人白细胞介素2基因在酵母菌中的表达及发酵研究

将一带有人白细胞的介素2cDNA 的大肠杆菌——酵母菌穿酸质粒转化啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae 8534-8c,再将转化子与另一啤酒酵母 Saccharomyces cervisiae CSH83—L 进行杂交,得到二倍体菌株.同时,还研究了单倍体转化子和二倍体菌株在表达重组白细胞介素2上的差异以及不同培养条件下二倍体菌株的表达情况,确定了合适的发酵条件,并进行了五立升自动发酵罐的发酵研究.

酵母菌重组白细胞介素2生物学活性鉴定

利用IL-2依赖细胞系CTLL检测酵母菌系统表达的人rIL-2生物活性。结果证实,酵母菌 rIL-2 能明显刺激 CTLL细胞的生长。用进口的 rIL-2作为标准,测定所表达的 rIL-2活性单位为 33u/ml。单克隆抗体中和实验证实,酵母菌 rIL-2 能特异地和天然 IL-2单抗结合,抑制其本身诱导的 CTLL细胞增殖。这种抑制是由 IL-2单抗参与的,因为鼠正常血清没有这种抑制作用。此外,经蛋白A 柱层析纯化后的单抗在 0.27μg/孔时就能表现明显地抑制,提示该抗原抗体反应的特异性和专一性。