昆明种小鼠脱毛性状的遗传分析

脱毛性状遗传分析证实，无毛小鼠和正常昆明小鼠交配所生的Ｆ１子代呈正常有毛状态，在Ｆ２代中，有毛小鼠与表现无毛小鼠的分离比率为３∶１，回交（ＢＣ）子代中（亲代无毛小鼠×Ｆ１）昆明有毛小鼠与表现无毛小鼠的比例是１∶１。结果表明昆明种小鼠脱毛性状属单一隐性遗传，由常染色体上一个隐性基因控制。

豫医无毛小鼠分离近交系的建立及其遗传纯度测定

采用强迫杂合性兄妹交配方式培育携带无毛突变基因的分离近交系 ,然后用生化标记法、皮肤移植实验和毛色基因测试法对其进行遗传监测。并对其基本生物学特性进行了研究。结果育成了具有独特生物学特性的豫医无毛小鼠分离近交系。现已达 30代。生化标记法测定的 9条染色体上 13个生化标记位点全部纯合 ;同系异体间皮肤移植 10 0天后 ,未见排斥现象 ,为同系组织遗传性 ;与DBA/2交配进行的毛色基因测试 ,杂交的F1代相同 ,全部为野生色 ,基因型为AABBccDD。表明豫医无毛小鼠已成为一个达到国际标准的新品系。

豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器系数及生长发育情况比较

目的:探讨豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器及生长特性的差异。方法:分别在21d龄、28d龄、60d龄和90d龄时测量20只豫医卷毛大鼠和20只SD大鼠(雌雄各半)的主要脏器质量、体质量及体长、尾长,计算各脏器占体质量的百分比(脏器系数)。结果:28d龄卷毛大鼠体长小于SD大鼠(P<0.05),60d龄卷毛雄鼠体质量、尾长大于SD大鼠(P<0.05)。28d龄、90d龄雄性卷毛大鼠脾脏系数小于SD大鼠(P<0.05),60d龄雄性卷毛大鼠胸腺系数小于SD大鼠(P<0.05),其余日龄2种大鼠之间比较各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卷毛突变基因对大鼠的中期生长及免疫力有一定影响。

昆明小鼠无毛基因cDNA全长序列的分子克隆

无毛基因是与皮肤和被毛结构有重要关联的核受体基因,编码一个锌指结构转录因子,是甲状腺激素受体的转录辅阻遏物,并参与毛发生长周期的调控,在维持毛囊及毛囊间上皮的增殖、分化、调亡的精致平衡中扮演重要角色。参考小鼠、人的无毛基因序列,用RT-PCR方法首次对昆明小鼠无毛基因的cDNA序列进行了克隆,获得了昆明小鼠无毛基因的全长4 014 bp cDNA序列(GenBank登录号:AY547391),基因的CDS长度为3 546 bp。AY547391基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAT45233,由1181个氨基酸组成。昆明小鼠与国外报导的小鼠、大鼠、猪、羊、猴、人等6种动物CDS序列同源性分别为99.9%、94.4%、83.1%、78.1%、81.9%、82.1%,氨基酸同源性分别是99.9%、92.2%、81.7%、70.8%、79.9%、80.1%。这一结果反应了无毛基因在进化过程的高度保守性。通过Blast比较昆明小鼠无毛基因与GenBank数据库中收集的Hr基因的mRNA,发现了4个SNP和一个缺失突变,其中3个位点没有改变氨基酸残基的性质,两个位点有氨基酸改变并证实为多态性突变位点,研究结果为无毛基因SNPs的数据库提供了新的信息。

无毛小鼠同类系的建立

目的 :培育包含无毛基因的同类系小鼠新品系 ,明确无毛基因在不同遗传背景下的表达方式。方法 :将无毛基因通过杂交互交导入法分别导入 6 15、C57BL/6、BALB/c、DBA/2共 4种近交系。结果 :已完成 4代导入 ,杂交的第 1代、第 3代均表现有毛 ,第 2代、第 4代互交育出 6 15、C57BL/6、BALB/c、DBA/2共 4种无毛小鼠 ,其脱毛规律同豫医无毛小鼠。结论 :无毛基因可以在不同的遗传背景下表达。

豫医无毛小鼠分离近交系的繁殖学特征及HLC小鼠近交系的建立

对豫医无毛小鼠和有毛小鼠生殖器官的大体形态、组织学结构及其繁殖能力进行了比较研究.结果表明,无毛小鼠生殖器官的位置、形态、组织学结构及发情周期与有毛小鼠无明显差异;无毛雄鼠明显具有生育能力,但其生育期短;无毛雌鼠有生育能力,但繁殖能力下降,受孕率较低,乳腺功能受损,母性差,不能很好地护理幼仔,幼鼠很难成活,一般1～3 d内死亡.杂合子有毛小鼠的生育能力正常.在昆明小鼠繁殖群基础上,采用全同胞兄妹交配方式培育建立了HLC小鼠近交系,应用生化标记检测、皮肤移植试验和毛色基因测试法对育成的HLC小鼠进行遗传监测,证实其基因位点高度纯合;对其基本生物学特性进行研究,结果表明其为具有新特性的近交系小鼠,现已近交繁育30代.

无毛同类系小鼠皮肤形态及扫描电镜观察

对3种无毛同类系小鼠的皮肤形态及超微结构进行了观察.结果发现,3种无毛同类系小鼠约在12日龄开始从眶周脱毛,3～4周龄后除触须外全部脱净,并终生保持无毛状态;1月龄时,无毛小鼠内脏可视,随年龄的增长,皮肤逐渐变松、变厚,并形成特别的皱纹和褶痕,似犀牛状,指甲过度生长,呈螺旋状弯曲;BALB/c无毛小鼠无色素沉着,表型类似于豫医无毛小鼠,DBA/2、C57BL/6无毛同类系小鼠皮肤有黑色素沉着,嘴角、眶周、耳和尾部颜色较重.随年龄增长,皮肤及尾部表面出现一些类似人粉刺样的丘疹,数量逐渐增多,触须也随着年龄增长变得异常而稀疏.电镜扫描观察,脱毛前毛囊上部的毛管先变大,然后再脱毛.无毛同类系小鼠表面有较厚的一层鳞片状角化物,毛囊腔宽大,部分毛囊内含有一些能脱落到表面的角化样碎片.35日龄无毛同类系小鼠可见明显的包囊结构,4月龄包囊增多、变大.

新近交系HLC小鼠的遗传监测

目的 :检测新培育的HLC近交系的基因纯合性。方法 :按照国家实验动物质量检测中心编著的实验动物遗传检测操作规程 ,用电泳法分别对第 2 5代HLC近交系小鼠 9条染色体上基因编码的 13个生化标记蛋白进行了生化标记检测 ,用同系异体间尾部皮肤进行了移植试验 ,并与DBA/ 2交配进行了毛色基因测试。结果 :各生化标记位点全部纯合 ;皮肤移植 10 0d后 ,未见排斥现象 ,为同系组织遗传性 ;杂交F1的毛色同BALB/C与DBA/ 2杂交的F1代相同 ,全部为桂皮色 ,基因型为AAbbccDD。结论 :HLC小鼠是基因位点高度纯合的近交系小鼠。

豫医卷毛大鼠表皮生长因子受体基因的比较生物学分析

目的:比较豫医卷毛大鼠与其他物种间表皮生长因子受体(EGFR)基因及其编码蛋白的序列差异。方法:采用RT-PCR方法对豫医卷毛大鼠EGFRcDNA序列进行克隆、测序,并借助生物信息技术对BN大鼠、家鼠、黄牛、猕猴和人EGFR基因的核苷酸序列及其编码蛋白的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果:获得了豫医卷毛大鼠EGFR基因全长4127bp的cDNA序列(GenBank登录号:HM801041)。豫医卷毛大鼠与大鼠、小鼠、牛、猴和人等5个物种EGFR基因编码区的核苷酸序列同源性分别为99.5%、93.1%、81.6%、83.3%和83.6%,其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别是99.8%、96.1%、87.4%、89.2%和90.9%。结论:EGFR基因在进化过程中是一个高度保守并具有重要功能的"持家基因"。

豫医无毛小鼠近交系毛色基因遗传学测试

目的 :考核豫医无毛小鼠 (YYHL)近交系纯化程度及毛色基因型。方法 :用复隐性基因小鼠DBA/ 2、6 15分别对YYHL近交系进行了毛色基因测试。结果和结论 :杂交所生的F1代全部为野生色 ,表明其毛色基因为纯合 ,其基因型为AABBccDD。豫医无毛小鼠近交系已达到近交系的国际标准。

豫医无毛小鼠皮肤形态及超微结构观察

对豫医无毛小鼠及对照的有毛小鼠皮肤形态及超微结构进行了对比观察,结果发现豫医无毛小鼠出生后被毛状态正常,但是在12日龄前后开始从上眼睑脱毛,接着向头部、尾部扩展,整个脱毛过程约持续2周时间,结果除胡须外全部脱净,并终生不再生.脱毛后的豫医无毛小鼠内脏可视,随年龄的增长,皮肤角化程度和厚度增加,体表面积扩大,形成犀牛状褶痕;指甲过度生长,呈螺旋状弯曲,皮肤表面有淡黄色蜡样粘性物,而且随年龄增长,皮肤表面出现小的丘疹,胡须变得短而稀疏.电镜扫描发现脱毛前毛囊上部的毛管先变大,然后再脱毛,2月龄无毛小鼠皮肤表面有许多形状、大小不规则的泡沬样物质,沿着皮肤沟排列,无毛小鼠毛囊漏斗部极度扩张,内含一些角化样碎片,形成较大的椭圆囊,在真皮及皮下组织出现大小不等的包囊.至8月龄时,无毛小鼠皮肤表面为鳞片状角化物,真皮及皮下组织退化,弹性纤维排列凌乱,真皮及皮下组织几乎全部被几层大的真皮包囊充填.

突变无毛小鼠近交系的育成及特性

目的 :培育突变无毛小鼠分离近交系 ,鉴定其基因纯合度 ,明确其生物学特性。方法 :采用强迫杂合性全同胞兄妹交配法进行分离近交系培育。生化标记检测、皮肤移植试验和毛色基因测试法对其基因纯合度进行鉴定。并采用相应方法对其基本生物学特性进行研究。结果 :育成具有独特生物学特性、基因高度纯合的豫医无毛小鼠分离近交系。现已达 3 0代。结论 :可以认为 ,豫医无毛小鼠分离近交系是一个遗传上高度纯合的新品系。

SD大鼠皮肤组织病理学观察

目的观察不同日龄SD大鼠皮肤组织学结构。方法10%甲醛固定,行石蜡切片,HE染色。结果新生大鼠皮肤较薄,透明层缺乏,皮脂腺发育良好。6月龄时表皮、真皮和皮下组织明显增厚,毛囊增粗,生长旺盛,毛囊深入皮下脂肪层。24月龄时,大鼠皮脂腺及汗腺萎缩,表皮变薄,真皮成纤维细胞、血管数量减少,弹力纤维变细。结论不同日龄SD大鼠皮肤组织学结构有差异。

豫医无毛小鼠主要免疫器官组织学观察

Objective: The purpose of this study is to observe histological structure of major immune organs of Yuyi hairless mice.Methods: By using Weigert′s hematoxylin and eosin staining.Results: The histological structure of spleen and lymph node of Yuyi hairless mice was normal at different ages.Thymus was showed with thicker cortex in one month and two months.Thymus shrank in fat tissues in eight months,showed a medulla structure without cortex.Thymus bodies were not found at different ages.Conclusion: The major immune organs of Yuyi hairless mice were normal in one month and two months,thymus shrank without cortex in eight months.

豫医无毛小鼠无毛基因的比较生物学分析

目的:分析豫医无毛小鼠与其他物种间无毛基因组成的差异。方法:采用RT-PCR方法对豫医无毛小鼠无毛基因的cDNA序列进行克隆测序,并借助生物信息学分析技术对小鼠、大鼠、猴和人的无毛基因及其所编码的氨基酸序列进行比较生物学分析。结果:获得了豫医无毛小鼠无毛基因的全长4 014 bp的cDNA序列(GenBank登录号:AY547390)。豫医无毛小鼠与国内外报道的2种小鼠、大鼠、猴、人等5种动物的核苷酸同源性分别为99.9%、99.7%、94.3%、81.7%、81.8%,氨基酸同源性分别是99.8%、99.7%、94.5%、79.8%、80.0%。结论:无毛基因是一个高度保守基因,不同物种间具有高度同源性。

BALB/c无毛同类系小鼠的皮肤组织学及超微结构观察

目的:观察BALB/c无毛同类系小鼠皮肤特征。方法:用常规组织学及扫描电镜方法对正常有毛BALB/c小鼠及BALB/c无毛同类系小鼠皮肤结构进行了对比观察。结果:BALB/c无毛同类系小鼠12日龄左右发生脱毛现象,2周左右时除触须外全部脱净,并终生保持无毛状态;1月龄时无毛小鼠透过皮肤可见内脏,老龄时头部、腹部和体侧形成明显的皱纹和褶痕,似犀牛状,指甲过度生长。组织学发现BALB/c无毛小鼠毛囊瓦解,形成椭圆囊,真皮内形成大小不等的包囊,并且随年龄增长而扩张;无毛小鼠皮肤电镜扫描可见表面有许多鳞片状、泡沬状、角化物质沿皮肤沟排列;切面可见角质化的皮肤包囊和真皮包囊,真皮内弹性纤维排列凌乱。结论:BALB/c无毛同类系小鼠皮肤结构特点较有毛小鼠更接近于人,可作为新品系应用于皮肤病学研究。

卷毛突变大鼠近交系培育及其生物学特性

采用全同胞兄妹交配方式培育卷毛突变大鼠近交系,用遗传测交试验分析其遗传表型和规律,同时对其皮肤组织学特征、电解质和生化、血常规、主要脏器指数及生长发育等生物学特性进行了系统研究。结果显示,突变大鼠的卷毛性状呈半显性遗传,由常染色体上单一显性基因控制;卷毛大鼠毛囊弯曲,排列紊乱;血清电解质和生化、血常规与Sprague-Daw SD大鼠有一定的差异;中期生长发育与SD大鼠有差别,脾脏和胸腺脏器系数小于SD大鼠。结果表明卷毛近交系大鼠其表型特征明确,遗传方式清楚,生物学特性有别于SD大鼠,可望成为一种新的实验动物模型。

BALB/c无毛同类系小鼠的分子遗传学特征分析

目的:探讨BALB/c无毛同类系小鼠无毛基因表型的分子遗传学基础。方法:采用PCR和RT-PCR方法扩增BALB/c无毛同类系小鼠和BALB/c小鼠无毛基因的部分序列,并对测序结果进行对比分析。结果:BALB/c无毛同类系小鼠无毛基因3110位碱基(外显子12)发生G→A突变,使911位的色氨酸密码子(TGG)突变为终止密码子(TGA)。结论:BALB/c无毛同类系小鼠谱系清楚,遗传机制明确,将是一种有价值的动物模型。

昆明种小鼠无毛突变系的建立及其生物学特性的研究

我单位在昆明种小鼠的繁育过程中，发现４只小鼠发生脱毛现象，经过几年努力建立了目前国内唯一的无毛小鼠种群，完成了１１代近交系培育，原种增殖采用杂合子无毛间互交，以及亲代和子代回交方式，用雌雄长期同居的交配方法进行繁殖扩大种群，培育期间我们观察了动物的生长发育，脱毛规律，繁殖能力，并对其皮肤进行了切片观察。

昆明种无毛小鼠及C57BL/6无毛小鼠皮肤组织学比较研究

对我单位发生脱毛突变的2月龄昆明种无毛小鼠及C57BL／6无毛小鼠皮肤进行组织学观察，结果发现两种动物表皮均有一层角化过度的角质层，毛干消失，毛根不规则，毛球结构不正常，毛囊内被一些角化物质充填，有的变为空囊腔。昆明种无毛小鼠真皮包囊取代皮下脂肪，而C57BL／6无毛小鼠含有大量黑色素细胞，并有树突状突起。