龙胆苦苷通过MAPK信号通路对骨质疏松大鼠骨吸收的影响

目的基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨龙胆苦苷(GENT)对骨质疏松(OP)大鼠骨吸收的影响。方法78只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(OP组)、雌二醇组(E_(2)组,0.05 mg/kg)、龙胆苦苷低(GENT LD,30 mg/kg)、中(GENT MD,60 mg/kg)、高剂量组(GENT HD组,120 mg/kg),除Sham组外大鼠均采用双侧卵巢切除术构建OP大鼠模型。ELISA检测血清骨代谢指标(CBF-α1、CTX-Ⅰ、PINP、OCE_(2))和炎性指标(IL-6、TNF-α、IL-1β)含量;三点弯曲测试评估右股骨机械强度;Micro-CT扫描大鼠右侧股骨观察股骨远端骨微结构变化;HE染色观察骨组织形态学变化;TRAP染色分析骨表面的破骨细胞数量(N.Oc/BS);Western Blot检测骨组织RANKL和MAPK通路相关蛋白(JNK、ERK1/2、p38 MAPK及其磷酸化蛋白)的表达。结果与Sham组相比,OP组大鼠血清E_(2)、骨代谢相关标志物、股骨最大负荷和断裂挠度、BMD、骨小梁微结构参数BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著降低(P<0.05),炎症因子、Tb.Sp、N.Oc/BS、骨组织RANKL、p-JNK/JNK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38的表达明显升高(P<0.05),骨皮质厚度和骨小梁数量明显减少,且骨小梁出现断裂,排列疏松;经GENT治疗后大鼠血清E_(2)、骨代谢相关标志物、股骨最大负荷和断裂挠度、BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th明显升高(P<0.05),炎症因子、Tb.Sp、N.Oc/BS、骨组织RANKL、p-JNK/JNK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38的表达明显降低(P<0.05),可见新生骨小梁,形态相对完整。结论GENT可改善OP大鼠的骨微结构,对OP具有保护作用,其作用机制可能与抑制MAPK信号通路的激活,进而抑制破骨细胞的生成,减少骨吸收有关。

加长型股骨近端抗旋髓内钉治疗青壮年股骨粗隆下粉碎性骨折临床观察

目的观察加长型股骨近端抗旋髓内钉(PFNA)内固定结合中医3期辨证治疗青壮年股骨粗隆下粉碎性骨折的临床疗效。方法将27例股骨粗隆下粉碎性骨折的青壮年患者24 h内行加长型PFNA内固定,术后结合中医3期辨证治疗,观察其临床疗效。结果 27例均获6~24个月随访,平均18个月,无骨折不愈合者,无髋内翻畸形者。按Harris髋关节功能评分:优19例,良7例,可1例,优良率96.30%。结论 24 h内应用加长型PFNA内固定,结合中医3期辨证治疗青壮年股骨粗隆下粉碎性骨折,能早期解除患者痛苦,减少并发症,功能恢复好,临床疗效满意。

超关节暂时外固定器治疗高能量胫骨平台骨折的临床观察

目的评价超关节暂时外固定器治疗高能量胫骨平台骨折的临床疗效。方法选取18例患者按Schatzker分型,Ⅴ型9例,Ⅵ型9例。所有患者一期行超关节暂时外固定器治疗,并配合中药消肿治疗,待软组织肿胀消退后,二期行切开复位内固定治疗。记录两次手术间隔时间、软组织并发症、复位丢失情况,评估术后膝关节功能评分结果。结果两次手术间隔时间为7~18 d,平均（10.3±3.7）d。两次手术间隔期内无伤口不愈合,无皮瓣坏死出现,无骨筋膜室综合征的发生,无骨折复位丢失现象。二次手术后无伤口感染,出现1例伤口边缘局部坏死,经换药后伤口愈合;无骨髓炎发生。患者均达到骨性愈合,未出现骨折复位丢失现象。术后Hohl膝关节功能评分为：疼痛76~95分,平均（91.30±3.50）分;主动活动72~96分,平均（91.20±4.10）分;活动范围65~94分,平均（85.20±6.10）分;稳定性68~92分,平均（82.80±5.70）分;患者自我评价73~96分,平均（90.50±2.50）分。参照Hohl膝关节功能评分各项指标平均优良率82.2%。结论采用超关节暂时外固定器一期固定治疗高能量胫骨平台骨折能在二期手术前加快软组织恢复,维持骨折复位,改善术后关节功能。

股骨近端防旋髓内钉内固定治疗股骨干骨折合并同侧股骨粗隆间骨折的临床疗效分析

目的探讨运用闭合复位加长型股骨近端防旋髓内钉(PFNA)治疗股骨干骨折合并同侧股骨粗隆间骨折的临床疗效。方法选择股骨干骨折合并同侧股骨粗隆间骨折患者70例,采用PFNA治疗的40例患者设为观察组,动力髋螺钉(DHS)治疗的30例患者设为对照组,比较两组患者手术时间、术中出血量、切口长度、骨折愈合时间等手术指标,采用髋关节Harris评分评价术后1、3、6个月髋关节功能,同时对随访期并发症发生率进行比较。结果观察组手术时间、术中出血量、切口长度显著低于对照组,差异有显著性(P<0.05),骨折愈合时间差异无显著性(P>0.05)。观察组术后1、6个月髋关节Harris评分与对照组差异无显著性(P>0.05),两组手术前后均差异显著,观察组术后3个月与对照组差异有显著性(P<0.05)。观察组并发症发生率与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论采用闭合复位加长型股骨近端防旋髓内钉与动力髋螺钉治疗均有良好的疗效,但PFNA创伤更小、手术时间较短,是更为理想的治疗股骨干骨折合并同侧股骨粗隆间骨折方式。

不同缝合方式治疗急性闭合性跟腱断裂的效果比较

目的对比研究急性闭合性跟腱断裂使用经皮闭合缝合与传统开放手术缝合治疗效果。方法选择2017年5月至2019年5月海南省三亚市人民医院收治的急性闭合性跟腱断裂患者80例,根据缝合方式将其分为经皮组和开放组各40例。观察术后12周康复效果情况,记录手术时间、术中失血量、住院时间、跟腱愈合时间、并发症,并于术后6个月记录测量小腿最大周径、跟腱断裂处周径;对比两组术前、术后12周简化McGill疼痛问卷量表(the short-form MPQ,SF-MPQ)、美国足踝外科协会踝—后足评分(American Orthopaedic Foot&Ankle Society-ankle and hindfoot score,AOFAS-AH)、Leppilahti跟腱修复评分。结果两组患者术后12周小腿最大周径差异无显著性(P>0.05),经皮组手术时间、术中失血量、住院时间均低于开放组,差异有显著性(P<0.05),经皮组术后12周跟腱断裂处周径高于开放组,差异有显著性(P<0.05);两组患者术后12周差异无显著性(P>0.05)。两组患者术前SF-MPQ量表中各量表评分及AOFAS-AH、Leppilahti跟腱修复评分差异无显著性(P>0.05),两组患者术后12周SF-MPQ量表中各量表评分均低于术前(P<0.05),经皮组术后12周SF-MPQ量表中各量表评分均低于开放组,差异有显著性(P<0.05);两组患者术后12周AOFAS-AH、Leppilahti跟腱修复评分均高于术前,差异有显著性(P<0.05),经皮组术后12周AOFAS-AH、Leppilahti跟腱修复评分均高于开放组,差异有显著性(P<0.05);经皮组术后并发症发生率低于开放组,差异有显著性(P<0.05)。结论急性闭合性跟腱断裂经皮缝合能有效缩短手术及术后恢复时间,降低术后并发症发生率,同时还可改善其术后疼痛程度。

miR-106a-5p通过调控TLR4表达对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨miR-106a-5p通过调控TLR4对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养RA滑膜成纤维细胞MH7A,将细胞分为8组:miR-NC组(转染miR-NC)、miR-106a-5p组(转染miR-106a-5p)、si-NC组(转染siNC)、si-TLR4组(转染si-TLR4)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-106a-5p组(转染anti-miR-106a-5p)、miR-106a-5p+pcDNA组(共转染miR-106a-5p和pcDNA)以及miR-106a-5p+TLR4组(共转染miR-106a-5p和TLR4)。采用qRT-PCR检测RA患者滑膜中miR-106a-5p和TLR4 m RNA的表达;MTT检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blotting检测TLR4、PCNA、Bax和Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶实验验证miR-106a-5p和TLR4关系。结果:与对照组相比,RA滑膜组织中miR-106a-5p表达明显降低(P<0.05),TLR4 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-106a-5p组的miR-106a-5p表达、细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显增加(P<0.05);48 h及72 h的细胞OD值、PCNA和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-TLR4组的TLR4 mRNA及蛋白表达、48 h及72 h的细胞OD值、PCNA和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05);细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显增加(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-106a-5p组的TLR4-WT荧光素酶活性明显降低(P<0.05),而TLR4-MUT荧光素酶素酶活性无明显变化。与anti-miR-NC组相比,anti-miR-106a-5p组中miR-106a-5p表达明显降低(P<0.05),TLR4蛋白表达明显增加(P<0.05)。与miR-106a-5p+pcDNA组相比,miR-106a-5p+TLR4组的TLR4 mRNA及蛋白表达、48 h及72 h的细胞OD值、PCNA和Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05);细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:miR-106a-5p通过下调TLR4抑制滑膜成纤维细胞MH7A的增殖,并诱导其细胞凋亡。

两种不同内固定方法治疗踝关节骨折的效果观察及并发症发生率影响分析

目的分析两种不同内固定方法治疗踝关节骨折的效果及对并发症发生率影响。方法回顾性分析本院于2017年8月-2018年4月期间接收的52例踝关节骨折患者的临床资料,依据患者的内固定方案进行分组,对照组患者为传统切开复位内固定治疗,观察组患者为闭合复位经皮空心钉内固定治疗。比较两组患者的手术效果以及术后并发症发生情况。结果观察组患者的手术总优良率同对照组相比较,明显较高,其术后并发症发生率明显低于对照组,观察组患者的手术耗时和骨折痊愈时间均明显短于对照组,手术出血量明显少于对照组,P<0.05。结论闭合复位经皮空心钉内固定治疗踝关节骨折的效果显著且具有较高的安全性,有进一步推广实施的价值。

藤黄健骨胶囊对大鼠膝骨关节炎的影响

目的研究藤黄健骨胶囊对大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法大鼠用木瓜蛋白酶诱导KOA模型。将未造模的10只作为正常组,造模的20只随机分为模型组和实验组,每组各10只。造模4周后,实验组给予藤黄健骨胶囊0.18 g·kg^(-1),每天1次,灌胃;正常组和模型组给予等量生理盐水,灌胃,连续治疗2周。记录各组大鼠足跖肿胀度和关节炎指数,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果正常组、模型组和实验组大鼠血清中IL-6的含量分别为(5.54±0.47),(17.33±1.92)和(10.69±0.95)ng·L^(-1);IL^(-1)β的含量分别为(36.65±3.56),(91.40±8.14)和(47.25±3.94)ng·L^(-1);TNF-α的含量分别为(29.64±3.21),(86.57±6.42)和(35.97±4.22)ng·L^(-1)。模型组与正常组比较,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论藤黄健骨胶囊可降低大鼠血清中促炎症因子的表达,发挥消炎止痛的效果,对膝骨关节有保护作用。

circ_0072088靶向miR-578促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和转移的机制研究

目的:探讨circ_0072088对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和转移的影响及其对miR-578的调控作用。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常滑膜组织、类风湿关节炎患者滑膜组织中circ_0072088和miR-578的表达量;原代分离培养类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,将细胞分为si-NC组、si-circ_0072088组、miR-NC组、miR-578组、si-circ_0072088+anti-miR-NC组、si-circ_0072088+anti-miR-578组;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、平板克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0072088与miR-578的相互作用。结果:与正常滑膜组织比较,类风湿关节炎患者滑膜组织中circ_0072088的表达水平升高(P<0.05),miR-578的表达水平降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0072088组细胞活力降低(P<0.05),克隆形成数及侵袭细胞数减少(P<0.05),划痕愈合率降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示circ_0072088与miR-578特异性结合,并可调控miR-578的表达活性;与miR-NC组比较,miR-578组细胞活力降低(P<0.05),克隆形成数及侵袭细胞数均明显减少(P<0.05),划痕愈合率降低(P<0.05);与si-circ_0072088+anti-miR-NC组比较,si-circ_0072088+anti-miR-578组细胞活力升高(P<0.05),克隆形成数及侵袭细胞数均明显增多(P<0.05),划痕愈合率升高(P<0.05)。结论:抑制circ_0072088表达可通过靶向miR-578而降低类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。