5-氮杂胞苷对SMMC-7721细胞增殖与侵袭的影响及作用机制

目的观察5-氮杂胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖及侵袭的影响,并探讨其可能的机制。方法常规方法培养SMMC-7721细胞,加入不同浓度的5-氮杂胞苷,以CCK-8法测定终浓度为0、5、10、25、50 umol/L的5-氮杂胞苷对SMMC-7721细胞作用24、48、72 h后增殖的影响,并计算细胞生长抑制率;Transwell小室侵袭实验检测各不同浓度5-氮杂胞苷处理SMMC-7721细胞后24 h后的细胞侵袭能力特点;Western blotting法检测Caspase-3、MMP-2的表达。结果 5-氮杂胞苷能显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖,并呈时间浓度依赖性(P<0.05);与对照组相比,随5-氮杂胞苷浓度增加Caspase-3明显增加,MMP-2蛋白表达量明显增加。结论 5-氮杂胞苷对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖有明显抑制作用,且表现为时间浓度依赖性,其机制可能与上调Caspase-3蛋白表达量,诱导细胞凋亡,及对细胞的直接毒性作用有关。5-氮杂胞苷能增强人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的侵袭能力,其机制可能与上调MMP-2蛋白表达量有关。

人EGFR基因真核表达质粒的构建及其在293细胞中的表达

目的 :构建人表皮生长因子(EGFR)基因真核表达系统,拟为EGFR靶向腺病毒准备包装细胞。方法:用RT-PCR法,从人A431细胞中逆转录出EGFR基因cDNA,插入到pcDNA3.1(+)质粒中,拟构建EGFR真核表达载体,经测序证实。用脂质体将重组质粒转染293细胞,经G418筛选获得稳定表达EGFR重组克隆,用Western blot鉴定转染细胞中EGFR基因的表达。结果:经限制性内切酶酶切及测序结果分析证实EGFR基因已插入重组质粒。Western blot方法证实转基因293细胞中存在人EGFR基因的表达。结论:成功构建的人EGFR/pcDNA3.1(+)真核表达系统能够在293细胞稳定表达。

滇中高原杂交稻源库关系初探

对四个杂交稻组合及一个常规稻品种在海拔１９００ｍ高原地区的源库关系研究表明：高原杂交稻组合间源库关系有较大差异，宜选择在当地源库矛盾不十分突出的组合推广，杂交稻的剑叶对结实率的贡献大于常规稻（ｃｋ），影响结实率８．１％～３６．５％；一般杂交稻的叶片叶绿素含量高于对照常规稻，但结实率都低于对照；杂交稻后期叶片叶绿素含量高的组合其结实率相对较高，影响结实率的主要是叶片质量；增加杂交稻的粒重主要是保源方面的工作。高原杂交稻高产栽培的主要目标是提高结实率，关键是增强源转运率。

滇中粳型杂交稻的生长分析

通过对４ 个粳型杂交组合和１ 个常规稻的生长分析认为：粳型杂交稻在滇中昆明地区具有较大的增产潜力，关键是要提高结实率和单位面积的有效穗数。粳型杂交稻分蘖力强，前期生长迅速、穗大粒多，穗部干物质积累起步早而持续时间长，灌浆速度慢。杂交组合的大田期平均ＲＧＲ 一般大于常规稻；生育后期ＲＧＲ、ＮＡＲ 较低是结实率不高的原因之一。粳型杂交稻是以较大ＬＡＲ 获得高产的；一般应在分蘖盛期和齐穗后１６ ｄ 内形成两个ＣＧＲ 的峰值。粳型杂交稻在栽培技术上要求培育壮秧、适时早栽，培肥大田，施足中层肥和早追分蘖肥；加强中后期的肥水管理。