青春初期女性行卵巢组织冷冻过程中发现成熟卵母细胞一例

一例15岁霍奇金淋巴瘤患者行一个疗程化疗后来浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心进行生育力保存。在卵巢组织冷冻保存期间发现1枚MⅡ成熟卵母细胞和3枚生发泡期卵母细胞。3枚未成熟卵母细胞行体外成熟培养未获得成熟卵子,最终玻璃化冷冻1枚成熟卵母细胞和12片卵巢皮质。提示对于青春期性腺轴反馈已建立患者,卵巢组织冷冻不是唯一的生育力保存方式,可考虑促排卵取卵冻存卵母细胞,或根据月经周期判断处于排卵期者,在卵巢组织冷冻前尝试穿刺取卵获得自然周期成熟卵母细胞行卵母细胞冷冻,从而提高患者生育力保存概率。

女方卵巢低反应-男方精液正常人群行ICSI改善临床结局分析

目的评价女性卵巢低反应患者是否可通过卵泡浆内单精子注射技术(ICSI)来改善临床结局。方法收集2015年1月至2017年12月因女方卵巢低反应而男方精液正常行ICSI的1672个周期作为ICSI组。选取同期的卵巢低反应而男方精液正常行体外受精(IVF)的3117个周期作为IVF组。回顾性比较两组的受精率、优胚率、妊娠率、着床率及活产率。结果ICSI组女方取卵年龄比IVF组高(P<0.05)。两组的穿刺卵泡数、获卵数差异无统计学意义(P>0.05)。ICSI组两原核(2PN)受精率75.4%(2141/2841)及2PN胚胎数(1.5±0.7)明显高于IVF组69.4%(3941/5676)、(1.4±0.7)(P<0.05)。ICSI组2PN优质胚胎数(1.2±0.5)、2PN优质胚胎率43.4%(946/2181)以及每获卵2PN优质胚胎率33.3%(946/2841)略低于IVF组(1.2±0.5)、45.3%(1987/4389)、35%(1987/5676),差异均无统计学意义(P>0.05)。ICSI组移植胚胎数、移植优胚数、移植优胚率均略高于IVF组,差异均无统计学意义(P>0.05)。ICSI组妊娠率、着床率、活产率略低于IVF组,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论ICSI受精能够一定程度提高胚胎受精率,但是无法改善妊娠结局。

高龄女性新鲜胚胎移植对临床结局的影响

目的探讨≤35岁、36~37岁及≥38岁患者,在移植2枚卵裂期胚胎时临床妊娠率、胚胎着床率、活产率、妊娠天数及新生儿体重等的差异.方法回顾性分析2012年1月1日至2016年12月31日,第一次在浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心接受常规长或短方案体外受精/卵母细胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗,移植2枚胚龄为3d胚胎的新鲜周期资料,共3295个周期.按患者年龄分为三组:≤35岁(A组)、36~37岁(B组)及≥38岁(C组),比较三组间的临床妊娠率、胚胎着床率、流产率、活产率等临床结局,以及新生儿体重、早产率、多胎率、新生儿性别比例等新生儿结局差异.结果三组临床妊娠率、胚胎着床率、早产率(<37周)及活产率差异均有统计学意义(P<0.01).A组的临床妊娠率与活产率显著高于C组(P<0.05),但与B组无明显差异(P>0.05),而A组的胚胎着床率与多胎妊娠率则显著高于B组与C组(P>0.05),此外,A组的早产率显著低于C组(P<0.05),但与B组无明显差异(P>0.05).三组早期流产率、晚期流产率、妊娠天数、胎儿性别比例、胎儿体重及低出生体重儿比率上差异均无统计学意义(P>0.05).再将三组根据移植胚胎的质量进行分组比较.当移植的两个胚胎均为优质胚胎时,A组与B组在临床妊娠率、胚胎着床率与活产率上无明显差异,均显著高于C组.但三组在流产率与多胎率上无明显差异.当移植的两个胚胎为一个优质胚胎和一个普通胚胎时,A组的临床妊娠率、胚胎着床及活产率显著高于B组及C组(P<0.05).但三组在早产率、妊娠天数、胎儿性别比例、胎儿体重及低出生体重儿比率上均无显著差异(P>0.05).结论对于年龄≥38岁的高龄女性患者移植两个胚胎可保持较好的妊娠率、着床率及活产率.而对于年龄36~37岁的高龄女性患者,需要综合考虑胚胎质量来决定移植胚胎个数,可选择单优质胚胎移植或优质胚胎与普通胚胎组合移植,来保持妊娠率及活产率,并降低多胎率.

复发性自然流产患者绒毛中滋养层细胞的变化

目的研究复发性自然流产(RSA)患者早期绒毛中细胞滋养层细胞中尾侧型同源转录因子2(CDX2)、GATA结合蛋白3(GATA3)、转录因子活化蛋白2C(TFAP2C)与肿瘤增殖抗原67(Ki67)表达的变化。方法选择RSA患者8例为RSA组,选择同期非意愿早期妊娠,要求行人工流产术的正常早孕者8例为正常流产组。应用免疫组化法检测两组绒毛组织中CDX2、GATA3、TFAP2C与Ki67蛋白的表达。结果RSA组免疫组化结果显示,CDX2和Ki67特异性表达于细胞滋养层细胞中,GATA3、TFAP2C主要表达于细胞滋养层细胞,部分合体滋养层细胞也有表达。与正常流产组比较,CDX2、GATA3与Ki67在RSA组的滋养层细胞中表达均明显减少(t分别=10.49、11.59、10.71,P均<0.05),而TFAP2C在两组滋养层细胞中的表达无明显差异(t=0.50,P>0.05)。结论RSA滋养细胞中的CDX2、GATA3与Ki67表达异常下调,滋养层细胞增殖和分化功能异常,可能是导致复发性自然流产的重要原因。

将规则内化为责任

高中是学生建立规则意识的重要阶段，然而现如今的独生子女从小娇生惯养、“呼风唤雨”，被全方位呵护之下形成了以自我为中心的思维方式。于是，他们在班集体生活中，缺乏对规则的敬畏，很少意识到自己应承担的责任。

腹腔镜完整手术分期在早期子宫内膜癌的应用

子宫内膜癌是女性生殖道三大恶性肿瘤之一，占女性全身恶性肿瘤的7％，占女性生殖道恶性肿瘤的20％～30％。近年来发病率在世界范围内呈上升趋势。美国癌症学会统计，2007年美国有39080例子宫内膜癌新发病例，并有7400例患者死于子宫内膜癌。随着人均寿命延长及合并症如高血压、糖尿病等的增多，其死亡率增加了1倍。90％子宫内膜癌患者的早期症状为不规则阴道出血，多数患者能早期发现早期就诊，因此，75％的患者就诊时疾病处于早期阶段。子宫内膜癌的首选治疗为手术，手术病理结果为进一步治疗提供了依据。而微创手术近年来被建议应用于子宫内膜癌的治疗。

17β雌二醇在激素替代冻胚移植中的应用及临床结局分析

目的探讨17β雌二醇在激素替代内膜准备冻融胚胎移植（FET）中的应用并与戊酸雌二醇进行比较，探讨不同内膜厚度及雌激素（E2）水平对临床结局的影响。方法收集2012年1至6月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心行激素替代（HRT）内膜准备FET周期1072个，根据使用的药物类型分两组：A组：仅使用戊酸雌二醇准备内膜（798个周期）；B组：如仅使用戊酸雌二醇不能达到满意的内膜厚度及E2水平，或反复移植失败，则采用戊酸雌二醇＋17β雌二醇准备内膜（274个周期），比较两种内膜准备方案患者的基本情况及临床结局的差异。比较内膜厚度及E2不同分层临床结局的差异，并将B组内膜〈7mm与2011年相同内膜厚度的患者比较。结果A组第1次移植比例、内膜准备周期的平均内膜厚度均显著高于B组，并且〈7mm比例B组8．8％，A组2．4％，差异有统计学意义。但两组总临床妊娠率（54．8％比52．9％）、胚胎种植率（38．1％比35．8％）差异无统计学意义。随内膜增厚，胚胎种植率和临床妊娠率呈上升趋势；不同E2水平间的临床结局差异均无统计学意义；而B组内膜〈7mm的病例与2011年HRT周期相同内膜厚度（均仅用戊酸雌二醇）比较结果提示，戊酸雌二醇＋17β雌二醇方案的临床妊娠率、胚胎种植率及活胎产率均要高于2011年，差异无统计学意义。结论对于子宫内膜薄，单纯使用戊酸雌二醇不能获得满意内膜厚度或理想雌激素水平的患者，在FET的HRT内膜准备中可以加用17β雌二醇阴道吸收，能增加内膜厚度，改善内膜容受性，从而获得较理想的临床结局。

腹腔镜与开腹子宫内膜癌分期手术的临床对比研究

目的 探讨腹腔镜下分期手术治疗子宫内膜癌的必要性和可行性.方法 回顾性分析56例子宫内膜癌分期手术患者,比较腹腔镜和开腹两组的围手术期情况 分析术前术后分期的差异及原因.结果 手术时间腹腔镜组（213±49）min,开腹组（162±30）min 手术后血红蛋白下降值腹腔镜组为（12±8）g/L,开腹组为（19±8）g/L 差异有统计学意义（P＜0.05）.腹腔镜组术后住院时间、肛门恢复排气时间均短于开腹组,差异有统计学意义（P＜0.01）.两组留置导尿管时间、术后并发症发生率、淋巴结切除数量、住院费用等方面差异均无统计学意义（均P＞0.05）.临床与手术病理分期总符合率为57.14%.结论 腹腔镜下分期手术可作为早期子宫内膜癌的主要治疗术式.

子宫内膜间质细胞共培养促进月经血干细胞向子宫内膜上皮细胞分化的研究

目的体外诱导月经血子宫内膜间充质干细胞（MenSC）向子宫内膜上皮细胞分化。方法培养MenSC和子宫内膜间质细胞（ESC）并鉴定，将MenSC与ESC共培养，同时补充生长因子（TGF—β10ng／ml，EGF10ng／ml，PDGF—BB10ng／m1）和雌激素（17-β-雌二醇1×10^-7mol／L），之后免疫荧光染色检测分化的MenSC是否表达上皮细胞特异标记细胞角蛋白（CK）。结果MenSC生长良好，10代以内均表现出明显的梭状形态，结构紧密，其表面标记CD44、CD90、CD73和CD29表达率分别为98．4％、90．77％、94．75％和97．01％。ESC特异标记波形蛋白表达阳性。MenSC与ESC共培养3周后细胞形态基本由成纤维样向上皮样细胞转变，免疫荧光鉴定诱导分化后的MenSC表达细胞角蛋白。结论在ESC共培养环境的诱导下，MenSC可向子宫内膜上皮细胞分化。细胞生长因子和雌激素在这一进程中发挥重要作用。

应用Metzenbaum剪刀辅助的子宫完全纵隔剪开术的临床效果

目的 评价应用Metzenbaum剪刀辅助的子宫完全纵隔剪开术的临床效果.方法 收治子宫完全纵隔患者8例,年龄24～39岁,均经宫腔镜检查确诊,应用Metzenbaum剪刀及宫腔镜直视下分别行宫颈纵隔和子宫纵隔剪开术及腹腔镜下相关疾病处理.结果 8例剪开术均一次顺利完成,无子宫穿孔、盆腔脏器损伤、水中毒等并发症出现,手术时间5～10 min.术后3个月,宫腔镜复查宫腔形态正常,无粘连及瘢痕形成.结论 应用Metzenbaum剪刀辅助剪开子宫完全纵隔的宫颈纵隔,再在宫腔镜直视下剪开宫体纵隔,操作方便、快速、安全,且不影响子宫内膜的生长.

体外受精获得全部非优质胚胎周期的移植策略分析

目的探讨体外受精获得全部非优质胚胎周期的移植策略。方法回顾性分析浙江大学医学院附属邵逸夫医院1998年12月至2010年6月全部胚胎为非优质胚胎的促排周期资料共621个周期，其中新鲜胚胎移植574个周期、冻融胚胎移植作为体外受精后首次胚胎移植47个周期，应用多因素Logisdc回归方法分析l临床相关因素与临床妊娠率之间的关系。结果冻融胚胎移植作为体外受精后首次胚胎移植组的临床妊娠率显著高于新鲜胚胎移植组[38．3％（18／47）比22．1％（127／574），P〈0．05]；年龄和移植时机与临床妊娠率密切相关，年龄因素校正后仍显示冻融胚胎移植作为体外受精后首次胚胎移植的临床妊娠率高于新鲜胚胎移植组（OR：2．107，95％CI：1．128—3．939，P〈0．05）。结论冻融胚胎移植作为体外受精后获得全部非优质胚胎周期的首次胚胎移植，可以获得较新鲜胚胎移植更高的临床妊娠率。

圆头精子受精能力、胚胎发育潜能及遗传风险的研究

目的探讨圆头精子的受精能力、胚胎发育潜能及其遗传风险。方法通过精子形态染色和透射电镜证实一例圆头精子症患者，其女方共获卵26颗，赠卵6颗，将20颗卵子（19颗为MII卵）行卵细胞质内单个圆头精子的显微注射，6颗赠卵行常规体外授精。测定该患者的染色体核型，同时针对Y染色体AZFa、AZFb、AZFc的sY84、sY86、sY127、sY134、sY254、sY255等6个序列标签位点（STS）进行Y染色体微缺失测定。结果19颗MII卵子行圆头精子显微注射后有4颗正常受精并卵裂，其余均未受精和卵裂。6颗赠卵常规体外授精后全部正常受精并卵裂，受精率显著高于圆头精子（100％V821．1％，P〈0．01），卵裂率两者差异无统计学意义（100％vs100％，P〉0．05）。患者染色体核型正常（46，XY），未发现微缺失。女方行冻胚移植后妊娠，足月剖宫产一男孩，染色体核型正常（46，XY）。受者行冻胚移植后妊娠，足月剖宫产一男孩，体健。结论尽管受精率低下，卵细胞质内单精子注射（ICSI）仍不失为治疗圆头精子症患者不育的一种有效方法。

移植2个胚胎发生双胎妊娠的风险因素分析

目的探讨1次移植2枚胚胎时发生双胎妊娠的风险因素。方法回顾性分析2970例1次移植2个胚胎移植周期资料，其中新鲜胚胎移植周期1984例、冻融胚胎移植周期986例，应用多因素Logistic回归法分析发生双胎妊娠的风险因素，并比较年龄〈35岁和≥35岁，移植0、1、2个优质胚胎以及不同移植时机的移植周期双胎妊娠率。结果（1）多因素Logistic回归分析发现女方年龄与双胎妊娠呈负相关（P〈0．01）、移植优质胚胎个数和冻融胚胎移植与双胎妊娠正相关（均P〈0．01）；（2）新鲜胚胎移植周期和冻融胚胎移植周期的双胎妊娠率在女方年龄〈35岁组均显著高于≥35岁组（16．0％比8．0％，P〈0．01；26．9％比14．2％，P〈0．01）；（3）新鲜胚胎移植周期移植2个优质胚胎的双胎妊娠率显著高于移植0个和1个优质胚胎组（19．1％比5．4％和11．0％，均P〈0．01）；冻融胚胎移植周期移植2个优质胚胎的双胎妊娠率亦显著高于移植0个和1个优质胚胎组（32．7％比10．8％和20．7％，均P〈0．01）；（4）冻融胚胎移植周期双胎妊娠率显著高于新鲜胚胎移植周期（24．7％比14．9％，P〈0．01）。结论女方年龄、移植优质胚胎个数和冻融胚胎移植是双胎妊娠发生的高危因素；在冻融胚胎移植技术成熟的中心，对于女方年轻的患者，在FET周期建议单优胚移植。

卵母细胞玻璃化冷冻在临床中的应用

目的评价取卵日取精失败周期进行卵母细胞冷冻是否影响胚胎质量及发育潜力。方法收集2014年1月至2017年12月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心因男方严重少弱精子症或者无精子症取卵日取精失败或者无法获得足够精子而行卵母细胞玻璃化冷冻的30例患者作为冷冻组。选取同期的220例新鲜卵母细胞的患者作为新鲜组。回顾性比较两组的受精率、优胚率、妊娠率、着床率及活产率。结果卵母细胞复苏存活率为91.4%(180/197)。冷冻组中24例行胚胎移植,妊娠14例,新鲜组31例行胚胎移植,妊娠18例。冷冻组两原核(2PN)的受精卵数、胚胎数及优质胚胎数明显少于新鲜组,分别为:(3.7±2.5比7.3±4.8)、(3.3±2.5比7.2±4.8)及(1.2±1.8比2.9±2.7)(均P<0.05)。冷冻组受精率77.2%(115/149)和优质胚胎率36.6%(37/101)均低于新鲜组,分别为:77.6%(1637/2109)及40.9%(651/1591)(P>0.05)。冷冻组妊娠率58.3%(14/24)高于新鲜组58.1%(18/31),每成熟卵母细胞着床率和每成熟卵母细胞活产率为10.8%(15/138)和10.8%(15/138),均高于新鲜组9.6%(21/218)及8.7%(19/218),差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论卵母细胞玻璃化冷冻保存可能导致胚胎的质量有所下降,但是胚胎的发育潜力仍是可观的,并可能获得比新鲜组更高的妊娠率、着床率和活产率。