMS技术具有较好的稳定性和重现性,降低了操作难度和成本,可以应用到企业中作为监控原料乳粉来源和质量品质稳定性的方法。

改良QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中的13种镇静剂

建立了改良的QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱同时测定水产品中13种镇静剂类药物的分析方法。样品经氨化乙腈提取,增强型去除脂类基质吸附剂(Enhanced matrix removal-lipid,EMR-Lipid)净化,然后用高效液相色谱-串联质谱仪多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明,13种镇静剂在0.5~40μg/L浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.99,方法检出限为0.0103~0.1470μg/kg,定量限为0.0340~0.4850μg/kg。在3个不同添加水平下的平均回收率为70.7%~108.0%,RSD为1.4%~10.3%。本方法操作简单,灵敏度高,净化效果好,可用于水产品中13种镇静剂的快速分析。

超高效液相色谱-串联质谱法测定豆芽中恩诺沙星和环丙沙星

匀浆混匀的豆芽样品经磷酸盐缓冲溶液超声提取,提取液经HLB固相萃取小柱净化,甲醇洗脱。采用超高效液相色谱-串联质谱法测定恩诺沙星和环丙沙星的含量,以Agilent Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱为固定相,以不同体积比的甲醇和0.1%(体积分数)甲酸-2mmol·L^-1乙酸铵溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱,串联质谱分析中采用电喷雾正离子源和多反应监测模式。采用同位素内标法定量,恩诺沙星和环丙沙星的线性范围均为0.5~50.0μg·L^-1,检出限(3S/N)均为0.025μg·kg^-1。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率为89.2%~101%,测定值的相对标准偏差(n=6)为3.3%~9.2%。

基于食醋中乙醇的δ13C值对其真伪鉴别的应用初探

文章新建了液相色谱联用稳定同位素比率质谱(LC-IRMS)对食醋中乙醇δ13C值进行测定的方法。简述了仪器的运行过程,通过对色谱柱的选择,从出峰时间的角度考察了其他组分(糖、酸)对乙醇δ13C值测定的影响,使用蔗糖标准物质标定了高纯CO2参考气的δ13C值并考察了线性范围下的测定重复性。对16批次代表性样品进行测定,分析食醋、食醋沉淀物、食醋中乙醇三者间δ13C值的关系,乙醇的δ13C值基本在-28‰^-31‰,与其余二者的δ13C值范围有所差别,低于食醋的δ13C值,说明了在转化过程中发生了一部分的同位素损失;对市场上常见的多种酒精的δ13C值使用该分析方法进行测定,发现工业酒精、玉米食用酒精、淀粉酒精δ13C值在-10‰^-17‰,大米食用酒精在-29.1‰±1.2‰,高粱食用酒精在-17.6‰±1.3‰,其中仅有大米食用酒精的δ13C值与食醋中乙醇的δ13C值区间重合,其他均能轻易分辨出,通过测定食醋中乙醇的δ13C值或可起到真伪鉴别的作用。

改良QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法检测植物油中的10种植物生长调节剂

采用改良QuEChERS技术作为前处理方法,建立了植物油中10种植物生长调节剂(PGRs)的高效液相色谱-串联质谱快速检测方法。样品用酸化乙腈提取,经增强型基质去除吸附剂(EMR-Lipid)净化,然后用高效液相色谱-串联质谱仪多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明:方法线性范围1~100μg/L,10种PGRs线性关系良好,相关系数(r)为0.991~0.998;检出限为0.014~0.188μg/kg,定量限为0.048~0.625μg/kg;10种PGRs的回收率在70.2%~94.7%之间,RSD为1.2%~10.2%。该方法准确、快速、重复性好,适用于植物油中植物生长调节剂的测定。

榴莲冻肉中污染微生物的分离鉴定和低温存活时间研究

建立榴莲冻肉食品的污染微生物分离鉴定方法,研究该类微生物低温保存条件。污染菌经传统的生物梅里埃生化鉴定结合基质辅助激光解析电离时间飞行质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,并通过对其低温耐受性研究。鉴定结果为50株菌株中10株为粘质沙雷氏菌,8株为阴沟肠杆菌,32株为明串珠菌属,检出率(100%)高于传统生化法(76%)。它们在榴莲冻肉介质内-20℃冷冻存活耐受时间分别为4个月、8个月和超过12个月。2℃~8℃冷藏明串珠菌呈数量级增长。榴莲冻肉污染菌为粘质沙雷氏菌、阴沟肠杆菌和明串珠菌属,保存条件适合冷冻,不宜冷藏。同时验证了MALDI-TOF-MS进行食品微生物鉴定更简便、高效。

多元素含量和δ^(13)C值对食醋标签标识真实性的初步探索研究

研究建立电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)直接进样测定食醋中Cd,Cr,Cu,Mn,Zn,Sr,K,Na,Ca,Mg,Fe 11种元素含量的方法和电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)直接进样测定I元素含量的测定方法,并验证了直接进样方式下测定结果的准确性。采用ICP-OES、ICP-MS、稳定同位素比率质谱(IRMS)对食醋及原料中K,Na,Ca,Mg,Fe,Al,As,Cd,Cr,Cu,Mn,Zn,Sr,Ni,Pb,I 16种元素和δ13C值进行测定,通过系统的统计学方法对测定结果进行分析。发现原料大米中不同元素含量的差别无法传递给相应的食醋;原料焦糖色中元素的含量差异很大。针对于食醋成品:Mn和生产原料中的红曲、麸皮相关;Na的主要来源是外源添加的食用盐或含钠添加剂;K,Mg受原料大米和生产工艺的双重影响;Sr和Zn两元素或可成为产地溯源的辅助依据;δ13C值的变化与葡萄糖及焦糖色有关,但均在C3植物的δ13C值区间内。以上研究结果尚不能对食醋的真实性进行判别,仍需进一步深入研究。

电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定土壤中的锡

采用盐酸-高氯酸-氢氟酸消解体系消解土壤,利用电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）测定了土壤中锡的含量,结果表明,该方法检出限为0.005 mg·L-1,相对标准偏差为1.99%～4.29%,加标回收率为94.0%～108.0%,ICP-OES与ICP-MS仪器间比对结果的误差在允许范围之内,表明该方法准确度高、精密度好,可用于实际样品的分析。

应用QuEChERS-HPLC/MS/MS法测定鸡蛋中的氯羟吡啶和阿维菌素

建立应用QuEChERS-HPLC/MS/MS法测定鸡蛋中氯羟吡啶和阿维菌素残留的分析方法。结果表明,在阿维菌素和氯羟吡啶添加浓度为5.0、10.0、20.0μg·kg^-1时,回收率为76.5%~86.7%,相对标准偏差为3.3%~7.1%,两种化合物检测限分别为0.25和0.5μg·kg^-1,定量限为0.5和1.0μg·kg^-1。此法操作简单快捷,灵敏度高,重现性好,可满足日常快速检测筛选的要求。

电感耦合等离子体质谱法测定地表水中铅的不确定度研究

本研究依据《化学分析测量不确定度评定》(JJF 1135-2005)和《水质65种元素的测定电感耦合等离子体质谱法》(HJ 700-2014)测定地表水中铅含量,并进行不确定度评定。其间通过电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定地表水中铅含量,依据测量不确定度评定与表示的理论,建立数学模型,分析测定过程中不确定度的来源,并通过计算得到各分量的不确定度,得出主要影响因素,提出控制影响因素的建议。

液相色谱-串联质谱法测定山药中10种杀菌剂残留

建立了同时测定山药中多菌灵、嘧霉胺等10种杀菌剂的液相色谱-串联质谱的分析方法。样品经乙腈提取、PSA分散固相净化,LC-MS/MS测定,外标法定量。在10.0μg·kg^-1添加浓度时,回收率为88.6%~105.5%,相对标准偏差为2.7%~8.3%,10种化合物检测限为0.05~0.31μg·kg^-1,定量限为0.10~0.62μg·kg^-1。试验结果表明,此方法操作简便、快速、稳定性好、准确度高,适用于山药中杀菌剂类农药残留的快速测定。

羟丙基-β-环糊精对α-山竹黄酮的包合作用

用研磨法制备了羟丙基-β-环糊精(Hp-β-CD)与α-山竹黄酮(α-MAG)的包合物,由紫外和红外吸收光谱、差示扫描量热分析和1HNMR对包合物进行了表征,并用紫外分光光度法测定了包合物的溶解度、表观包合稳定常数和包合反应的热力学参数ΔG,ΔH和ΔS。结果表明,Hp-β-CD能与α-MAG形成稳定的1∶1包合物,表观包合稳定常数K为2.11×103L/mol,加入Hp-β-CD后,α-MAG溶解度大大增加。包合反应主要由焓变控制,驱动力为范德华力和疏水作用力。

液相联用电感耦合等离子体质谱测定乳粉中的六价铬

建立了乳粉中六价铬的测定方法。将乳粉复溶成乳溶液,在弱碱环境下煮沸,冷却后高速离心去除蛋白,吸取上清液使用HPLC-ICP-MS进行测定,同时对可能发生的六价铬转化成三价铬的情况进行监控。研究了如下技术关键点,标液配制:必须对三价铬标液调节pH到7.0;干扰消除:选用NH_3来消除^(52)Cr存在的干扰;积分方式:对于短柱分离度不佳的现实,选用了峰高的计算方式;以及合适的蛋白沉淀剂的选择。经计算得到该方法中六价铬的定量限为0.03 mg/kg,分别使用六价铬单标及六价铬和三价铬的混合标液对实际样品进行三水平加标回收试验,在0.10~0.50 mg/kg的加标量下回收率均高于80%,未发现三价铬向六价铬变化的趋势,该方法具有可行性,为更加准确评价六价铬在乳粉中的潜在危害提供可测量方法,进一步保障食品安全。

全谱等离子体质谱(ICP-MS)快速测定奶粉中溴和硼的方法研究

建立了一个快速、简单测定奶粉中溴和硼的实用性新方法。称取定量奶粉样品,冲调配置成液体溶液,加入适量乳化剂,采用10%氨水定容并混匀形成分散性良好的乳浊液(氨水同时具有萃取溴、硼元素和消除记忆效应的功效),在线加入130Te元素作为内标,直接测定。通过对奶粉标准物质的多次测定,考察了方法检出限、准确性、加标回收率等指标,以上指标和测定结果均能满足实际检测的需要。该方法操作简单,无需繁琐的前处理手段,避免了前处理过程中可能发生的元素损失和污染,有很强的实用价值。

含鱼辅食制品中总汞和甲基汞含量的测定方法

对常用的汞和甲基汞的测定方法进行了介绍。使用测汞仪直接进样（DMA）和微波消解-原子荧光光谱分析法（AFS）对多种含鱼婴幼儿辅食中总汞进行测定,考察了标准曲线线性及方法检出限,并对测定的结果进行分析,发现2种检测方法下实际样品的测定结果相互吻合,对标准物质（GBW 08571）贻贝的测定结果良好;使用高效液相电感耦合等离子体质谱联用的方法 （HPLC-ICP-MS）测定实际样品中甲基汞含量,方法检出限达到0.0014 mg/kg,并进行加标回收实验,回收率在90%~106%之间,方法灵敏度高,涉及试剂较为安全,过滤提取可以进行批处理,单个样品测定时间在5 min以内。通过多批次样品的测定,发现在多原料的含鱼婴幼儿辅食中,汞含量较低,甲基汞含量均小于检出限,只有在以鱼作为单一原料或是主要原料的辅食产品中,汞含量较高,甲基汞含量随产品中原料鱼性质不同含量比例不同,其中深海鱼（金枪鱼、旗鱼）鱼酥的含量略高,约占总汞比例的30%~60%。