脑靶向肽Angiopep2包载si-WDR4通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号抑制胶质母细胞瘤增殖

目的 探究脑靶向肽Angiopep2包载si-WDR4对胶质母细胞瘤的影响及其潜在机制.方法 制备Angiopep2/si-RNA,并检测其包封率和摄取率;在体外,分别对U87细胞进行磷酸盐缓冲液(PBS),Angiopep2/si-NC,si-WDR4和Angiopep2/si-WDR4处理,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测WDR4的mRNA含量,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测WDR4、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)的蛋白表达水平,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测U87细胞活力,通过5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色检测U87细胞的增殖;在体内,通过U87-Luc细胞构建异种原位移植瘤模型,7 d后,分别通过尾静脉注射PBS、Angiopep2/si-NC、si-WDR4和Angiopep2/si-WDR4.第28天,通过小动物活体成像检测肿瘤双荧光素酶活性,通过苏木精-伊红(HE)染色检测肿瘤大小.计量资料比较采用t检验.结果 Angiopep2对si-WDR4具有良好的结合能力,在N/P比为3∶1时形成完整复合物,并能够促进肿瘤细胞对si-RNA的摄取;在体外,与Angiopep2/si-NC 比较,Angiopep2/si-WDR4 处理能降低 U87 细胞内 WDR4 的 mRNA(0.21±0.14,t=4.13,P<0.05)和蛋白水平(0.42±0.17,t=3.53,P<0.05),减少 PI3K(0.34±0.19,t=5.17,P<0.05)和 Akt(0.24±0.17,4.26,P<0.05)的表达,降低 U87 细胞活性(52.00±11.33,t=4.59,P<0.05),减少 EdU 阳性细胞数(23.00±7.28,t=12.12,P<0.05);在体内,Angiopep2/si-WDR4 处理后裸鼠脑组织双荧光素酶活性降低(10.02±2.06,t=6.14,P<0.05),肿瘤相对体积减小(0.38±0.17,t=7.42,P<0.05).结论 Angiopep2/si-WDR4能促进肿瘤细胞对si-WDR4的摄取,抑制胶质母细胞瘤的增殖.

一枝黄花提取物下调cyclinA1/CDK2通路抑制肝癌细胞增殖、迁移与侵袭

目的 研究一枝黄花总皂苷与总黄酮(SDSF)对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 体外培养HepG2细胞,给予不同浓度(0、10、20、40μg·mL^(-1))SDSF处理24 h后,采用MTT法、克隆形成实验检测细胞的增殖活力;流式细胞术检测细胞周期;划痕实验、transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力;q RT-PCR法、Western blotting法检测细胞周期蛋白(cyclin)A1、周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、γ-H2AX、p-p53、基质金属蛋白酶(MMP)-2与MMP-9的水平变化。结果 与0μg·mL-1 SDSF组相比,SDSF呈剂量依赖性趋势地抑制HepG2细胞增殖活力,将HepG2细胞周期阻滞于S期,以及显著抑制HepG2细胞的迁移与侵袭能力(P<0.01)。SDSF还可显著降低细胞内cyclinA1、CDK2、MMP-2、MMP-9蛋白表达,增加γ-H2AX、p-p53蛋白表达(P<0.05)。结论 SDSF能显著抑制HepG2细胞的增殖与侵袭转移,其机制可能与下调cyclinA1、CDK2、MMP-2、MMP-9水平,上调γ-H2AX、p-p53水平有关。

大黄素对肝脏疾病的防治作用与安全性研究进展

大黄素是一种蒽醌类衍生物,是从何首乌、大黄等中药中提取得到的主要活性单体。现代药理研究证明,大黄素具有广泛的药理活性,其中对于肝脏疾病如肝脏炎症、肝癌、肝纤维化以及对各类肝损伤等均有良好的防治作用。然而在研究过程中,大黄素对肝细胞的潜在毒性作用也逐渐显现。因此,本研究综合近年来大黄素在肝脏上的研究,对其药理作用、机制及安全性进行综述,旨在为进一步安全有效地应用大黄素提供参考依据。