香兰素通过抑制自噬及PINK1信号通路改善新生大鼠低氧缺血性脑损伤与炎症反应

目的探讨香兰素(vanillin,Van)对新生大鼠低氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的影响及作用机制。方法将7日龄SD大鼠根据改良的Rice-Vannucci法构建HIBD模型,将120只新生大鼠随机分为5组:假手术(Sham)组、HIBD组、HIBD+Van(20 mg·kg^(-1))组、HIBD+Van(40mg·kg^(-1))、HIBD+Van(80 mg·kg^(-1))组,每组30只,香兰素处理组大鼠分别按照对应剂量腹腔内注射香兰素,每12h注射一次,连续注射2d,假手术组和HIBD组大鼠同时注射等量无菌生理盐水。48h后将各组大鼠麻醉后断头处死,收集脑组织计算脑组织含水量,TTC染色检测梗死面积,苏木精-伊红染色观察脑组织病理学变化,酶联免疫吸附法(enzyme linked immune sorbent assay,ELISA)检测脑组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)及肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor,TNF-α)含量,免疫荧光染色检测脑组织微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain3,LC3)表达,蛋白质印迹(Western blot)检测脑组织自噬相关蛋白表达,实时定量PCR和Western blot检测PTEN诱导假定激酶1(PTEN induced putative kinase1,PINK1)mRNA与蛋白表达。结果与Sham组比较,HIBD组大鼠脑组织含水量显著增加(P<0.05),脑梗死面积显著增加(P<0.05),炎症细胞因子TNF-α、IL-1β与IL-6含量显著增加而抗炎因子IL-10含量显著降低(P<0.05),LC3荧光表达强度增加,Beclin-1蛋白表达水平和LC3-II/LC3-I比值显著升高(P<0.05),P62蛋白表达水平显著下降(P<0.05),同时,脑组织中PINK1mRNA与蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05)。与HIBD组比较,不同剂量香兰素(20 mg·kg^(-1)、40 mg·kg^(-1)、80 mg·kg^(-1))作用下,大鼠脑组织含水量显著下降(P<0.05),脑梗死面积显著减小(P<0.05),炎症细胞因子TNF-α、IL-1β与IL-6含量显著下降而抗炎因子IL-10含量显著升高(P<0.05),LC3荧光表达强度减弱,Beclin-1蛋白表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低(P<0.05),P62蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而PINK1mRNA与蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论香兰素具有改善新生大鼠低氧缺血性脑损伤、减轻炎症反应的作用,其机制可能抑制自噬及PINK1信号途径激活相关。

18β-甘草次酸钠改善幼鼠变应性鼻炎和鼻黏膜组织病变及对Th1Th2的平衡机制

目的研究18β-甘草次酸钠(18β-SGA)对变应性鼻炎(AR)幼鼠及其对Th1/Th2失衡的改善作用及机制。方法50只SD幼鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、18β-SGA低、高剂量组和地塞米松组,每组10只。除对照组外,其余大鼠根据卵清蛋白致敏法建立AR模型。造模后进行对应给药处理,持续4周。大鼠鼻部症状根据行为学评分法进行记录;ELISA法检测白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、免疫球蛋白E(IgE)以及IL-4、IL-5水平;HE染色观察大鼠鼻黏膜组织病理变化;免疫组化法检测鼻黏膜组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、水通道蛋白5(AQP5)、NF-κB蛋白表达;Western blot检测鼻黏膜组织中NF-κB和PI3K-Akt信号通路相关蛋白表达。结果模型组大鼠较对照组大鼠评分显著降低(P=0.002),鼻粘膜组织出现明显血管扩张、水肿和严重炎性细胞浸润等病理现象。18β-SGA可减轻大鼠AR鼻部症状,抑制血清中IL-2、IFN-γ含量的下降及IgE、IL-4和IL-5含量的升高(P=0.001;P=0.003;P=0.008;P=0.002;P=0.002),下调鼻黏膜组织中ICAM-1、AQP5与NF-κB蛋白表达(P=0.002;P=0.004;P=0.005),并抑制p-PI3K、p-AKT及NF-κB p65的蛋白表达(P=0.006;P=0.002;P=0.002)。结论18β-SGA能减轻大鼠AR症状,其机制可能与抑制NF-κB和PI3K-Akt信号通路活性、调节体内Th1/Th2平衡相关。

支原体肺炎患儿血清补体、免疫球蛋白含量与炎性应激反应的相关性

目的探讨支原体肺炎患儿血清补体、免疫球蛋白含量与炎性应激反应指标之间的相关性。方法选择2015年8月—2017年2月期间在海南医学院第二附属医院儿科治疗的支原体肺炎患儿314例,其中按照患儿的疾病严重程度分为重症组(n=73)和轻症组(n=241),选择同时间段内到医院体检的健康儿童作为健康对照组(n=150),对3组儿童的血清补体(C3、C4)、免疫球蛋白(IgM、IgA、IgG)和炎性应激反应介质(sICAM1、scd40l、HMGB1、Cor、MDA)含量、炎性应激分子(LR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2)表达量进行比较,对全部患儿C3、C4、IgM、IgA、IgG的含量与sICAM1、scd40l、HMGB1、Cor、MDA的浓度及LR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2的荧光强度相关性进行分析。结果 3组受试者血清C3、C4、IgM、IgA含量均为重症组>轻症组>对照组(P<0.05), IgA水平为重症组<轻症组<对照组(P<0.05),但IgG差异无统计学意义(P>0.05);3组sICAM1、scd401、HMGB1、Cor、MDA水平均为重症组>轻症组>对照组(P<0.05);3组受试者的TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2表达量比较差异均具有统计学意义(P<0.01),均为重症组>轻症组>对照组(P<0.05)。全部患儿的C3、C4、IgM与sICAM1、scd40l、HMGB1、Cor、MDA均呈正相关(C3:r=0.238、0.321、0.257、0.251、0.338,C4:r=0.214、0.351、0.308、0.291、0.314,IgM:r=0.421、0.391、0.445、0.391、0.374,P<0.05),全部患儿的IgA与sICAM1、scd40l、HMGB1、Cor、MDA均呈负相关(r=-0.207、-0.425、-0.507、-0.513、-0.386,P<0.05),全部患儿的C3、C4、IgM与TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、,NOX2的荧光强度均呈正相关(C3:r=0.286、0.421、0.413、0.387、0.371、0.391,C4:r=0.228、0.415、0.391、0.317、0.441、0.391、,IgM:r=0.357、0.378、0.492、0.358、0.269、0.462,P均<0.05),全部患儿的IgA与TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2的荧光强度均呈负相关(P均<0.05),IgG与TLR2、TLR4、CD11b、CD18、MPO、NOX2的荧光强度之间无相关性(P>0.05)。结论支原体肺炎患儿体内血清补体、免疫球蛋白含量与病情严重程度之间具有一定关系。异常的血清补体和免疫球蛋白变化结果与患儿炎性反应、应激反应具有明显的相关性。

利巴韦林联合热毒宁对小儿轮状病毒性肠炎心肌酶谱的影响

目的探讨利巴韦林注射液联合热毒宁注射液对小儿轮状病毒性肠炎心肌酶谱的影响。方法选取医院儿科2016年9月至2017年3月收治的小儿轮状病毒性肠炎患儿80例,随机分为观察组和对照组,各40例,两组患儿均予以利巴韦林注射液治疗,观察组患儿在此基础上加用热毒宁注射液。结果治疗3 d后,观察组患儿总有效率为92.50%,明显高于对照组的65.00%(χ~2=9.408,P=0.009<0.05);两组患儿心肌酶谱指标、白细胞介素6及肿瘤坏死因子-α水平均较治疗前显著下降(P<0.05),且治疗后观察组患儿的各项指标水平明显低于对照组患儿(P<0.05)。结论利巴韦林注射液联合热毒宁注射液治疗小儿轮状病毒性肠炎,疗效满意,值得临床推广。

新生儿B族链球菌早发型败血症临床特点

目的探讨新生儿B族链球菌早发型败血症临床特点及其与白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)、中性粒细胞的关系。方法选取2018年4月-2020年2月海南省妇女儿童医学中心新生儿科收治的50例新生儿血培养B族链球菌(阳性)早发型败血症患儿为研究组,同期选取医院收治的50例新生儿血培养B族链球菌(阴性)早发型败血症患儿为对照组。收集两组患儿的临床资料,比较两组患儿的临床特点以及血清IL-6、PCT、中性粒细胞水平,绘制受试者工作特征曲线评估IL-6、PCT、中性粒细胞在新生儿B族链球菌早发型败血症的诊断价值。结果研究组患儿的喂养不耐受、神经系统并发症、新生儿惊厥以及病理性黄疸的发生率分别为34.00%、22.00%、26.00%、64.00%,均高于对照组(P均<0.05);B族链球菌对四环素、克林霉素具有较高耐药性,对万古霉素、青霉素有较高敏感性;研究组患儿的血清中性粒细胞百分比、IL-6、PCT分别为(67.59±27.23)%、(37.07±10.12)pg/ml、(5.23±2.39)ng/ml,均高于对照组(P均<0.001);受试者工作特征曲线结果显示,IL-6、PCT、中性粒细胞的最佳诊断界值分别为31.02 pg/ml、4.76 ng/ml、60.08%。结论新生儿B族链球菌早发型败血症主要以神经系统损害为临床特征。血清IL-6、PCT以及中性粒细胞百分比均可作为诊断新生儿B族链球菌早发型败血症的早期敏感指标,在实际工作中建议以联合诊断的方式使用。

有创机械通气重症肺炎患儿感染闭塞性毛细支气管炎影响因素分析

目的探讨有创机械通气重症肺炎患儿感染后闭塞性毛细支气管炎的临床特点与影响因素。方法回顾性分析2010年1月-2017年6月于医院进行治疗的有创机械通气重症肺炎患儿87例的临床资料,分析患儿感染后闭塞性毛细支气管炎情况,对患儿的临床特点,病原菌情况进行分析,并探讨有创机械通气重症肺炎患儿感染后闭塞性毛细支气管炎的影响因素。结果 87例患儿中感染后出现闭塞性毛细支气管炎32例,其中喘息28例,持续咳嗽与运动不耐受均各21例,肺部哮鸣音25例;87例患儿均出现阻塞性通气功能障碍,高分辨率CT检查结果中马赛克灌注征26例;15例闭塞性毛细支气管炎患儿的病原体培养阳性;发病后就诊时间、治疗初期使用激素、有创机械通气维持时间是有创机械通气患儿感染后发生闭塞性毛细支气管炎的影响因素(P<0.05)。结论闭塞性毛细支气管炎患儿的临床表现主要集中在呼吸及循环系统的异常,多种病原体均可导致该种疾病的发生,建议临床针对影响因素采用针对性的措施进行干预。

益生菌对重症感染性肺炎患儿血糖的稳定作用及其机制研究

目的研究益生菌对重症感染性肺炎患儿血糖的稳定作用及其机制。方法选取2016年9月-2017年9月于医院进行治疗的98例重症感染性肺炎患儿,根据数字表法随机分为对照组和试验组,每组49例患儿。对照组患儿给予常规治疗,试验组患儿采用益生菌治疗。对比两组患儿治疗前后血糖、血浆硫化氢(H2S)、D-乳酸水平以及粪便短链脂肪酸;观察血糖浓度与血浆H2S、D-乳酸及乙酸的相关性。结果治疗后,试验组患儿血糖(6.08±2.66)mmol/L、D-乳酸水平(1.24±0.38)μg/ml低于对照组血糖(8.40±2.67)mmol/L、D-乳酸水平(1.46±0.41)μg/ml,而H2S水平(24.68±7.42)μmol/L则高于对照组(20.89±7.37)μmol/L(P<0.05);试验组患儿丙酸(21.07±5.27)μmol/g、乙酸(32.84±8.56)μmol/g、正丁酸水平(15.27±5.18)μmol/g,高于对照组丙酸(18.68±5.13)μmol/g、乙酸(28.59±7.87)μmol/g、正丁酸水平(12.89±5.02)μmol/g(P<0.05);血糖浓度与血浆H2S、D-乳酸及乙酸具有相关性,与D-乳酸水平呈正相关性,血糖浓度与血浆H2S和乙酸水平呈负相关(P<0.05)。结论益生菌对重症感染性肺炎患儿病情的发展与恶化能够起到良好的控制作用,合理应用益生菌后,患儿血糖、血浆H2S、D-乳酸水平、丙酸、乙酸、正丁酸等粪便短链脂肪酸指标情况趋于正常,接近于正常水平,该方法安全、有效,临床上可推广应用。