拮抗细菌诱导番茄植株抗灰霉病机理研究

拮抗细菌多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)W3菌株悬浮液及其滤液可以诱导番茄叶片对灰霉病(Botrytiscinerea)的系统抗性。W3及其滤液诱导处理后,植株叶内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性明显增强。诱导后1 d,PAL活性最大,是对照的3.8-3.9倍,6 d后仍为对照的2.5倍;POD和PPO诱导后3 d活性最高,分别比对照增加34.7％-54.1％和78.5％-78.7％,6 d后仍比对照高;SOD活性诱导后2d达高峰,6 d后稍高于对照。活性氧(O2-)产生速率诱导后1 d最大,比对照增加85.6％-88.6％,以后急剧下降,6 d后接近对照。此外,W3诱导后1 d或2 d,处理叶和上一叶位叶片水杨酸含量明显上升,分别是对照的2.6倍和1.6倍,这表明该拮抗细菌诱导的系统抗性可能与水杨酸介导有关。

灰葡萄孢拮抗细菌的种类鉴定及生长条件研究

经形态和生理生化鉴定,对灰葡萄孢(BotrytiscinereaPers.)拮抗能力强、防病效果好的3株细菌进行分类,W10为地衣芽孢杆菌[Bacilluslicheniformis(Weigmann)Chester],W3和Y2 11 1为多粘类芽孢杆菌[Paenibacilluspolymyxa(Praz mowski)Ashetal]。这2种对蔬菜灰霉病的高效拮抗菌为中国首次报道和应用。3株拮抗细菌的生长条件基本一致。最适培养时间为24～72h,最适生长温度是27～30℃,最适培养液pH值为7～8。

灰霉病生物防治研究进展

本文概述了国内外用于灰霉病生物防治的微生物种类及其生防机制的研究进展,同时提出了目前灰霉病等植物病害生防工作存在的主要问题及今后研究的重点。

拮抗细菌对番茄植株抗灰霉病的诱导

通过拮抗细菌多粘类芽孢杆菌W3、Y2和地衣芽孢杆菌W1 0诱导接种和灰霉病菌挑战接种试验 ,明确了 3菌株培养液和去菌液对番茄植株抗灰霉病的诱导作用。 3株拮抗细菌的诱导抗病效果为 2 3 .4%～ 64.5% ,其中W3诱导作用最强。W 3培养液及其去菌液处理后 5d ,诱导效果达最大值 ,且 1 2d后仍有诱抗作用。在 1 0 2 ～ 1 0 1 0 cfu/ml范围内 ,拮抗细菌的诱导活性随浓度增加而增强 ,以≥ 1 0 8cfu/ml的效果最好。拮抗细菌处理叶上部各叶片间诱抗效果无明显差异。

灰葡萄孢拮抗细菌在番茄植物体表的定殖

通过耐利福平标记菌株回收,研究了灰葡萄孢拮抗细菌(地衣芽孢杆菌W10和多粘类芽孢杆菌W3、Y2 11 1)在番茄叶片和果实上的定殖能力及其影响因素。试验表明,拮抗细菌在较高浓度(107～109cfu/ml)下,定殖时间可达10～15d。接种灰霉病菌对拮抗细菌的定殖有一定影响,特别是在接种灰霉病菌1d后接种拮抗细菌和同时接种灰霉病菌与拮抗细菌的情况下,拮抗细菌的定殖能力显著下降,提示该类拮抗细菌的防病效果要好于治病效果。此外,温度较高(25～35℃)、湿度较大(RH95%～100%)、12h光暗交替对拮抗细菌的定殖有利。

江苏省蔬菜灰葡萄孢生物学性状及致病力研究初报

灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)所致的灰霉病是多种蔬菜上普遍发生的病害,在许多地区已造成严重损失.据Tortora等研究,灰葡萄孢不同菌株在生物学性状和致病力方面有一定变化[1-2].该病菌在自然界分布广泛,菌源复杂,寄主植物繁多.本文对江苏省各地不同蔬菜上灰葡萄孢一般生物学特性和致病力差异进行了初步研究.

番茄灰霉病菌拮抗菌的筛选和应用

采集番茄等蔬菜叶、根和土壤样本 1 82份 ,分离获得对番茄灰霉病菌 (Botrytiscinerea Pers.)有抑制作用的拮抗菌5 8株。其中拮抗细菌 5 4株 ,占 93 .1 % ,且多为芽孢杆菌 (Bacillus) ;拮抗真菌中木霉 (Trichoderma)和粘帚霉 (Gliocladium)各 1株。根据抑菌圈法测定 ,拮抗细菌对灰霉菌的拮抗能力有显著差异 ,其中芽孢杆菌 Y2 - 1 1 - 1 菌株拮抗性最强且稳定。试验表明 :Y2 - 1 1 - 1 悬浮液对番茄灰霉病有较好的防治效果 ,室内叶片和果实的防效分别为 69.9%和 78.2 % ;大棚内对果腐的防效 ,喷施 1次与 2次的分别为 61 .7%～ 72 .1 %和 76.6%～ 85 .3 % ,明显优于 5 0 %速克灵 (2 0 0 0倍稀释液 )。

灰葡萄孢拮抗细菌的筛选

采集扬州、淮阴两地 1 6种常见植物的根部土壤、根和叶片样本 1 82份 ,分离纯化后得到细菌 6 32株 ,抑菌圈法测定对灰葡萄孢有拮抗性的 5 8株 ,拮抗性稳定的为 1 3株。其中拮抗性最强的 Y2 - 1 1 - 1菌株为芽孢杆菌 ,抑菌圈直径达 2 9.7mm。接种试验表明 ,Y2 - 1 1 - 1对番茄叶片和果实灰霉病的防效分别达 6 8.7%和 75 .0 %。部分菌株对其他重要植物病原真菌也有一定的拮抗作用。

水稻植株对纹枯病菌侵染反应及其机理的初步研究

选择抗感水稻品种 ,就 5个不同部位对纹枯病菌 ( Rhizoctonia solani)侵染的反应及其机理进行了研究。结果表明 :接种 5d后叶鞘内侧的病斑扩展最快 ,其次是叶片和叶鞘外侧 ,叶片基部仅在边缘叶肉细胞产生褐色短线条斑 ,叶枕则不发病。不同部位表面蜡质含量测定表明 :叶鞘内侧蜡质含量最低 ,仅为 0 .0 0 97mg/cm2 ;叶枕部最高 ,为 0 .61 4 4mg/cm2 ,是叶鞘内侧的 63.3倍。通过电镜观察看出 ,叶鞘内侧表皮细胞光滑、无硅化细胞存在 ;叶片和叶鞘外侧硅化细胞小而稀疏 ;叶片基部和叶枕的硅化细胞大而密。此外 ,叶枕部角质层最厚 ,达 7.60 μm;其次是叶片、叶鞘外侧和叶片基部 ;叶鞘内侧角质层最薄 ,只有 1 .1 2 μm。

番茄早疫病菌培养滤液的毒性及不同品种对滤液的敏感性

番茄早疫病菌培养滤液的毒性及不同品种对滤液的敏感性１童蕴慧１徐敬友２袁素玲（１扬州大学农学院植保系，扬州２２５００９；２江苏省邳州市植保站，邳州２２１３００）关键词：番茄早疫病菌；毒素；番茄品种；敏感性中图法分类号：Ｓ６４１．２ＴｏｘｉｃｉｔｙｏｆＣ...

灰葡萄孢拮抗细菌营养与发酵配方的研究

对新筛选的灰葡萄孢生防细菌即地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)W10和多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)W3、Y2-11-1的营养要求及发酵培养基配方进行了研究。结果表明:3株拮抗细菌的最佳发酵配方,菌株W10为1%麦芽糖、4%黄豆饼粉、0.2%NaNO3、0.02%K2HPO4和0.05%酵母膏,菌株W3为2%蔗糖、4%黄豆饼粉和0.4%酵母膏,菌株Y2-11-1为1%麦芽糖、2%黄豆饼粉、0.2%NaNO3、0.02%K2HPO4以及0.2%酵母膏。

番茄早疫病菌生物学特性及致病力研究

在ＰＳＡ上菌丝灰白色至灰褐色，部分菌株可产生黄色素渗入培养基。菌落生长５ｄ直径为５４～７０ｍｍ，最适生长温度为２３～２８℃，最适ｐＨ为６～８。菌株通常在ＰＳＡ上不产孢，但在玉米粉培养基上，经光照和变温处理，产孢较多。分生孢子在２５℃、湿润条件下萌发率较高。不同地区菌株间致病力有明显差异。

灰葡萄孢分生孢子萌发的条件研究

灰葡萄孢分生孢子萌发的最适温度为 1 9℃ ,萌发率达 94 .3 %;在空气较多的环境中孢子萌发率较高 ,达87.8%,淹水则不利于孢子萌发 ,萌发率仅为 5.8%。 1 %蔗糖、1 %葡萄糖、1 %乳糖、1 %硫酸铵、0 .2 mol/ L磷酸二氢钾、番茄汁液都可以促进分生孢子萌发 ,以 1 %蔗糖效果最好。分生孢子在 p H3～ 9的条件下均可萌发 ,以 p H5最为适宜。孢子悬浮液在高浓度 ( 6× 1 0 5以上 )下会抑制孢子萌发 。

菌种灵对水稻重要病原菌的毒力测定

菌种灵即二硫氰基甲烷是一种高效、广谱杀菌剂,它对许多病原物都有很好的杀灭效果。为了明确该药剂对水稻重要病原菌的毒力作用,更好地使之用于水稻病害的防治,我们受生产厂家之委托,进行本试验。一、材料与方法1.供试药剂1.1 14%菌种灵乳油。

水稻粒黑腐病病原鉴定和侵入途径的初步研究

江苏省新洋、大中等农场出现的水稻“黑米”是一种细菌性病害 ,与日本报道的水稻粒黑腐病相似 .自病粒分离获得细菌 1 8株 ,人工接种其症状与田间相同 ,再分离菌株的细菌学性状与接种菌株基本一致 .经细菌学鉴定 ,病原菌为欧文氏菌 ( Erwinia) .不同时期不同方法接种试验表明 ,灌浆期注射接种可获得较高的发病率 ,平均达 78.9% ,而其他方法接种发病率均在 1 0 %以下 。

棉铃黑果病菌产孢方法研究

棉铃黑果病是棉花铃期的重要病害,常使棉铃形成僵果,不能正常吐絮,严重影响产量和质量。棉铃黑果病菌(Diplodia gossypina)在PDA上常规培养下不能产孢,且菌丝接种成功率又较低。因此探索病菌的产孢方法,对病害的侵染规律及防治研究具有重要意义。

地衣芽孢杆菌对苹果轮纹病菌和炭疽病菌的抑制及其对贮藏期苹果轮纹病的防治作用

为了明确地衣芽孢杆菌W10及其抗菌蛋白对苹果贮藏期重要病害的防治作用,进行了对苹果轮纹病菌、炭疽病菌的抑制以及对轮纹病的防治试验。结果表明,W10菌液、培养滤液、抗菌蛋白对2种病菌的形态、菌丝生长、产孢和分生孢子萌发都有明显的破坏或抑制作用,其中抗菌蛋白的作用最强,5倍稀释液可以完全抑制病菌菌丝生长,20倍液对病菌产孢或分生孢子萌发的抑制率均达100%。菌液、培养滤液与抗菌蛋白对病菌菌丝形态的破坏作用相似,都可以使菌丝细胞原生质收缩、肿大呈泡囊状、细胞壁破损导致原生质外泄,甚至菌丝断裂。W10细菌液或抗菌蛋白能够明显抑制果实病斑的扩展,用其浸果后接种病菌,贮藏90 d时,抗菌蛋白对轮纹病的防效仍达到50.0%,与多菌灵效果相当。

水稻纹枯病菌胞壁降解酶的产生及致病作用

水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solaniKühn)在改良的Marcus培养液中能产生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(Cx)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)5种胞壁降解酶,其中PG、Cx和PMG活性较高,而PGTE和PMTE活性很低。病菌产生胞壁降解酶的最佳条件是:在pH5培养液中28℃下静置培养6 d。病菌接种水稻叶鞘后也能显著产生PG、Cx和PMG等胞壁降解酶,并且病斑外侧褪绿部酶活最高,平均为对照(健康部)的3.4倍;其次是褐色部,酶活总量平均为对照的2.9倍;病斑中央枯白部酶活较低,但明显高于对照。这一结果提示,在病菌侵染和扩展过程中胞壁降解酶起重要作用。果胶酶(PG、PMG)和纤维素酶(Cx)无论是单独处理还是混合处理,对水稻叶鞘都具有显著地损伤细胞膜和浸渍组织的作用。

地衣芽孢杆菌W10抗菌蛋白的分离纯化及其理化性质研究

地衣芽孢杆菌W10是一株对多种植物病原菌有拮抗作用的生防细菌,其产生的抗菌物质主要是抗菌蛋白。细菌培养滤液用30%硫酸铵盐析,透析后再经SephadexG-75层析柱纯化得到一种具有抑菌活性的蛋白。该抗菌蛋白的分子量为46049.2Da;等电点为6.71;含有糖基,含糖量为6.83%;含有脯氨酸或羟脯氨酸;不含脂基。这种蛋白在pH6～12范围内均具有抑菌作用,pH6时活性最大;对热稳定,100℃以下水浴20min,抑菌活性与对照相比均在对照的80%以上,121℃蒸汽处理20min,活性虽有所下降,但仍达对照的65.7%;对胰蛋白酶和蛋白酶K不敏感,酶处理后蛋白的抑菌活性分别为对照的98.7%和98.3%;对氯仿和紫外线也不敏感,处理后活性仍达对照的91.0%和98.6%。