中华绒螯蟹不同部位挥发性物质的研究

本文旨在探明收获季节的中华绒螯蟹雌蟹不同部位在不同温度下挥发性物质的变化,并为加工提供参考。运用电子鼻和顶空固相微萃取-气质联用仪(HS-SPME-GC-MS)对挥发性物质变化进行检测和分析。电子鼻能够灵敏的检测加热前后气味的变化,新鲜雌蟹在加热到100℃和150℃气味发生明显变化,最终利用GC-MS从新鲜、100℃和150℃雌蟹的不同部分中鉴定出101种、130种和113种挥发性物质,主要有醇类、酮类、醛类、酚类、酯类、碳氢类等化合物。新鲜雌蟹土腥气味较重,主要是三甲胺等物质引起;100℃雌蟹呈现出浓郁香气,主要是壬醛、6-甲基-5-庚烯-2-酮等化合物引起;150℃雌蟹会表现出烤香味,是由2,5-二甲基吡嗪、2-乙酰基吡咯等引起。雌蟹在加热前后挥发性物质变化较大,电子鼻与HS-SPME-GC-MS结合使用后可以分析不同加热温度下雌蟹不同部位挥发性物质的变化。

宁波沿海陆源排污口假单胞菌属(Pseudomonas)分布特点

采用高通量454焦磷酸测序方法对宁波沿海2个重点排污口、8个一般排污口的20个站位水样进行分析,得到2011年3月、5月、8月、10月份各排污口假单胞菌属的分布情况。结果表明,宁波沿海陆源排污口中存在较多的假单胞菌属。在检出的假单胞菌属中,维罗纳假单胞菌(Pseudomonas veronii)和莓实假单胞菌(Pseudomonas fragi)的含量相对较多,分别占56.72%、13.904%;排污口中假单胞菌属的数量存在季节性差异,3月份、5月份假单胞菌的数量相对较多,8月份和10月份较少,推测与季节性温度变化有关;假单胞菌属的含量与排污口的主要污染物有关,氨氮含量较高的排污口假单胞菌属的含量更高。

宁波沿海陆源排污口拟杆菌(Bacteroidetes)分布的特点

采用高通量454焦磷酸测序方法对宁波沿海2个重点排污口、8个一般排污口的20个站位水样进行分析,得到2011年3月、5月、8月、10月份各排污口总体微生物以及拟杆菌纲的分布情况。通过对454测序结果分析,共成功鉴定24个门,主要包括变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和后壁菌门(Firmicutes)等。其中拟杆菌门的变化趋势与梭杆菌门(Fusobacteria)相似,均为随月份的增加而递增的趋势。在拟杆菌门下,共鉴定出3个纲3个目9个科27个属,4个采样月份大部分站点的优势属为黄杆菌纲(Flavobacteria),其次为拟杆菌纲(Bacteroidetes)、鞘脂杆菌纲(Sphingobacteria),通过聚类分析发现,拟杆菌门分布规律主要与排污口类型和季节有一定的关系。通过454测序检测到了极难培养的寡营养细菌鞘脂杆菌,也说明了454测序较传统微生物生态学研究方法的优势,同时针对普雷沃菌属(Prevotella sp.)及黄杆菌属(Flavobacterium sp.)两种具有代表性的属的分布情况进行了分析。

小球藻精油对人结肠癌细胞增殖和凋亡的作用

目的:分析小球藻精油的主要成分,研究其对人结肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用机制。方法:GCMS分析小球藻精油的挥发性成分,用不同含量的小球藻精油处理人结肠癌细胞(HT29细胞),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分析细胞周期。结果:小球藻精油的主要成分为十六烷(49.69%)、乙酸(17.51%)、乙酸乙酯(10.36%)、甲苯(9.95%)、正十四碳烷(7.96%)、2,4-二甲基环己醇(2.94%)等,其羟基及不饱和双键是抗肿瘤作用的结构基础。与对照组相比,小球藻精油呈剂量依赖性抑制HT29细胞增殖(P<0.01),并引起明显的细胞周期阻滞,将细胞周期阻滞在S(G2/M)期,从而促进细胞凋亡。结论:小球藻精油的挥发性成分和脂肪酸对结肠癌细胞具有增殖抑制效应及凋亡诱导效应,是一种具有发展潜力的抗结肠癌药物。

铁结合蛋白对镉损伤的MSCs分化的保护作用

目的:探讨铁结合蛋白对镉损伤的骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的保护作用。方法:试验被分成对照组、模型组和蛋白干预组。分组处理后,经成骨诱导培养,透射电镜观察细胞外基质形成及超微结构,茜素红染色观察钙结节形成能力,定量PCR法检测波形蛋白(Vimentin)、Run转录因子2(Runx2)、I型胶原蛋白(Col-1)基因m RNA表达水平。结果:MSCs经铁结合蛋白保护,成骨诱导培养21d后进行茜素红染色,细胞钙结节大小、颜色均显著性高于模型组。透射电镜观察MSCs超微结构损害明显得到缓解。Vimentin基因的表达水平先升高后降低(P<0.05),而模型组随时间的延长,表达水平显著性减少(P<0.01)。培养3d和6d的Runx2基因,培养6 d和12 d的Col-1基因都显著性高于模型组(P<0.05),与对照组一致。结论:铁结合蛋白能提高镉损伤的保护作用,促进MSCs向成骨细胞分化的能力,其作用可能是通过上调波形蛋白、Run转录因子2、Col-1基因的表达。

鱿鱼皮胶原蛋白对H_2O_2诱导MC3T3-E1损伤的修复作用

目的:探究秘鲁鱿鱼皮胶原蛋白增强MC3T3-E1细胞抗自由基损伤的作用机制。方法:将培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组、H2O2损伤组和胶原蛋白干预组;利用MTT法确定H2O2的半数抑制浓度,建立自由基损伤的细胞模型,通过试剂盒测定SOD活性和MDA含量来确定最佳的胶原蛋白添加量;在倒置显微镜下观察各分组的细胞形态;用流氏细胞仪检测细胞凋亡率,并分析细胞增殖周期;实时荧光定量RT-PCR测定HSP70和Bax的表达水平。结果 :与H2O2损伤组相比,胶原蛋白干预组SOD活性升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),G0-G1期细胞百分率减小(P<0.05),S期细胞百分率增大(P<0.05),Bax表达减弱,HSP70表达增强(P<0.05)。结论:摄入一定剂量的H2O2会导致MC3T3-E1成骨细胞的氧化损伤并促进其凋亡,而胶原蛋白可以改善此类损伤对MC3T3-E1细胞的影响。

基于454测序技术研究宁波沿海陆源排污口希瓦氏菌属的时空分布

基于454测序对宁波沿海10个陆源排污口在2011年的3月、5月、8月、10月四个月份的希瓦氏菌的分布进行了测定。结果表明:象山爵溪东塘排污口在3、8月份,象山西周工业园区综合排污口在5月份,距象山爵溪东塘排污口50 m以外的海域在5月份,象山墙头综合排污口、宁海颜公河入海排污口在8月份、象山石浦水产加工园区排污口在10月份均无希瓦氏菌属检出;而希瓦氏菌检出频数最高的是3月份的象山石浦水产加工园区工业排污口,出现频数为1 084次,其中已鉴定出的种有波罗的海希瓦氏菌Shewanella baltica(51)次,太平洋希瓦氏菌S.pacifica(46)次,希瓦氏菌ANA-3(1)次。从总体趋势来看,排污口处希瓦氏菌检出频数大于距排污口50 m以外的海域。