高产蛋白酶枯草芽孢杆菌JNB001产酶条件的优化

为了进一步提高枯草芽孢杆菌JNB001产蛋白酶的能力,试验利用单因素及正交试验从起始pH、发酵温度、接种量、装液量、菌龄等方面对产酶条件进行优化。结果表明,最佳培养条件为:起始pH 7.0;发酵温度35℃;接种量7%;装液量35mL/250mL;菌龄18h;发酵时间36h。菌株JNB001经优化发酵条件后,测定其蛋白酶活力可高达371.66U/mL。该试验结果为无害化生物处理罐的优化设计等后续应用研究奠定了基础。

枯草芽孢杆菌JNB001蛋白酶特性的研究

为了解枯草芽孢杆菌JNB001发酵所产蛋白酶的特性,试验以蛋白酶活力为指标,研究了pH、温度等因素对酶促反应的影响,并通过水解度考察了粗酶液对各种动物蛋白的酶解效果。结果表明,酶反应最适pH为8.0,温度为45℃;粗酶液在pH 5.5~9.0的范围内较稳定,过碱则不利于酶液的保存。在45℃下热稳定性良好,超过50℃保温10min后残余酶活已不足60%;金属离子Ca^(2+)和Mg^(2+)、还原剂DTT、表面活性剂Tween-80等能大幅度提高酶活力。而Fe^(2+)、Cu^(2+)、金属螯合剂EDTA、变性剂SDS等物质则会抑制蛋白酶活性;酶促反应的Km为6.43mg/mL,Vmax为47.39μg/min;针对不同蛋白底物,酶促反应较适pH为7.0~9.0,温度为40~50℃。该粗酶液具有水解猪毛、猪蹄甲、脱毛牛皮、明胶等硬蛋白类物质的能力。上述试验结果可为枯草芽孢杆菌JNB001在病死畜禽无害化生物处理体系等方面的工业应用提供参考。

QuEChERS-气相色谱质谱联用法检测水蜜桃中农药残留

本文建立QuEChERS-气相色谱质谱联用法检测水蜜桃中11种农药残留的方法。样品经乙腈提取,QuEChERS前处理法净化,采用GC-MS检测系统在选择离子模式下进行测定,外标法定量。结果表明:11种农药在0.05~1.00μg·mL^(-1)线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.998;检出限(S/N=3)范围为0.0006~0.0034mg·kg^(-1),定量限(S/N=10)范围为0.0019~0.0113mg·kg^(-1);在0.10mg·kg^(-1)、0.20mg·kg^(-1)和0.50mg·kg^(-1)3个添加水平下,样品平均回收率为84.7%~123.2%;相对标准偏差为0.8%~9.7%。该方法简单快速、高效稳定、准确率高,适用于水蜜桃农药多残留的定性定量检测。