蛋白质组学在炎症性肠病研究中的应用

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD),是胃肠道慢性炎症性疾病.环境、遗传、微生物、细胞和分子因素的共同作用介导了IBD的发生和发展.由于IBD的病因复杂,危险因素涉及多个方面临床表现极不典型,因此造成对该病的诊断存在很大难度.蛋白质组学的出现,使炎症性肠病的研究有了进一步的发展.本文就蛋白质组学在炎症性肠病的诊断及相关肿瘤预测方面的研究进行综述.

载脂蛋白C-Ⅲ在溃疡性结肠炎及其他肠病中的表达分析

目的评估载脂蛋白C-Ⅲ(Apolipoprotein,ApoC-Ⅲ)在溃疡性结肠炎(UC)的诊断及鉴别诊断中的作用。方法收集病理科2003~2011年存档的肠组织标本,UC组38例,克罗恩病(CD)组29例,肠结核组31例,肠淋巴瘤组32例,感染性肠炎组32例,白塞病组28例,正常体检组10例,采用免疫组化检测结肠黏膜的ApoC-Ⅲ表达情况,并用图像分析技术计数切片的阳性细胞数,取光学显微镜下的平均阳性细胞数作为计数标准。结果 UC患者肠粘膜组织中ApoC-Ⅲ的表达(44.44±10.71)显著高于肠结核组(20.76±4.77)、克罗恩病组(18.80±3.60)、肠淋巴瘤组(18.83±3.79)、白塞病组(19.02±3.04)、感染性肠炎组(20.56±3.35)和正常组(30.17±6.27,均P<0.05);正常组(30.17±6.27)又高于肠结核组(20.76±4.77)、克罗恩病组(18.80±3.60)、肠淋巴瘤组(18.83±3.79)、白塞病组(19.02±3.04)和感染性肠炎组(20.56±3.35,均P<0.05);但其它5组之间无差异(P>0.05)。结论 ApoC-Ⅲ在UC患者肠粘膜组织的表达较肠结核组、克罗恩病组、肠淋巴瘤组、白塞病组、感染性肠炎组和正常对照组明显增强,提示ApoC-Ⅲ与UC关系密切,可能与UC的发生发展过程相关,并在UC的诊断和鉴别诊断中起关键作用。

干扰和过表达热休克转录因子2对肠上皮细胞炎症的影响

目的通过脂质体法干扰和过表达肠上皮细胞的热休克转录因子2(heat shock factor 2,HSF2),探讨其对肠上皮细胞炎症反应的影响和涉及的信号通路,为溃疡性结肠炎发病机制及诊治靶点提供线索。方法选取结肠肿瘤上皮细胞Caco-2作为研究材料,采用脂质体法分别转染HSF2siRNA和pCMV-HSF2-FLAG重组质粒,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染前后细胞生理特性的变化;并用脂多糖(LPS)刺激转染组及对照组细胞,Griess Reagent System测定各组细胞的NO浓度;RT-PCR检测细胞炎性酶iNOS、COX-2,炎症因子TNF-α、IL-8mRNA转录水平;ELISA检测细胞培养基中TNF-α、IL-8含量;Western Blot检测COX-2、IκB、NF-κB p65蛋白水平,以及ERK1/2、JNK和p38磷酸化水平。结果 MTT法检测结果显示,脂质体法转染入siRNA或重组质粒对细胞活性无显著影响;干扰HSF2后,LPS刺激Caco-2产生iNOS、COX-2、TNF-α及IL-8,在mRNA和蛋白水平均较对照组表达上调(P<0.05),这一过程中信号通路IκB表达降低,而NF-κB p65表达升高,MAPK中ERK1/2磷酸化水平降低,而JNK和p38则呈增强趋势。转染入重组质粒过表达HSF2后,结果则相反。结论 HSF2通过增强ERK1/2蛋白磷酸化水平,抑制JNK、P38及NF-κB表达,能有效抑制LPS引起Caco-2细胞的炎性酶及炎性因子的表达,在炎症反应中起保护性作用,对研究溃疡性结肠炎的发病机制提供线索,可能成为其治疗新的靶点。

穴位埋线治疗消化性溃疡及慢性胃炎的疗效观察

目的:探讨穴位埋线在消化性溃疡及慢性胃炎治疗中的疗效。方法:选取2007年1月～2008年12月于我院进行治疗的100例消化性溃疡及慢性胃炎患者为研究对象,将其随机分为对照组(西医组)50例和(加用穴位埋线治疗组)50例,后将两组患者的总有效率、不良反应发生率及患者满意率、复发率进行统计及比较。结果:经研究比较发现,观察组的总有效率明显高于对照组,患者满意率高于对照组,2年随访复发率低于对照组,P均<0.05,均有显著性差异,而不良反应发生率两组比较,P>0.05,无显著性差异。结论:在消化性溃疡及慢性胃炎的治疗中加用穴位埋线进行治疗近远期疗效均较好,安全性也较高,值得临床推广及应用。

pCMV-HSF2-FLAG重组质粒的构建及其在Caco-2细胞中的表达

目的:构建人HSF2 pCMV-Myc真核表达载体,研究其在人结肠上皮肿瘤细胞Caco-2内的表达和定位.方法:以HSF2 Human cDNA ORF clone为模板,PCR法扩增出全长HSF2编码系列,用EcoRⅠ和KpnⅠ对HSF2 PCR纯化产物双酶切后,采用基因重组技术将其插入至pCMV-Myc载体中.DNA测序正确后,脂质体法将重组质粒转染到Caco-2细胞内,提取细胞总RNA逆转录为cDNA后进行普通PCR检测HSF2 mRNA转录水平,提取细胞蛋白进行Western blot检测HSF2蛋白质水平及融合蛋白表达.采用激光共聚焦显微镜观察HSF2及融合蛋白在Caco-2内的表达和定位.结果:将人全长HSF2编码序列克隆到真核表达载体pCMV-Myc中,酶切鉴定片段为1557bp,重组质粒测序正确.转染重组质粒后,PCR显示HSF2在mRNA水平较未转染组和空载组升高;Western blot检测到融合蛋白正确表达,分子量约为70kDa.与未转染组和空载组相比,重组质粒组HSF2蛋白质水平明显升高.激光共聚焦显微镜下观察到HSF2和融合蛋白定位一致,主要分布于Caco-2细胞质中,少量聚集在细胞核膜.结论:成功构建了人全长HSF2编码序列的pCMV-HSF2-FLAG真核表达载体,并在Caco-2细胞中成功表达,为进一步研究HS F2在溃疡性结肠炎中的作用奠定了良好的基础.

外鞘管辅助在困难空肠置管患者中的应用

目的探讨胃镜下利用外鞘管辅助放置鼻空肠营养管的方法及应用效果.方法回顾分析于2013-10/2016-10于南充市中心医院就诊的28例不适宜经口胃进食且下消化道无梗阻、需进行肠内营养的患者利用外鞘管辅助困难空肠置管法放置鼻空肠营养管.记录各患者置管深度、耗费时间及置管成功率;观察患者耐受情况,观察患者有无出血、穿孔、吸入性肺炎以及心律失常等置管相关并发症;追踪置管成功后实施肠内营养的总天数、营养管管路堵塞及拔出情况.结果鼻空肠管放置达Treitz韧带以下20-40 cm,成功率为100%,置管时间为为7.5 min±3.8 min,置管深度达110-130 cm,平均深度达118.4 cm±6.8 cm;28例置管患者24例出现轻微的恶心、呕吐,但未影响继续操作,所有患者均顺利实现肠内营养支持,对置管的耐受良好,未发生腹痛、出血、穿孔、吸入性肺炎、心律失常等置管相关并发症,实施肠内营养的中位时间为32 d(16-72 d),未发生堵管及脱位现象.结论外鞘管辅助困难空肠置管法成功率高、耐受性好,具有操作简单、安全、有效、准确等特点,为肠内营养提供了好方法,值得临床推广.

内镜治疗胃间质瘤的疗效评价及其预后影响因素分析

目的探讨内镜治疗胃间质瘤的疗效及其患者预后影响因素。方法以60例胃间质瘤患者作为研究对象,回顾性分析其临床病例资料。其中30例患者接受内镜下治疗(观察组),30例患者接受腹腔镜进行治疗(对照组)。观察并比较两组患者的治疗效果。同时根据患者是否复发,将其分为复发组(n=23)与非复发组(n=37),并通过cox回归模型分析影响患者预后的危险因素。结果观察组患者手术时间、手术首次排便时间、术后进食时间、术后住院时间等围手术期指标均明显低于对照组(P <0. 05);观察组患者复发、肺炎、急性弥漫性腹膜炎及术后穿孔等不良反应发生率明显低于对照组(P <0. 05);cox回归分析结果表明,肿瘤大小、核分裂数、肿瘤危险度分级、术后伊马替尼使用均为影响患者预后的独立危险因素。结论内镜治疗胃间质瘤,能有效改善患者病情,加快患者恢复。另外,针对肿瘤大小、核分裂数、肿瘤危险度分级、术后伊马替尼等独立危险因素,应及时采取预防措施,提高患者预后。

多潘立酮联合用药治疗胆汁反流性胃炎的疗效观察

目的探讨多潘立酮联合其他药物用于治疗胆汁反流性胃炎的临床效果。方法回顾性统计分析2013年1月~2015年12月收治的60例胆汁反流性胃炎患者临床资料,60例患者均为随机抽样方式选取,分为观察组30例和对照组30例。两组患者均使用多潘立酮进行治疗,在此基础上观察组联用铝碳酸镁配合治疗。治疗后统计评估比较两组患者临床有效率以及治疗后24 h胆汁反流情况。结果多潘立酮联合铝碳酸镁药物治疗的观察组患者,治疗后24 h胆汁指标检测水平、临床综合有效率均显著优于多潘立酮药物单独治疗的对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论多潘立酮联合铝碳酸镁用于治疗胆汁反流性胃炎患者,其临床效果显著,安全性高。

探条扩张联合氩离子凝固术治疗食管癌术后难治性吻合口狭窄

目的:探讨探条扩张联合氩离子凝固术治疗食管癌术后难治性吻合口狭窄的疗效。方法对19例食管癌术后吻合口狭窄患者,经单纯探条扩张4~5次,疗效不佳或短期内复发的患者,先行探条扩张,然后沿撕裂缘行氩离子凝固术治疗,跟踪随访观察吻合口狭窄改善情况。结果19例共行内镜下探条扩张治疗46次,平均2.4次,氩离子凝固术25次,平均1.3次,随访6个月,18例未见复发,治愈率达94.7%。结论探条扩张联合氩离子凝固术治疗食管癌术后难治性吻合口狭窄,安全性好,疗效佳,是治疗食管癌术后吻合口难治性狭窄的可靠选择。

内镜下扩张治疗食管癌术后吻合口狭窄的临床疗效观察

目的探讨内镜下扩张治疗食管癌术后吻合口狭窄的临床疗效。方法将2014年1月~2016年12月期间进行治疗的80例食管癌术后吻合口狭窄患者随机分为对照组(n=40)和观察组(n=40)。对照组患者行常规治疗,观察组患者行内镜下扩张治疗。对比分析两组患者的治疗成效、病症消退时长以及并发症发生率。结果观察组临床治疗总有效率为91.66%,对照组为75.00%,差异有统计学意义(χ2=5.038,P<0.05)。对照组患者并发率发生情况明显高于观察组患者。差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过对食管癌术后吻合口狭窄患者行内镜下扩张治疗安全有效,创伤性小,并且有效减少患者的并发症发生率。

热休克转录因子2在溃疡性结肠炎及其他肠病中的比较分析

目的检测热休克转录因子2（HSF2）在溃疡性结肠炎（UC）、克罗恩病、肠结核、肠淋巴瘤、感染性肠炎、白塞病及正常结肠黏膜中的表达情况。方法收集病理科2003年至2011年存档的肠组织标本：UC组38例，克罗恩病组29例，肠结核组31例，肠淋巴瘤组32例，感染性肠炎组32例，白塞病组28例，正常体检组10例。采用免疫组化检测结肠黏膜HSF2的表达情况。采用图像分析技术计数切片的阳性细胞数，取光学显微镜下的平均阳性细胞数作为计数标准。结果UC患者结肠黏膜组织中HSF2的表达（64．64±15．17）明显高于其他6组（克罗恩病组、肠结核组、肠淋巴瘤组、感染性肠炎组、白塞病组、正常体检组）（32．44±5．94、36．93±6．32、36．16±6．55、37．86±7．76、34．90±5．92、35．54±6．76，P〈0．05），而这6组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HSF2在UC患者结肠黏膜组织的表达较克罗恩病组、肠结核组、肠淋巴瘤组、感染性肠炎组、白塞病组及正常体检组明显增强，提示HSF2与UC关系密切，HSF2可能对UC的发病、诊断和鉴别诊断起重要作用。

区域性医疗中心三甲综合医院开展健康管理服务的分析研究

以川北医学院第二临床医学院/南充市中心医院健康管理中心作为研究对象,通过探索区域医疗中心三甲综合医院开展健康管理服务的发展策略,旨在帮助该类健康管理中心在竞争中赢得市场、稳固竞争优势、获得可持续发展能力。方法:运用SWOT分析方法,结合南充市中心医院健康管理中心现状,综合分析地方三甲综合医院健康管理中心内部优势和劣势、外部机会和威胁,进一步制定发展战略。结果:区域性医疗中心三甲综合医院健康管理中心有其自身独有的优、劣势,机会与挑战并存。结论:在新形式下,区域性医疗中心三甲综合医院健康管理中心面临的竞争日益激烈,但机会和挑战并存,要充分发挥优势并利用机会,克服劣势并回避威胁。有效运用合理的发展策略,强化内部管理,做好质量把关,转变服务理念,提高服务质量,延伸后续服务,在占领市场的同时不断提高目标人群的满意度。

氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的探讨氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法分别应用2.0、1.5、1.0、0.5mg/mL氧化苦参碱体外培养人胃癌细胞SGC-7901,分别于培养24、48、72h后以倒置显微镜观察细胞形态学改变,采用MTT法观察不同浓度和作用时间下氧化苦参碱对SGC-7901细胞的抑制情况,并与对照组(不进行氧化若参碱处理)进行比较。结果 2.0 mg/mL浓度组氧化苦参碱作用人胃癌细胞株SGC-7901后24h抑制率[(35.500±0.014)%]高于1.5mg/mL组[(23.000±0.004)%]、1.0mg/mL组[(20.300±0.013)%]、0.5mg/mL[(15.700±0.007)%]和对照组(0),48h抑制率[(64.100±0.004)%]高于1.5mg/mL组[(45.400±0.013)%]、1.0mg/mL组[(44.700±0.031)%]、0.5mg/mL[(23.000±0.033)%]和对照组(0)(P<0.05),72h抑制率[(82.400±0.133)%]高于1.5 mg/mL组[(66.000±0.035)%]、1.0mg/mL组[(58.900±0.120)%]、0.5mg/mL[(34.900±0.024)%]和对照组(0)(P<0.05)。结论氧化苦参碱可抑制人胃癌细胞株SGC7901细胞增殖,细胞抑制率与氧化苦参碱浓度呈时间-剂量依赖性。

慢性胃炎患者外周血血小板计数及血小板/淋巴细胞之值与幽门螺杆菌感染之间的关系及其临床意义

目的:探讨慢性胃炎患者外周血血小板(PLT)计数及血小板/淋巴细胞之值(PLR)与幽门螺杆菌(Hp)感染之间的关系及其临床意义。方法:以本院2016年2月至2018年3月168例慢性胃炎患者及同期86例健康体检患者为研究对象,其中根据慢性胃炎患者是否感染Hp分为Hp阳性组(90例)和Hp阴性组(78例)。对比并分析3组患者外周血PLT、PLR及其与Hp感染之间的关系。对胃炎患者进行病理学分类,并对比Hp与不同胃炎炎症程度及癌前病变的关系。结果:Hp阳性组慢性胃炎患者PLT计数明显高于Hp阴性组及健康组(P<0.05)。Hp阳性组慢性胃炎患者PLR明显高于Hp阴性组及健康组(P<0.05)。不同胃炎Hp阳性率(萎缩性80.0%,非萎缩性60.1%)及PLT、PLR差异有统计学意义(P<0.05);炎症程度越高Hp阳性率(重度88.9%,中度71.2%,轻度52.4%)及PLT、PLR越高(P<0.05);有肠上皮化生、上皮内瘤变患者Hp感染阳性率及PLR、PLT与无肠上皮化生、无上皮内瘤变患者差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Hp感染会导致慢性胃炎患者PLT、PLR升高,并且Hp感染能够增加胃炎反应的炎症程度,在一定范围内促进了慢性胃炎发生肠上皮化生与上皮内瘤变。PLT、PLR及Hp对慢性胃炎的预后具有一定预测价值。