维生素C及E联合作用对体外大鼠胚胎中脑神经细胞分化和增殖的影响

目的:观察维生素C,维生素E和维生素C+维生素E联合后对胚胎中脑神经细胞生长发育的影响。方法:实验于2006-03/04在江苏大学医学院研究中心细胞培养室完成。采用16d大鼠胚胎中脑神经细胞体外培养方法,观察不同剂量的维生素C(5,10,25,50μmol/L),维生素E(10,25,50,100μmol/L)和维生素C、维生素E联合作用(维生素C25μmol/L+维生素E50μmol/L,维生素C50μmol/L+维生素E100μmol/L),培养10d后收集细胞,并利用图像分析细胞形态的变化、蛋白质、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性指标。结果:①维生素C、维生素E和维生素C+维生素E联合能促进体外培养中脑神经细胞突起生长,集落数增多。②与正常对照组比较,维生素C10,25μmol/L组、维生素E10,25,50μmol/L组、维生素C25μmol/L+维生素E50μmol/L组神经细胞总蛋白相对含量明显增加。③与正常对照组比较,维生素C10,25μmol/L组、维生素E25,50μmol/L组、维生素C25μmol/L+维生素E50μmol/L组神经细胞超氧化物酶活性增加,丙二醛含量降低。④维生素C50μmol/L组、维生素E100μmol/L组和维生素C50μmol/L+维生素E100μmol/L组超氧化物酶活性低于正常对照组,丙二醛含量高于正常对照组。结论:维生素C、维生素E和维生素C+维生素E联合剂量在一定范围内能够明显提高中脑神经细胞的抗氧化能力,同时能促进胚胎中脑神经细胞分化和增殖作用。

维生素C对中脑神经细胞生长影响的研究

目的：研究维生素Ｃ对中脑神经细胞生长功能的影响。方法：采用大鼠胚胎中脑神经细胞进行体外培养，观察不同浓度（０．００１～１００ｍｏｌ／Ｌ）维生素Ｃ（ＶＣ）对中脑细胞生长发育的影响。结果：培养５天的细胞存活数在０．００１－０．１ｍｏｌ／Ｌ，ＶＣ组与对照组之间无明显差别，１０ｍｏｌ／ＬＶＣ组中脑神经细胞集落数目、长度、胞体面积、细胞蛋白质相对含量明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），而５０～１００ｍｏｌ／ＬＶＣ组存活的细胞数明显降低。结论：１０ｍｏｌ／ＬＶＣ对体外培养中脑神经细胞的生长发育有一定的促进生长分化作用。

硒对体外大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖和分化的影响

目的 :观察硒对体外大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖和分化的影响。方法 :用Lowry法检测不同浓度硒作用下培养细胞的总蛋白含量 ,显微镜下观察神经细胞的形态并对集落形成率进行比较。结果 :低浓度 (1 0 μmol/L)的硒对神经细胞的增殖和分化有明显促进作用而高浓度的硒 (≥ 5 0 0 μmol/L)对其有抑制作用。 结论 :硒对神经细胞的增殖和分化具有双重性影响 ,其生物学作用性质与剂量有关。

锌对大鼠胚胎脑神经元细胞生长发育作用研究

目的 观察锌对脑细胞生长发育的作用。方法 采用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行体外培养。结果 锌能促进体外培养中脑神经元细胞突起生长 ,突起数增多 ,神经元的存活数和神经元胞体的直径和面积增加。用流式细胞术分析证明 ,神经元蛋白质含量增高。

稳恒磁场对大鼠胚胎脊髓神经细胞影响

目的 观察稳恒磁场对体外培养成年大鼠胚胎脊髓神经细胞生长发育的影响。方法 采用绘制细胞生长曲线的四氮甲基唑蓝 (MTT)法检测和脂质过氧化物的方法 ,了解不同强度的稳恒磁场对体外培养成年大鼠胚胎脊髓神经细胞生长的影响。在相差显微镜下观察细胞生长发育情况 ,并测定其细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。结果 1～10mT的稳恒磁场对大鼠胚胎脊髓神经细胞无抑制生长作用 ,当磁场的强度达到 5 0～ 2 0 0mT时其作用才表现出来 ,随着强度的加大 ,其抑制作用增强。结论 一定强度的稳恒磁场对成年大鼠胚胎脊髓神经细胞具有抑制作用 ,且存在强度效应关系。

神经生长因子对大鼠胚胎脊髓神经细胞的作用

目的:研究神经生长因子(neurongrowthfactor,NGF)对大鼠胚胎脊髓神经细胞的作用。方法:在培养孕18d大鼠胚胎脊髓神经细胞中加入NGF,通过培养细胞并计数存活的脊髓神经细胞集落数,检测超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活力、丙二醛的含量,并观察NGF对脊髓神经细胞生长发育的影响。结果:NGF可促进脊髓神经细胞分化、增殖。当NGF为10.0～100.0μg/L时SOD活力显著性高于正常对照组(P<0.01),NGF为1.0～100μg/L时丙二醛含量没有明显变化,能维持丙二醛含量的平衡,当NGF浓度为200μg/L时丙二醛含量明显增高为(1.33±0.05)μmol/g,与对照组(0.98±0.01)μmol/g比较,差异有显著性意义(F=6.89,P<0.05),不能维持丙二醛含量的平衡。培养14d后脊髓神经细胞体较大、突起较长,脊髓神经细胞的数量也明显增高。结论:NGF能促进脊髓神经细胞生长发育,增加脊髓神经细胞的胞体和突起长度,增强脊髓神经细胞内SOD活力,丙二醛含量降低。

丙烯腈对体外培养鼠胚胎肢芽细胞增殖分化的研究

目的:研究丙烯腈(acrylonitrile,ACN)对大鼠胚胎肢芽细胞增殖分化的影响。方法:13d的大鼠胚胎脊髓组织,经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度的ACN0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0μg/ml,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较。结果:各组ACN明显抑制胚胎肢芽细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29μg/ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42μg/ml,均显示剂量效应关系。结论:ACN能抑制胚胎肢芽细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。

稳恒磁场强度对小鼠骨髓细胞和精母细胞的遗传效应研究

稳恒磁场强度为 40mT、 5 0mT、 60mT、 10 0mT ,作用 30d后测定分析小鼠初级精母细胞染色体畸变率和骨髓嗜多染红细胞微核率。稳恒磁场强度为 40～ 60mT时 ,对小鼠初级精母细胞染色体畸变的发生无明显影响 ;稳恒磁场强度为 10 0mT时 ,可致小鼠初级精母细胞染色体畸变、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率显著增高。

稳恒磁场对大鼠胚胎脊髓神经细胞发育的影响

目的研究稳恒磁场对大鼠胚胎脊髓神经细胞发育的影响。方法观察1.0、10.0、50.0、100.0、200.0mT的磁场对原代培养的Wistar大鼠胚胎脊髓神经细胞形态、分化、增殖、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和蛋白质含量的影响。结果50.0～200.0mT组胚胎脊髓神经细胞分化、增殖受到抑制,细胞有聚集现象,部分细胞脱落,集落形成率明显减少,细胞体积小,细胞内MDA含量增加,SOD活力下降和蛋白质相对含量降低。结论50.0～200.0mT稳恒磁场可促进脊髓神经细胞脂质过氧化过程而致发育期神经系统的损伤。

稳恒磁场对大鼠胚胎肢芽细胞发育毒性的研究

目的 研究稳恒磁场对肢芽细胞增殖和分化的强度效应关系。方法 利用大鼠胚胎肢芽细胞进行原代培养 ,观察培养物经不同强度的稳恒磁场 ,对细胞增殖和分化的影响 ,并利用图像分析细胞形态的变化。结果 各组磁场强度能明显抑制肢芽细胞增殖和分化 ,集落形成率明显减少 ,并显示强度效应关系。拟合细胞分化和增殖抑制曲线 ,计算得大鼠半数分化抑制强度 (ICD50 )为 35mT ,半数存活抑制强度 (IVD50 )为 48mT。结论 抑制细胞分化、增殖可能是稳恒磁场强度致发育危害的结果。

丙烯酰胺对胚胎脊髓神经细胞增殖分化影响

目的研究丙烯酰胺(ACR)对胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响。方法利用大鼠胚胎脊髓神经细胞进行原代培养,从细胞形态学及细胞计数学角度观察不同浓度ACR对细胞生长与分化的影响;同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并与对照组进行比较。结果150,300μg/ml的ACR对大鼠胚胎脊髓神经细胞无抑制增殖和分化作用,当ACR浓度达到450,600,750μg/ml时作用才显现,并随着浓度的加大,其抑制作用增强。结论ACR能抑制胚胎脊髓神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成、DNA有关。

丙烯腈对鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响

目的研究丙烯腈(ACN)对大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响。方法16 d的大鼠胚胎脊髓组织经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度的ACN 0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0μg/ml,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较。结果各组ACN明显抑制胚胎脊髓神经细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29μg/ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42μg/ml,均显示剂量-效应关系。结论ACN能抑制胚胎脊髓神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。

维生素B_6对大鼠胚胎中脑神经细胞分化的影响

目的:研究维生素B6(VB6)对大鼠胚胎中脑神经细胞分化的增殖效应关系,并探讨其中的机制.方法: 以大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养,观察不同浓度的维生素B6 0.001,0.01,0.1,1.0,10.0,100.0 μmol/L,对细胞分化和增殖的影响,并利用图像分析细胞形态的变化、硫代巴比妥酸测定丙二醛(MDA)和流式细胞技术分析蛋白总量.结果: VB6能促进体外培养中脑神经细胞突起生长,突数增多,神经元的存活数和神经元胞体的直径及面积增加,细胞总蛋白相对含量明显增加.结论: 0.1～10.0 μmol/L的VB6对体外培养胚胎中脑神经细胞分化、增殖具有一定的促进作用.

硫酸镍对大鼠胚胎海马神经细胞发育毒性的研究

目的 探讨硫酸镍 (NiSO4)对大鼠海马神经细胞毒作用及其机制。方法 对海马神经细胞进行原代培养 ,观察不同浓度的NiSO40 0 0 1、0 0 1、0 1、1 0、10 0、10 0 0 μmol/L,对细胞增殖和分化的影响 ,并利用图像分析细胞形态的变化。结果 NiSO4明显抑制海马神经细胞分化和发育 ,集落形成率明显减少 ,细胞体积小 ,拟合细胞分化和增殖抑制曲线 ,计算得海马神经细胞半数分化抑制浓度 (ICD50 )为 9 5 μmol/L ,半数存活抑制浓度 (ICV50 )为 3 5 μmol/L。并显示浓度效应关系。结论 NiSO4抑制细胞分化、增殖可能是与其抑制蛋白质合成 ,并导致脂质过氧化有关。

丙烯腈对小鼠肺成纤维细胞增殖分化的影响

目的研究丙烯腈(ACN)对小鼠肺成纤维细胞增殖分化的影响。方法将ICR小鼠肺成纤维细胞纯化后进行细胞培养,加入二甲亚砜和浓度分别为0.01、0.5、1.0、10.0、50.0、100.0、200.0μg/ml的ACN,作为对照组和染毒组,每组10个平行样。从细胞形态学角度,通过细胞计数,观察细胞生长与分化的过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果浓度为0.01、0.5、1.0、10.0μg/ml的ACN对小鼠肺成纤维细胞生长无抑制作用,而浓度达到50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞的增殖和分化明显受到抑制,集落形成率明显减少,细胞体积变小,且随着ACN浓度的加大,其抑制作用增大。当ACN剂量为50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞相对蛋白质含量低于对照组(P<0.05)。当ACN剂量为10.0、50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞MDA的含量高于对照组(P<0.01)。当ACN剂量为10.0、50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞SOD活力低于对照组(P<0.05)。结论ACN能抑制小鼠肺成纤维细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。

碱性成纤维细胞生长因子对培养大鼠胚胎脊髓神经细胞的作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对大鼠胚胎脊髓神经细胞的作用。方法在培养孕 18d的大鼠胚胎脊髓神经细胞中加入bFGF ,通过培养细胞并计数存活的脊髓神经细胞集落数 ,检测超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛的含量 ,并观察bFGF对脊髓神经细胞生长发育的影响。结果bFGF可促进脊髓神经细胞分化、增殖 ,SOD活力、丙二醛含量明显变化 ,脊髓神经细胞胞体较大、突起较长 ,培养 14d后脊髓神经细胞的数量也明显增高。结论bFGF能促进脊髓神经细胞生长发育 ,增加脊髓神经细胞的胞体和突起长度 ,增强脊髓神经细胞内SOD活力 ,降低丙二醛含量。

神经生长因子对胚胎中脑神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑细胞作原代微团培养，研究了不同浓度的神经生长因子（2．5S）对中脑细胞分化的影响。结果表明，微团中的集落形成率明显增加，并且显示了剂量—效应关系。神经生长因子（2.5S）能促进中脑细胞的生长。

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养（微团试验）研究氟化钠（ＮａＦ）的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经纤维减少等形态学变化，其中前者呈剂量—效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎神经细胞的分化，半数分化抑制深度（ＩＣＤ５０）为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制深度与半数分化抑制浓度的比值（Ｖ／Ｄ）大于５．０。表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理。

神经生长因子对醋酸铅毒性拮抗效应的研究

目的 :研究神经生长因子 (NGF 2 .5S)对不同浓度的醋酸铅神经毒性拮抗效应 ,观察细胞分化以及细胞形态的影响 ,同时进行了醋酸铅的毒性试验和细胞分化的比较。方法 :利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养。观察不同浓度 ( 0 .0 0 1～ 5 0 μmol/L)醋酸铅对中脑细胞生长发育的影响。 结果 :染毒组的细胞集落数形成率明显降低 ,细胞体积小 ,细胞间神经纤维减少 ,表明醋酸铅可抑制胚胎中脑神经细胞的分化 ,其半数分化抑制浓度为 1 .0 μmol/L ,半数增殖抑制浓度为 2 0 .0 μmol/L ,并显剂量 效应关系。当加入NGF 2 .5S后 ,在同浓度的醋酸铅情况下 ,微团中的集落形成率有明显的增加。结论 :NGF 2 .5S对醋酸铅的神经毒性有一定的拮抗效应。

碱性成纤维细胞生长因子对胚胎神经细胞存活与生长的影响

本文利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃＦｉｂｒｏｂｌａｓｔＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ），研究ｂＦＧＦ对细胞生长和分化的影响，并利用图象分析细胞形态的变化。结果表明ｂＦＧＦ可促进微团中的集落形成率明显增加，并显示量效应关系。图象显示ｂＦＧＦ可促进细胞神经突起增多，而且有丰富的神经纤维连结成网络状。认为ｂＦＧＦ能促进中脑细胞生长和分化的功能。