Na^(+)/Ca^(2+)交换体抑制剂SN-6和维拉帕米降低肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295R醛固酮合成酶表达

目的研究Na^(+)/Ca^(2+)交换体(NCX)抑制剂SN-6和钙通道阻滞剂(CCB)维拉帕米对钾离子(K^(+))刺激的肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295R(H295R)醛固酮合成酶表达的影响。方法H295R细胞分为对照组、K^(+)(15 mmol/L)处理组、钙通道阻滞剂维拉帕米(verapamil)(10μmol/L)处理组、SN-6(10μmol/L)处理组、K^(+)+维拉帕米处理组、K^(+)+SN-6处理组、维拉帕米+SN-6处理组和K^(+)+维拉帕米+SN-6处理组,用实时荧光定量PCR检测醛固酮合成酶(CYP11B2)的mRNA表达,用FLIPR Calcium6检测细胞内钙离子水平。结果与对照组相比,K^(+)刺激醛固酮合成酶CYP11B2的mRNA表达(P<0.001);SN-6和维拉帕米均抑制K^(+)刺激的CYP11B2的mRNA表达(P<0.01);与K^(+)+SN-6组相比,K^(+)+SN-6+维拉帕米组更能显著抑制CYP11B2的mRNA表达(P<0.001)。SN-6和维拉帕米显著降低K^(+)刺激的细胞内钙离子水平(P<0.0001)。结论SN-6和维拉帕米均抑制K^(+)诱导的H295R细胞的醛固酮合成酶的表达;SN-6联合维拉帕米处理,抑制作用更显著。

肾上腺肿瘤的发病机制的研究进展

肾上腺肿瘤在临床中非常常见,主要包括起源于肾上腺髓质的嗜铬细胞瘤和起源于肾上腺皮质的肾上腺皮质腺瘤或腺癌,这些肿瘤常有分泌功能,如分泌儿茶酚胺、醛固酮或皮质醇等,导致患者出现激素分泌增多的临床症候群,也有部分肾上腺皮质腺瘤和腺癌没有分泌功能。

嗜铬细胞瘤/副神经节瘤患者血NSE水平与临床特征的关系

目的 研究血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)与嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(PPGL)临床特征的关系。方法 选取2019年1月至2022年12月诊断的501例PPGL患者,按照NSE正常(≤16.3 ng/mL)和NSE升高(>16.3 ng/mL)进行分组,比较两组临床特征的差别。结果 NSE升高组患者与NSE正常组相比,肿瘤原发灶直径更大(5.00 cm vs 4.60 cm),24 h尿去甲肾上腺素(NE),24 h尿多巴胺(DA)水平更高,出现转移病变的比例更高(31.6%vs 13.7%)(P<0.05)。NSE水平与肿瘤原发灶大小(r=0.131,P<0.05)、24 h尿NE水平(r=0.195,P<0.05)、24 h尿DA水平(r=0.119,P<0.05)成正相关。结论 在PPGL患者中,NSE水平与肿瘤大小、分泌功能以及是否发生转移相关。

醛固酮产生腺瘤中细胞死亡和增殖机制

醛固酮产生腺瘤(APA)是原发性醛固酮增多症(PA)的主要病因之一,目前对于其自主分泌醛固酮机制的研究主要集中于体细胞驱动基因突变的筛查。然而,在APA中,肾上腺皮质细胞的死亡和增殖,以及腺瘤的发生和发展的具体机制尚无定论。本文结合近期已发表的肾上腺组织相关的基因组学、转录组学、代谢组学及表观遗传学等的研究,综述APA中细胞死亡与增殖机制的研究进展。

嗜铬细胞瘤/副神经节瘤免疫微环境

嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(PPGLs)是罕见的神经内分泌肿瘤,遗传易感性高,其中SDHx突变为主的假性缺氧型肿瘤恶性潜能大。约10%~17%的PPGLs肿瘤会发生转移,转移性PPGLs缺乏有效的治疗,预后差。免疫微环境与肿瘤的发生发展密切相关,能够预测患者预后及其对免疫检查点抑制剂治疗的反应。目前已有部分研究初步描绘了PPGLs免疫图谱。本文主要就PPGLs免疫微环境中各类免疫细胞浸润情况、免疫检查点分子的表达及其与患者基因背景及肿瘤转移的关系进行综述,以更好地理解肿瘤免疫逃逸机制,并为转移性PPGLs患者寻找新的治疗方案提供思路。

^(99m)Tc-HYNIC-TOC显像和^(131)I-MIBG显像在嗜铬细胞瘤和副神经节瘤中的诊断价值

目的探讨^(99m)Tc标记肼基烟酰胺奥曲肽类似物(^(99m)Tc-HYNIC-TOC)显像与^(131)I-间碘苄胍(^(131)I-MIBG)肾上腺髓质显像对嗜铬细胞瘤和副神经节瘤(PPGL)的临床诊断价值。方法回顾性研究359例经手术病理确诊、临床资料完整的PPGL患者的临床资料,分析^(99m)Tc-HYNIC-TOC生长抑素受体显像与^(131)I-MIBG肾上腺髓质显像的诊断敏感性及影响因素。结果319例行^(99m)Tc-HYNIC-TOC生长抑素受体显像,病灶检出阳性184例,诊断敏感性为57.7%;279例行^(131)I-MIBG肾上腺髓质显像,病灶检出阳性232例,诊断敏感性为83.2%,原发灶位于肾上腺、腹膜后、头颈部、心脏及纵膈、盆腔及膀胱部位的^(99m)Tc-HYNIC-TOC生长抑素受体显像敏感性分别为53.3%、62.5%、95.0%、66.7%、50.0%和11.0%,^(131)I-MIBG肾上腺髓质显像敏感性分别86.7%、88.5%、45.4%、50.0%、75.0%和33.3%。不同遗传背景[包括琥珀酸脱氢酶(SDH)、希佩尔-林道(VHL)及RET原癌基因(RET)基因突变]的PPGL患者中,两种方法诊断PPGL的敏感性差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤最大径的中位数为4.4(3.0,6.1)cm。^(99m)Tc-HYNIC-TOC生长抑素受体显像和^(131)I-MIBG肾上腺髓质显像对较大肿瘤组(≥4.4 cm)的诊断敏感性均显著高于较小肿瘤组(<4.4 cm)(64.0%vs.51.3%;92.3%vs.74.1%)(P<0.01);19例患者(占5.3%)的肿瘤对这两种显像方法均不摄取。结论本研究为迄今中国最大PPGL队列的^(99m)Tc-HYNIC-TOC生长抑素受体显像及^(131)I-MIBG肾上腺髓质显像的研究。总体而言,^(131)I-MIBG肾上腺髓质显像敏感性较^(99m)Tc-HYNIC-TOC生长抑素受体显像高,但对部分部位的肿瘤,如头颈副神经节瘤,后者有明显优势,两者有互补性,临床中需要结合患者的特点进行选用。

人嗜铬细胞瘤组织中转化生长因子α、肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子的表达

目的 观察人嗜铬细胞瘤(PHEO)组织和正常肾上腺髓质中转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异。方法RT-PCR法比较22例经手术及病理证实的PHEO组织及18例意外死亡者(符合医学伦理学要求)的正常肾上腺髓质中TGFα、,TNFα和VEGF mRNA表达的差异;免疫组化法比较石蜡包埋的27例PHEO和14例正常肾上腺髓质中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达的差异,并分析其与肿瘤的性质、部位、大小、重量的关系。结果PHEO中TGFα、TNFα mRNA和蛋白表达均高于正常肾上腺髓质。PHEO中VEGF145剪接体的mRNA表达高于正常肾上腺髓质;VEGF121和VEGF165剪接体的mRNA在PHEO和正常肾上腺髓质中的表达差异无显著性。PHEO的内皮细胞和肿瘤细胞VEGF的染色阳性率高于正常肾上腺髓质。肾上腺外PHEO中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达高于肾上腺PHEO。恶性和多发PHEO的TNFα蛋白表达高于良性和单发PHEO。结论 PHEO中TGFα、TNFα和VEGF的mRNA和蛋白表达高于正常肾上腺髓质,TGFα、TNFα和VEGF在不同特点的PHEO中的表达不同。

人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养及鉴定

本研究拟建立人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养方法。采用连续分次胶原酶消化法分离培养人嗜铬细胞瘤细胞 ,采用细胞培养液中儿茶酚胺水平检测、多聚甲醛诱发荧光及细胞嗜铬粒蛋白A (CgA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫组化染色等方法进行细胞性质和功能鉴定 ,并用噻唑兰 (MTT)法观察原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞的生长状况。结果表明 ,人嗜铬细胞瘤细胞在培养 3～ 7天时生长较快 ,7天后细胞开始分化。经检测细胞培养液中的儿茶酚胺浓度、多聚甲醛诱发荧光等 ,证明该细胞有合成和分泌儿茶酚胺的功能。并且培养的细胞CgA和NSE免疫组化染色阳性。因此 ,本研究成功建立了人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养方法 ,并鉴定其具有嗜铬细胞瘤的分泌和表达功能 。

7例单纯分泌雄激素的肾上腺皮质腺瘤的临床特征

目的 总结单纯分泌雄激素的肾上腺皮质腺瘤的临床特征.方法 回顾性分析北京协和医院2002至2014年收治的7例单纯分泌雄激素的肾上腺皮质腺瘤患者的临床资料.结果 患者起病年龄3.5～31岁（中位年龄14岁）,病程1.5～30年.其中女性6例,具有不同程度的男性化表现;男性1例,表现为性早熟.术前血清总睾酮水平4.1 ～ 33.0 nmol/L,术后女性患者睾酮均降至正常（0.1 ～ 1.3 nmol/L）,临床症状缓解;7岁的男性患者由于继发了中枢性性早熟,其术后睾酮虽一度下降,但随即又升高（4.1 nmmol/L）,加用长效GnRHa制剂治疗后控制到青春期前水平.7例患者手术病理均为肾上腺皮质腺瘤.结论 单纯分泌雄激素的肾上腺皮质腺瘤多在儿童期起病;依性别及年龄不同,患者的临床表现各异,容易漏诊.对出现女性男性化、月经紊乱或性早熟的患者应警惕此病的可能.

酪氨酸激酶途径在成骨细胞增殖及c-fos表达中的作用

目的 探讨酪氨酸激酶信息传递途径在成骨细胞增殖及 c- fos表达中的作用。方法 采用阶段性酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,用 MTT法观察成骨细胞增殖 ,用免疫组化 SP法结合计算机图像处理系统检测成骨细胞 c- fos表达。结果 酪氨酸激酶抑制剂 Genistein和 HerbimycinA抑制成骨细胞增殖 ,且两者均部分阻断血清刺激的成骨细胞 c- fos表达。结论 血清刺激和维持成骨细胞增殖及诱导 c-

白细胞介素-6在骨吸收中的作用及其调控

白细胞介素－６在骨吸收中的作用及其调控童安莉，陈璐璐骨不断地进行着旧骨的吸收和新骨的形成的骨转化过程。首先，破骨细胞被激活，粘附于骨表面，通过分泌酸和蛋白酶，使骨质溶解、吸收；继而成骨细胞被吸引到吸收陷窝形成新骨，骨吸收和骨形成相互偶联，处于动态平衡...

亚临床嗜铬细胞瘤的诊治

目的分析亚临床嗜铬细胞瘤（PHEO）的临床特点。方法回顾性总结并分析北京协和医院1997年-2007年收治的22例亚临床PHEO的病例资料。结果患者均无明显临床症状，测定24hN儿茶酚胺正常10例，增高12例。16例患者用仅受体阻滞剂进行术前准备，手术中切瘤前挤压瘤体患者血压升高的最高值、切瘤后血压下降的最低值及术中血压波动分别为（163±34）／（86±20）mmHg、（105±12）／（61±10）mmHg及（58±37）／（25±21）mmHg；而6例未用药物准备的患者上述指标分别为（169±36）／（104±20）mmHg、（97±18）／（56±13）mmHg及（71±48）／（48±29）mmHg，术前用药准备组的切瘤前DBP最高值和术中DBP波动值比未用药准备组均明显减少（均P〈0．05）。结论大部分亚临床PHEO患者尿儿茶酚胺升高，并且术中血压波动较大，对患者用仪受体阻滞剂进行术前准备非常必要，可以减少手术风险。

TGF-α及TNF-α对大鼠和人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用

目的观察转化生长因子α(TGF-α)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞和原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用.方法用MTT法观察TGF-α和TNF-α对嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用;通过PI染色流式细胞分析、Hochest33342染色和细胞基因组DNA电泳等方法检测细胞凋亡. 结果 TGF-α(0.25～100 μg/L)呈浓度依赖方式促进PC12细胞增殖,TNF-α(1～100 μg/L)呈浓度依赖方式抑制PC12细胞增殖;而TGF-α和TNF-α(0.1～100 μg/L)均呈浓度依赖方式刺激人嗜铬细胞瘤细胞增殖.高浓度(100 μg/L)的TGF-α和TNF-α分别抑制或刺激PC12细胞凋亡,但均对人嗜铬细胞瘤细胞凋亡无明显影响.结论 TGF-α及TNF-α均能影响人和大鼠嗜铬细胞瘤细胞的增殖及凋亡,但对不同来源的嗜铬细胞瘤细胞的作用不同.

细胞因子在肾上腺髓质及嗜铬细胞瘤中的作用

肾上腺髓质可产生多种细胞因子,它们在嗜铬细胞的分化、成熟及生长、功能方面以及在嗜铬细胞瘤的发病机制中起重要作用。其中,成纤维细胞生长因子(FGF)-2、胰岛素样生长因子(IGF)和神经生长因子(NGF)可刺激髓质嗜铬细胞增殖,而转化生长因子(TGF)-β对其增殖起负性调控作用。NGF、FGF-2和胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)均可促进嗜铬细胞分化,形成神经轴突样突触。IGF、TGFα和GDNF在嗜铬细胞瘤中的表达较正常肾上腺髓质明显增多,可能参与了嗜铬细胞瘤的发病。另外,血管内皮生长因子(VEGF)、白介素(IL)-1和IL-6在正常肾上腺髓质中也表达,但它们在髓质中的功能尚不甚清楚。肿瘤坏死因子(TNF)α在肾上腺皮质中表达,可能通过旁分泌作用调节髓质功能。

EGF和AngⅡ激活人肾上腺皮质癌H295R细胞ERK通路

目的研究表皮生长因子(EGF)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)联合作用对肾上腺皮质癌H295R细胞的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响。方法用不同剂量的EGF和AngⅡ刺激H295R细胞,或用特异性EGF受体酪氨酸激酶抑制剂AG1478预处理后再加入AngⅡ刺激细胞,用Western blot法检测磷酸化ERK1/2;EGF及AngⅡ单独或联合刺激细胞,检测ERK1/2、P90RSK和Bad的磷酸化水平。结果 EGF和AngⅡ均刺激细胞ERK1/2和P90RSK磷酸化,在刺激ERK1/2磷酸化上呈剂量依赖性,两者联合处理其激活ERK1/2和P90RSK的作用产生叠加,AngⅡ和EGF单独及联合处理细胞,ERK1/2磷酸化水平分别是对照组的6.3±1.4、2.2±0.6及10.1±1.1倍。AngⅡ刺激细胞Bad磷酸化,而EGF无此作用。AG1478不能阻断AngⅡ诱导的Erk1/2激活。结论EGF和AngⅡ明显激活H295R细胞的ERK信号通路,两者作用有叠加效应。

成纤维细胞生长因子2激活肾上腺皮质癌H295R细胞的ERK、AKT信号通路

目的成纤维细胞生长因子2(FGF2)刺激肾上腺皮质细胞生长,参与该部位肿瘤的发生,但其涉及的细胞内信号传导通路研究尚少。本文拟探讨FGF2对人肾上腺皮质癌H295R细胞ERK和AKT信号通路的影响。方法培养H295R细胞;FGF2刺激细胞不同时间,用Western blot检测ERK1/2、p90RSK、Bad和AKT的磷酸化水平;FGF2和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共处理细胞,Western blot检测磷酸化ERK1/2和AKT。结果 FGF2作用5 min时磷酸化ERK1/2和p90RSK明显增加,10～20 min达峰;而10～20 min时磷酸化Bad稍增加;FGF2作用5 min激活AKT(Thr308)和AKT(Ser473),并持续至60 min。AngⅡ刺激5 min磷酸化ERK1/2达高峰,此后作用减弱;FGF2和AngⅡ共处理细胞产生协同激活ERK1/2的作用。结论 FGF2明显激活H295R细胞的ERK及AKT信号通路,并在激活ERK通路上与AngⅡ有协同作用。

122例朗格汉斯细胞组织细胞增生症临床分析

目的探讨朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)的疾病特点。方法回顾性分析北京协和医院收治的122例LCH患者皮损表现、系统受累表现、影像学表现、实验室检查、免疫表型及治疗和预后情况。结果 LCH皮损形态多样,最常受累的器官为肺,其他易受累的部位有骨、皮肤、淋巴结、肝脏、脾脏、口腔、甲状腺等。多系统LCH患者较单系统LCH患者多见。单系统LCH多采用手术治疗,多系统LCH以联合化疗为主。结论 LCH临床表现多样,肺是最常见的受损器官;治疗可采用手术或化疗。