基于双衍生-串联质谱技术检测类固醇激素研究

目的:建立一种双衍生法-结合串联质谱技术同时检测人血清中18种类固醇激素的方法。方法:血清样本采用羟胺和1,2-二甲基咪唑-5-磺酰氯对进行衍生处理,采用液相色谱-串联质谱法正离子选择离子监测模式(SRM)下检测,色谱柱为Kinetex■C_(8)(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱(0~0.5 min,35%B;0.5~5 min,35%B→100%B;5.0~5.1 min,100%B→35%B;5.1~7 min,35%B),柱温40℃,流速0.4 mL·min^(-1),进样量20μL,采集时间为6 min。结果:18种类固醇激素的线性相关系数均>0.99,回收率均在85%~115%,精密度RSD均<15%。用该方法成功地检测了156份健康人群受试者血清样本(男性75例,女性61例)并制定了参考区间。结论:该方法可用非固相萃取法同时检测孕烯醇酮、17-羟孕烯醇酮、孕酮、17-羟孕酮、皮质酮、皮质醇、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、醛固酮、睾酮、雄烯二酮、脱氢表雄酮、硫酸脱氢表雄酮、皮质素、18-羟皮质酮、雌酮、雌二醇、雌三醇等18种类固醇激素。