HPLC与LC-MS/MS测定蛹虫草发酵液中虫草素的方法比较

目的:通过高效液相色谱(HPLC)与液质联用(LC-MS/MS)测定蛹虫草发酵液中虫草素的方法比对,评价2种方法的可行性。方法:蛹虫草发酵液经大孔树脂分离纯化后,分别采用紫外检测器和质谱检测器对10种不同发酵液进行测定。结果:HPLC法测定发酵液中虫草素的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为13.6μg/L和53.6μg/L,LC-MS/MS法测得虫草素的LOD和LOQ分别为2.1μg/L和7.8μg/L,2种方法虫草素的保留时间分别为22.7min和7.8min,平均回收率分别为94.68%和93.91%。结论:两种方法灵敏度高、选择性好、操作简便,均可对蛹虫草发酵液中虫草素进行准确的定性定量分析。

不同碳源下蛹虫草的产量及虫草素和腺苷含量

为获得提高蛹虫草产量及虫草素和腺苷含量的最佳碳源及添加量,以蛹虫草菌株CM-16为研究对象,小麦为主要栽培基质,采用单因素分析法,研究不同碳源对蛹虫草的子座产量及虫草素和腺苷的影响。结果表明:在栽培基质中添加9g/L可溶性淀粉,蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的含量有显著提高,此时子座产量(以干质量计)达43.28g/盒,蛹虫草子座中虫草素和腺苷的含量最高,分别为3.43mg/g和2.38mg/g,而添加葡萄糖及蔗糖对其影响较小。碳源是影响蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷含量的重要因素,当以小麦为主要原料栽培蛹虫草时,淀粉为最优碳源。

固相萃取-HPLC测定外生菌根真菌产生植物激素IAA和GA_3

离体发酵培养条件下,外生菌根真菌产生的植物激素释放到培养液中,由于菌液成分复杂,高效液相直接测定培养液中的植物激素有一定困难,应用C18萃取小柱提取纯化培养液中菌根真菌产生的2种植物激素,选择出合适的液相色谱测定条件。结果表明,经过纯化富集,采用Waters SymmetryShieldTMRP18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以体积分数为35%的乙腈/水溶液(磷酸调pH至3.0)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,波长210 nm下检测,植物激素IAA和GA3分离效果理想,回收率分别大于96.8%和95.4%,最低检出限(S/N=3)分别为0.053和0.072 mg/L。

氮源和无机盐对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响

以小麦为主要栽培基质,通过添加不同的氮源和无机盐,选用优质蛹虫草菌株CM-16进行人工培养,探索这2个因素对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响。结果表明:栽培过程中选用6g·L^(-1)的蛋白胨作为最佳氮源,子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量均较高,分别为43.1g·盒^(-1)、3.95mg·g-1和2.35mg·g^(-1)。无机盐则选择1.0mg·L^(-1)的硫酸亚铁最为合适,此时子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量分别为48.8g·盒^(-1)、4.98mg·g^(-1)和2.10mg·g^(-1)。

基质用量和料水比对蛹虫草子座虫草素产量的影响

探索基质用量和料水比对蛹虫草子座中虫草素产量的影响,为蛹虫草的优质栽培提供依据。以蛹虫草菌株CM-16为研究对象,小麦为主要栽培基质,采用单因素和二次正交旋转组合设计2种分析法,研究基质用量和料水比对蛹虫草子座中虫草素产量的影响。结果表明,随着基质用量和料水比的增加,蛹虫草子座中虫草素的产量均呈先增加后降低的趋势,当基质用量为每盒350g,料水比(质量体积比)控制在1∶1.5时,蛹虫草子座中虫草素质量分数最高,为3.96mg/g。基质用量和料水比是影响蛹虫草子座中虫草素质量分数的重要因素,当以小麦为主要原料栽培蛹虫草时,小麦用量为每盒350g,最佳料水比(质量体积比)控制在1∶1.5。

HPLC法同时测定大蒜及蒜薹中的大蒜辣素和二烯丙基二硫

建立了同时测定大蒜和蒜薹中大蒜辣素和二烯丙基二硫的高效液相色谱测定方法。样品经超声辅助提取后,采用乙腈-水(60∶40)作为流动相,经过色谱柱symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,220 nm下检测。结果表明:大蒜辣素在13.75~275.00μg/m L(r=0.9997)范围内,二烯丙基二硫在0.65~26.00μg/m L(r=0.9995)范围内,线性关系良好;大蒜辣素和二烯丙基二硫的平均回收率分别为97.93%(RSD=0.45%)和98.13%(RSD=0.78%)。该方法样品前处理简单,测定快速,定性定量准确,回收率高,精密度好,适用大蒜及蒜薹中大蒜辣素和二烯丙基二硫含量的同时测定。

实验室大型仪器使用现状与效率探讨

西北农林科技大学生物技术中心实验室大型仪器设备的使用现状分析表明,必须从仪器购置论证、实验技术人员的队伍建设、服务意识、仪器的维护保养及仪器的开放共享等方面入手,强化对大型仪器的使用和管理,以提高实验室大型仪器的使用效率。

关于高校开设大型仪器培训课程的思考

本文以西北农林科技大学中心实验室为例,通过开设大型仪器设备应用培训课,从理论讲解到仪器演示,最后进行实验操作,帮助学生了解和掌握这门分析检测技术,为其在科研工作中利用此项技术进行科学研究打下基础。

HPLC法测定苹果树腐烂病菌发酵液中的有机酸和葡萄糖

建立了一种用高效液相色谱（HPLC）检测苹果树腐烂病菌发酵液中有机酸和葡萄糖的方法。采用Atlantis C18色谱柱（150mm×4．6mm，3．5μm），以5g／LNH4H2PO4（用磷酸调pH=2．5）溶液为流动相，流速为0．6mL／min，柱温30℃，应用紫外检测器检测有机酸，示差检测器来分析葡萄糖。在此色谱条件下，葡萄糖和有机酸能很好地被分离检出，平均回收率为96．2％-102．2％，精密度RSD（n=5）为0．26％-0．75％，每一样品的分析时间不超过15min。该方法能够简便、快速测定苹果树腐烂病菌发酵体系中有机酸及葡萄糖的含量。

关于农业院校大型仪器设备管理的探讨

通过对学校色谱类仪器的调研,提出农业院校大型仪器设备管理中存在重复购置、仪器设备开放共享力度不够,仪器设备利用率偏低、管理人员积极性不高等不足之处,并给出相应的解决措施,以提升大型仪器设备的管理水平,提高仪器设备利用率和使用效益。

反相高效液相测定小麦胚芽中的β-胡萝卜素

研究了反相高效液相法测定小麦胚芽中β-胡萝卜素,以Waters Symmetry300TMC18柱为固定相,以甲醇-乙腈-正己烷(20+70+10)为流动相进行三元等度洗脱,流速1.5 mL.min-1,柱温30℃,利用紫外2487检测器进行外标法检测,检测波长450 nm,方法平均回收率为98%,相关系数为0.999 8(n=6)。用该方法测定小麦胚芽样品中的β-胡萝卜素具有分析时间短,灵敏度高等特点。

皂荚果实中皂苷O的分离鉴定及毒性研究

采用乙醇提取、正丁醇萃取、常压硅胶柱反复层析的方法,并结合杀鼠活性追踪,从豆科植物皂荚(Gleditsiasinensis Lam.)的果实中分离到一个含有7个糖基的三萜皂苷,通过TLC、mp、IR、MS、1 H-NMR和13 C-NMR等方法鉴定为3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基齐墩果酸28-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-β-D-吡喃木糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[(6S,2E)-6-羟基-2,6-二甲基-2,7-辛二烯醇-(1→3)-(6′S,2′E)-6′-羟基-2′,6′-二甲基-2′,7′-辛二烯醇-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖酯[即皂荚皂苷O(GleditsiosidesO)]。对小鼠的急性毒性测定结果表明,试鼠对皂荚皂苷O经口灌胃的耐受量为160～400mg/kg,半数致死剂量LD50=249.52mg/kg,95%可信区间为224.81～276.95mg/kg;皂荚皂苷O对小鼠的急性毒性大于皂荚皂苷A。研究结果表明,皂荚皂苷O为皂荚的主要杀鼠活性成分。

现代新型扫描电镜灯丝的维护

本文主要介绍了影响扫描电镜钨灯丝寿命的因素,分析了频繁更换扫描电镜灯丝的危害,同时从样品干燥、预抽气、电镜观察时的参数设置等方面探讨了延长现代新型扫描电镜钨灯丝寿命的方法。

利用NMR技术同时测定几种果汁中的葡萄糖、果糖和蔗糖

采用核磁共振波谱分析技术,以邻苯二甲酸氢钾作内标,测定了几种果汁中葡萄糖、蔗糖和果糖的含量,与高效液相色谱法测定的其中3种果汁中葡萄糖、蔗糖和果糖的含量进行比较,结果表明,二者的测定结果无明显差异,核磁共振波谱法测定的葡萄糖、蔗糖和果糖的回收率达到了98.00%、97.31%和98.75%,标准偏差0.174、0.134和0.783,可以达到定量分析的要求。该法取样量少,样品不必进行任何处理,直接定性和定量测定,所得结果重现性好、准确度高,为葡萄糖、蔗糖和果糖的同时定量测定提供了一种简单可行的方法。

一株耐碱性芘降解菌的筛选及特性研究

以长庆油田油井口附近的土壤为材料,芘为唯一碳源和能源的BH培养基中分离到一株高效芘降解菌株b2,经形态学观察和16SrDNA测定,将其鉴定为分枝杆菌属(Mycobacteriumsp.)。研究发现,在培养温度为37℃、转速为175r/min,培养起始pH 10,接种量为2.0%时菌体生长较快。最佳培养条件下,在芘质量浓度为250mg/L的BH培养基中,经菌株b2降解4d后质量浓度下降76%。说明培养条件对菌株的生长和芘降解速度有明显的影响。

光条件对人工培养蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响

以蛹虫草菌株CM-16为研究对象,小麦为主要栽培基质,研究不同的光条件对蛹虫草的子座产量及虫草素和腺苷的影响。结果表明,当光照度为150lx时,子座产量及2种有效成分质量分数均较高,此时子座产量(以干质量计)达到每盒52.66g,虫草素和腺苷的质量分数分别为4.56mg/g和2.11mg/g;光照时间为8h/d时,子座产量及虫草素质量分数较高,此时子座产量达到每盒54.30g,虫草素质量分数为4.41mg/g,光照时间对腺苷的积累影响不大;蓝光有利于蛹虫草生长和子座积累虫草素,但其他光质对子座中的腺苷的作用没有太大差异。

蛹虫草子座培养剩余基质中虫草素提取工艺的优化

【目的】优化蛹虫草子座培养剩余基质中虫草素的提取工艺。【方法】以蛹虫草子座培养剩余基质为材料,采用二次通用旋转组合设计,研究提取温度、提取时间、液料比及提取液pH对虫草素提取得率的影响,建立虫草素提取得率与4个因素间的关系模型,分析其单因子和交互影响效应,通过参数优化得到虫草素的最佳提取工艺条件。【结果】4个因素对虫草素提取得率的影响大小依次为液料比>提取温度>提取液pH>提取时间。在最佳提取工艺条件下,即提取温度为63.3℃、提取时间为4.8h、液料比为36.8、提取液pH为6.7时,虫草素得率可达1.32‰。【结论】获得了从蛹虫草子座培养剩余基质中高效提取虫草素的优化工艺。

钛白副产绿矾生产聚合硫酸铁的研究

本文以钛白副产品绿矾为原料，氧化后，加入聚合剂生产聚合硫酸铁。该工艺具有反应时间短、操作控制方便、生产成本低和产品聚合度高等优点，同时又治理了钛白粉厂的环境污染，既有一定的经济效益，又有一定的社会效益。