甲基对硫磷高效降解菌的分离鉴定及降解酶基因的克隆表达

从湖北沙隆达农药厂污水处理池的活性污泥中分离到一株能以甲基对硫磷(MP)和对硝基苯酚(PNP)为唯一碳源生长的细菌HS-D36,经生理生化试验和16S rDNA同源性分析,初步鉴定为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri).该菌在3h内对浓度为50mg.L-1MP的降解率为90%;在12h内能将50mg.L-1PNP完全降解.HS-D36在以MP为唯一碳源的无机盐培养基上可以耐受800mg.L-1的MP,在LB培养基上可耐受浓度为2000mg.L-1的MP.同时,克隆了甲基对硫磷水解酶基因mpd,并在E.coli中获得高效表达.重组甲基对硫磷水解酶粗酶液活性达到52.5U.mL-1.

高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中10种硝基咪唑类药物残留量

建立了水产品中10种硝基咪唑类药物残留量高效液相色谱法-串联质谱检测方法。样品经乙酸乙酯提取,减压蒸馏后,正己烷净化,再用10%甲醇溶解残渣,再通过C18色谱柱(150 mm×2 mm,5μm)进行分离,0.20%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,采用高效液相色谱法-串联质谱法对目标化合物进行分析。方法检出限为0.04~0.30μg/kg,定量限为0.50~1.00μg/kg,在1~150μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R2)>0.99800。在5.0、7.5、10.0、15.0、20.0μg/kg的加标水平下,回收率为73.0%~116.2%,相对标准偏差(RSD)为0.43%~9.53%。该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,适用于大批量样品的检测。

改进高效液相色谱法测水产品中孔雀石绿残留量

孔雀石绿是一种合成的三苯基甲烷类工业染料,曾被作为杀虫剂和杀菌剂广泛应用于水产养殖业。水产品中孔雀石绿残留量检测的国标方法GB/T 20361—2006在多年检测工作中发现有操作繁琐、回收率和精密度较差的缺点。试验比较了不同提取次数和净化次数对回收率的影响,改进了GB/T 20361—2006的前处理和色谱条件,减少提取次数和净化操作,降低了流速。改进后方法检测限为0.40μg/kg,回收率提升至81.8%~100.8%,精密度为0.93%~8.32%,均达到并优于国标。

高效液相色谱法检测水产品中三种喹诺酮类药物残留量方法研究

本试验改进了农业部783号公告-2-2006水产品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星残留量的高效液相色谱法,并对样品的提取条件和色谱方法进行了优化分析,确定使用盐酸酸化乙腈提取,固相萃取小柱净化,高效液相色谱-荧光检测器检测、外标法定量的分析方法。本方法漂移率小,对三种喹诺酮类药物标准曲线回归系数在0.999以上,线性范围1~1000μg/L,定量限1μg/kg。对草鱼、对虾样品进行三种喹诺酮类药物加标回收率的验证实验,回收率在79.2%~105.0%之间,相对标准偏差在0.83%~9.85%之间,批次间标准偏差在5.00%~10.57%之间,说明方法前处理提取效率和准确度满足分析要求。

不同投饵模式对大口黑鲈生长的影响

设置不同投饵频率、不同投饵率、补偿投饵3个试验组,研究其对大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长的影响。结果表明,2%、3%、4%的不同投饵率对大口黑鲈生长并未产生显著影响,个体50 g之前可按4%投饵率投喂,后期逐渐递减至2%。在投饵率相对固定的情况下,不同投饵频率对大口黑鲈生长会产生影响。在水温适宜的条件下,每天投喂2次较为合理。投喂5 d停1 d后,试验鱼表现出完全补偿生长,与连续投喂试验组增重率、日增重和特定生长率均无显著差异(P>0.05)。因此,可根据养殖过程中鱼的摄食情况,每5 d左右停喂1 d,可达到节省饲料和人工、提高养殖效益的目的。

液质联用法测定水产品中红霉素残留的技术研究

红霉素（Erythromycin,EM）是大环内酯类抗生素,主要应用于治疗由格兰氏阳性菌和部分格兰氏阴性菌引起的疾病.近年来,它在养殖业,包括水生生物中也得到应用.由于该药物在生物体内的代谢时间较长,因此容易产生残留.目前水产品中红霉素的残留主要用GB29684-2013国家标准进行检测,本文在此标准的基础上进一步优化了前处理方法,提高了检测效率,并且能够达到规定的重现性和准确性.本试验通过液相色谱一串联质谱法（HPLC-MS/MS）,多反应监测扫描模式（MRM）和同位素内标法定量,对草鱼、中华鳖、对虾等水产品中的红霉素进行了检测.