基于理性设计的烟酰胺核糖激酶活性提升及应用

烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)是NAD+的前体,补充NMN可有效恢复体内NAD+水平,并改善与NAD+下降相关的病理状态和疾病.目前NMN主要通过酶法生产,但是酶的催化活性较低,使得酶法合成NMN的成本仍然较高.来源于人的烟酰胺核糖激酶NRK1可以催化ATP和烟酰胺核糖合成NMN,因此,以提升烟酰胺核糖激酶NRK1的催化活性为目的,利用理性设计的策略和定点突变技术,通过氨基酸序列比对和结构分析,设计了NRK1的2个突变体NRK1(T47V)和NRK1(N62D),并在大肠杆菌中成功表达.实验表征发现,二者的催化特性均得到了提升,且NRK1(T47V)具有更好的催化特性,其活性较NRK1提高130%,催化效率k_(cat)/K_(m)和稳定性分别较NRK1提高了100%和20%.在较大反应体系中反应100 min时,NRK1(T47V)催化底物烟酰胺核糖的转化率为78%,较NRK1提高15.4%,产物NMN的产量为4.13 g/L,较NRK1提高38%.该结果表明,活性中心附近氨基酸的理性突变能显著提高NRK1酶的催化活性.

酶催化合成β-烟酰胺单核苷酸及关键酶

体内NAD^(+)会随着机体衰老出现系统性减少,从而引发年龄有关的生理功能下降和疾病发生.补充NAD^(+)的中间体β-烟酰胺单核苷酸(β-nicotinamide mononeucleotide,β-NMN),可有效平衡机体的NAD^(+)水平,改善衰老相关的病理和疾病状态.β-NMN作为抗衰老、治疗老龄性疾病的潜在活性物质,在食品和药品领域具有广阔的应用前景.与化学法相比,酶法合成β-NMN具有特异性强、高效、安全性高等优点,成为合成β-NMN的首选方法.现有酶催化合成β-NMN的路线报道不够全面,缺乏关于关键酶结构特征和催化特性等方面的研究报道.鉴于此,综述了β-NMN的4个酶催化合成路线及其关键酶的结构特征和催化特性,分析了不同酶法合成的优缺点及工业化应用的可行性.最后,讨论了现阶段酶催化合成β-NMN面临的难点和未来发展方向,以期为β-NMN的工艺优化和生产应用提供借鉴.

2′,5′-寡核苷酸C_(2′P5′)C_(2′P5′)A的合成

近年来发现用干扰素处理过的细胞胞浆提取物和双链RNA、ATP一起培养,可以生成一个低分子量的蛋白合成抑制剂,即5′-三磷酸-三聚2′,5′-腺苷酸(Ⅰ)。由于(Ⅰ)具有天然核酸中不存在的2′,5′-磷酸酯链以及它的抗病毒活性,因此引起不少化学家的兴趣,已有不少文章报导了(Ⅰ)及其类似物的合成,同时也发现不含三磷酸的三聚2′,5′-腺苷酸(Ⅱ)也同样具有活性。

女职工的生育津贴如何享受

【基本案情】唐某于2011年3月7日入职A公司，从事销售工作，2012年4月16日唐某生育，公司为其办理了生育保险报销手续，经社会保险管理服务局核报，公司方面收到了相关生育保险待遇费用共计15200．10元，

杭州市西湖区成功举办第一届企业人力资源管理论坛

日前，杭州市西湖区首届企业人力资源管理论坛成功举办。论坛由区人力社保局主办、浙江楷泽律师事务所协办，就企业人力资源管理风险防范及企业人力成本控制等方面进行专题授课，讲解企业人力资源管理风险点防范对策，帮助中小企业建立人力资源管理风险防范体系，并没立了互动交流环节，由区劳动仲裁院对企业人力资源管理中存在的问题面对面进行解答，为企业搭建了一个合作交流、良性互动的平台。

代驾工作算不算劳动关系

【案情简介】2011年12月29日，汪某人职杭州XX代驾服务有限公司，从事代驾工作。双方签订了一份合作协议，协议生效日期为2012年1月1日，未约定截止日期。按照合作协议，汪某上班天数自主安排，上班时间为每天晚上19时至次日凌晨3时，代驾公司按每天60元向汪某支付报酬，另支付业绩量的10％作为提成。

基层劳动监察工作战略思维运用初探

谈到“战略”两字，很多人都认为指的是全局，应用在国家、战争发展的方向等大事情层面。其实不然，作为一个社会人，我们每个个体的工作也是应当讲究战略思维的，下面，笔者就基层劳动监察工作中如何运用战略思维这个主题，谈一些粗浅的看法。