卵裂期胚胎复苏后培养至囊胚移植对RIF患者妊娠结局的影响

目的探讨对于反复种植失败(RIF)的患者,解冻卵裂期胚胎继续培养至囊胚移植能否改善患者的妊娠结局。方法回顾性分析2015年1月至2022年12月在我院生殖医学科接受冻融胚胎移植(FET)治疗的587例RIF患者的临床资料,根据不同的胚胎移植方案分为3组:解冻卵裂期胚胎继续培养至囊胚移植的为A组(n=45),解冻卵裂期胚胎移植的为B组(n=299),解冻囊胚移植的为C组(n=243);同时,将C组按解冻的囊胚发育时期分为移植第5天囊胚组(C-D5组,n=183)和移植第6天囊胚组(C-D6组,n=60),比较各组HCG阳性率、种植率、临床妊娠率、流产率、活产率等妊娠结局以及平均孕周和新生儿出生体重。结果选择解冻卵裂期胚胎继续培养至囊胚移植方案的患者初始有56例,11例患者(19.64%)因囊胚培养失败而取消周期。妊娠结局比较中,与B组相比,A组和C组的HCG阳性率(62.22%、57.61%vs.45.15%)、种植率(49.12%、44.48%vs.33.07%)及活产率(48.89%、44.03%vs.33.78%)均显著升高(P<0.05),3组间的流产率无显著差异(P>0.05);与C-D6组相比,A组和C-D5组的种植率(49.12%、48.70%vs.29.33%)、临床妊娠率(57.78%、56.28%vs.38.33%)及活产率(48.89%、49.18%vs.28.33%)均显著升高(P<0.05)。新生儿出生情况比较,A组的新生儿出生体重显著高于B组和C组(P<0.05),3组间的平均孕周无显著差异(P>0.05);A组和C-D6组新生儿出生体重显著高于C-D5组(P<0.05)。结论解冻卵裂期胚胎继续培养至囊胚移植可能在一定程度上能够改善RIF患者的妊娠结局。在FET周期中,若患者有D5囊胚冻存,建议优先解冻移植;若无冻存D5囊胚,可以尝试解冻卵裂期胚胎继续培养囊胚后移植,以获得较好的临床结局。

刚地弓形虫硫氧还蛋白基因的克隆 表达及鉴定

目的克隆刚地弓形虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)基因,构建原核表达载体,通过诱导表达和纯化蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体。方法采用PCR技术扩增刚地弓形虫Trx基因,克隆至原核表达载体p ET-28a(+)中,转化大肠埃希菌(E.coli)Rosetta,用IPTG诱导目的蛋白表达,采用镍亲和层析法获得纯化蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体。利用Western blotting技术鉴定多克隆抗体的特异性。结果成功从刚地弓形虫c DNA中扩增出Trx目的基因,构建了Trx/p ET-28a(+)重组质粒,获得抗Trx重组蛋白的多克隆抗体。Western blotting技术检测出弓形虫Trx蛋白的特异性条带。结论用制备的兔抗Trx多克隆抗体能检测弓形虫Trx在速殖子内的表达,为进一步深入研究刚地弓形虫Trx功能奠定了基础。