乙型肝炎病毒血清标志物GICA检测性能的比对分析

目的评估乙型肝炎病毒血清标志物（HBV—M）胶体金免疫层析法（GICA）的分析性能。方法收集雅培i1000免疫检测系统检测的HBV—M阳性标本653例、阴性标本103例和HBV—M标准品，以化学发光免疫测定法（CLIA）检测结果为标准，分别用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂和5种GICA试剂检测，统计分析检测结果。结果检测HBV—M敏感性：ELISA和GICA检测HBV—M的最低检测限分别为乙型肝炎表面抗原（HBsAg）0．5IU／mL和4～8IU／mL、乙型肝炎表面抗体（抗HBs）10mlU／mL和15～30mlU／mL、乙型肝炎e抗原（HBeAg）1NCU／mL和2～4NCU／mL、乙型肝炎e抗体（抗HBe）2NCU／mL和64～256NCU／mL、乙型肝炎核心抗体（抗HBc）2IU／mL．和32—256IU／mL。检测标本HBV—M的符合率：ELISA分别为87．4％、99．0％、87．7％、96．6％、100．0％，GICA分别为69．6％～71．7％、69．0％～72．0％、70．5％～73．9％、42．2％～49．1％、50．0％～60．0％。检测HBV—M特异性：除GICA柃测抗HBs的特异性略差外，其余各HBV—M的检测特异性均是可接受。，结论GICA检测HBV—M低浓度的标本，漏检率很高，只能用于GICA检测线性范围里HBsAg的筛查，不能作为临床诊断乙型肝炎和疗效考核的依据。

用酶免疫法检测牛结核分枝杆菌的IgG抗体

目的 建立一种酶免疫法检测牛血清中牛结核分枝杆菌的IgG抗体。方法 从牛结核分枝杆菌中分离牛结核菌糖脂抗原 ,并固相在聚苯乙烯微量反应板上 ,将抗牛IgG单克隆抗体标记在辣根过氧化物酶。 结果 皮肤试验阳性 46头牛中 ,酶标阳性 30头牛。皮肤试验阴性 750头牛中 ,酶标阴性为 70 7头牛。

用斑点金免疫渗滤试验检测牛结核分枝杆菌IgG抗体

用牛结核分枝杆菌制备牛结核菌糖脂抗原 ,并固定在NC膜上 ,将牛IgG单克隆抗体与胶体金连接。通过临床检验 ,在结核菌素皮肤试验 99例阳性牛中 ,斑点金免疫渗滤试验阳性 60例 ;皮肤试验 13 9例阴性牛中 ,金标阴性 111例。该法简便快速 。

金标AFP诊断试剂盒的研制

金标ＡＦＰ诊断试剂盒的研制上海临床检验中心（２０００５２）简敏华，徐肇华，邱留娣检测血清甲胎蛋白（ＭＰ）是临床肝癌辅助诊断和早期发现肝癌的手段之一。国内最常见的检测方法是ＥＬＩＳＡ和ＲＩＡ。但这两种方法耗时长，操作步骤多，并且需要一定的仪器和设备，适...

上海地区自身抗体检测质量现状调查分析

目的了解上海地区自身抗体检测的质量现状,以便对其检测技术进行规范。方法分2次共发放8个调查样本,要求各临床实验室在规定的时间内检测抗核抗体(ANA)和抗可提取核抗原(ENA)抗体,并按时回报结果。结果开展ANA检测项目的32家实验室均采用间接免疫荧光法,结果总符合率为98.1%,其中阳性结果符合率为96.9%,阴性结果符合率为100.0%。混合核型类样本的次要核型检出率偏低。阳性样本各实验室回报的滴度结果差异较大。开展抗ENA抗体检测项目的38家实验室均采用免疫印迹法,结果符合率为76.3%,抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗干燥综合征抗原A(SS-A)抗体、抗干燥综合征抗原B(SS-B)抗体检测结果总符合率低于其他抗体,试剂质量参差不齐。结论自身抗体检测的质量有待提高,其检测技术有待规范。

改良即刻法用于酶联免疫吸附试验室内质量控制的探索

目的建立一种适用于酶联免疫吸附实验(ELISA)室内质量控制(IQC)的方法。方法采用即刻法和用控制变异系数(CV)的方法(改良即刻法)同时统计初始阶段的质控数据,制作质控图。结果检验方法学的CV在15%左右,前3个质控数据的CV<5%时,采用即刻法统计随后的结果会出现假失控,前3个质控数据的CV>10%时,随后的结果会出现假在控。采用改良即刻法统计,只要设定好一个实验室或一个地区的允许CV值就没有假失控和假在控的结果。结论改良即刻法适用于CV较大、检测频次较低的免疫学检验项目IQC初始阶段的统计,操作简便易行。

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原临界样本复检范围的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)临界样本的复检范围。方法收集用ELISA初检HBsAg吸光度(A)值在0.07～2.00范围内的样本,用ELISA复检;初、复检结果不符和2次结果均在临界的样本,用微粒子酶免疫法(MEIA)进行复核,并用中和法做确认试验。统计分析结果,选择一个合适的样本复检范围。结果样本初检结果A值在0.070～0.104、0.105～0.300范围内,ELISA复检符合率分别为85.2%、56.9%;MEIA与ELISA复检结果的符合率分别为90.1%、93.9%。A值在0.301～0.500、0.501～1.000、1.001～1.500、1.501～2.000范围内,ELISA复检符合率依次为88.3%、93.8%、99.1%、99.2%,MEIA与ELISA复检结果的符合率为100%。确认试验和MEIA复检结果的符合率样本测定值(S)/阴性对照值(N)在1.50～1.99、2.00～5.00,分别为50.0%和92.7%,其他组均在97.1%以上。结论在操作规范化的实验室内,ELISA初检HBsAg复检范围宜选择样本A值在0.070～0.300范围内;大批量体检时,复检范围应放宽至0.070～0.500;乙肝标志物模式异常的样本也需复检。规定适宜的复检范围既能确保检测结果的准确性,又能避免人力和试剂等物品的浪费。

酶联免疫吸附试验定性检测乙肝表面抗原测量不确定度评定的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝表面抗原(HBsAg)测量不确定度的评定。方法用4种市售手工法ELISA试剂检测HBsAg定值标准品(1、2 IU/mL)和室内质控品,分析测量过程的不确定度分量,合成各试剂盒检测系统的扩展不确定度。结果4种试剂检测1、2 IU/mL标准品的批内测量的扩展不确定度为24.4%、27.4%、17.4%、14.4%和18.8%、24.0%、19.4%、23.8%[包含因子(K)=2]。检测质控品的总扩展不确定分别是24.8%、29.8%、30.2%、32.8%(K=2)。结论含有测量不确定度的结果基本能反映测量的真实水平,有助于了解目前国产ELISA试剂手工法检测低水平HBsAg的实际情况。

与α-烯醇化酶相关的抗内皮细胞抗体ELISA的建立及临床初步应用

目的建立与α-烯醇化酶(ENOI)相关的抗内皮细胞抗体(AECA)的酶联免疫吸附试验(ELISA),并探讨ENOI-AECA与自身免疫性疾病的关系。方法人工合成获得人ENOI基因编码序列并克隆该片段构建pUC57-ENOI重组质粒,再将重组质粒亚克隆入原核表达载体pET28(a),回收酶切产物并经T4DNA连接酶连接,获得的重组表达质粒pET28(a)-ENOI,在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达蛋白,Ni NTA亲和层析纯化重组ENOI蛋白。以纯化的重组蛋白为包被抗原,并对ELISA反应条件进行优化,初步建立检测ENOI-AECAELISA并作分析性能评价。用建立的方法分别检测健康人及系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)患者血清中的ENOI-AECA。结果获得了相对分子质量为47 000的高纯度人ENOI重组蛋白。ELISA抗原最佳包被浓度为5μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶50。以免疫印迹法为参照,所建方法的敏感性和特异性分别为76.0%和90.2%。SLE和RA患者血清中ENOI-AECA的阳性率分别为23.1%和57.1%;RA组ENOI-AECA阳性率与健康对照组比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论以人ENOI重组蛋白为抗原建立的检测ENOI-AECA的ELISA有较高的敏感性和特异性,可用于ENOI-AECA的检测。ENOI-AECA阳性提示患者可能患有自身免疫性血管炎。

双抗体夹心ELISA测定人广泛型线粒体肌酸激酶方法的建立

目的建立测定人血清广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法应用原核表达的uMtCK重组蛋白免疫小鼠获得7株单克隆抗体,采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合,其中抗体19F11进行辣根过氧化物酶(HRP)标记作为检测抗体,抗体3C1作为俘获抗体,建立检测人uMtCK双抗体夹心ELISA方法,并进行方法学评价。同时采用该法检测50名健康体检者和85例肿瘤标志物[甲胎蛋白(AFP)或癌胚抗原(CEA)]阳性患者的血清。结果通过筛查获得配对抗体,建立检测人uMtCK的双抗体夹心ELISA方法。该法的检测限为28.8 ng/mL,批内变异系数(CV)为4.5%～7.7%,批间CV为8.2%～13.5%,平均回收率为97.1%。用该法检测50名健康体检者血清uMtCK浓度,结果均为阴性;85例肿瘤标志物阳性患者中有15例检出uMtCK,浓度为52.8～1 442.2 ng/mL。结论建立的双抗体夹心ELISA可以用于测定人血清uMtCK浓度。

基于高中化学学科核心素养下的化学平衡常数的教学研究

通过对人教版选修4第三章第三节的一道例题的改编,利用三态分析法分析可逆反应在等温、起始浓度不同的条件下的平衡移动情况,预测达到平衡后两个平衡状态的不同;由浅入深地将"变化观念与平衡思想"思维方式渗透到教学当中,加深学生对化学平衡常数的理解。

动物血清替代人血清制备乙肝标志物室间质评物的初步研究

目的尝试制备以胎牛血清(FCS)替代人血清为基质的乙型肝炎病毒(HBV)标志物室间质评样本。方法以FCS作为基质稀释人血清HBV标志物高值样本制备室间质评样本,并对制备样本进行基质效应和互换性实验、均匀性和稳定性评估及初步临床应用。结果使用两种检测方法验证制备样本的可互换性,检测值分布于95%可信区间内,相关性很好。雅培i1000全自动免疫分析仪检测HBV 5个项目[乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)]制备物结果的F值均<F界值(F界值=3.02),保存于-20℃和4℃时可稳定1个月以上。20家使用化学发光法[ABBOTT i2000全自动免疫分析仪(简称ABBOTT i2000)]和20家使用酶免法(科华试剂)的实验室HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的变异系数(CV)分别为ABBOTT i2000仪器组7.60%、7.79%、6.37%、13.30%、3.61%,科华试剂组11.67%、14.72%、9.11%、12.30%、9.75%。结论通过试验验证以FCS为基质制备的质评样本的互换性、稳定性和均匀性满足室间质评样本要求,初步认为FCS在一定程度上可以作为基质用于HBV标志物室间质评样本的制备。

不锈钢管的尺度公差及其实测控制(下)——中外不锈钢管标准细节比较研究之三

外径、壁厚、定尺长度(支长)及壁厚均匀度、直度等是不锈钢管生产和流通中需要关注的基本尺寸参数。比较了欧盟、美国和我国国家标准对不锈钢管的基本尺寸参数及其公差规定的某些差异,详细分析了美国标准中独特的不锈钢管标重公差的实际意义、放宽薄壁不锈钢管圆度公差和严格厚壁不锈钢管壁厚均匀性公差的合理性,讨论了外径和壁厚的实际测量方法,以及矫直可能给不锈钢管的耐蚀性带来的损害。

不锈钢管的尺度公差及其实测控制(上)——中外不锈钢管标准细节比较研究之三

外径、壁厚、定尺长度(支长)及不圆度、壁厚均匀度、直度等是不锈钢管生产和流通中需要关注的基本尺寸参数。比较分析了欧盟、美国和我国国家标准对不锈钢管的基本尺寸参数及其公差规定的差异。详细分析了美国标准中独特的不锈钢管标重公差的实际意义、放宽薄壁不锈钢管不圆度公差和严格厚壁不锈钢管壁厚均匀性公差的合理性,讨论了外径和壁厚的实际测量方法,以及校直可能给不锈钢管的耐腐蚀性带来的损害。

不同的方法检测甲胎蛋白和癌胚抗原的结果比对分析

目的:了解不同方法检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)的结果,制定质量控制计划,提高检测结果的可比性。方法:收集不同水平的AFP和CEA血清,采用室间调查的方法,统一发放样品。各实验室在规定的时间内按日常检验方法进行检测和回报结果。按检测方法分类进行结果统计。结果:按定性方法统计,AFP阴性、弱阳性、阳性样品的符合率均为100%;CEA样品的符合率依次为阴性100%,弱阳性60%,阳性85%。按定量方法统计,不同的方法检测AFP的变异系数(CV)为9.9%～73.9%,检测CEA的CV为11.5%～65.3%。结论:不同的方法检测AFP和CEA的结果可比性较差,提示应加强质量控制,提高检验质量,使检验结果间有较好的可比性。

新旧人教版教材栏目对比分析及教学应用——以“氯及其化合物”为例

随着《普通高中化学课程标准(2017年版)》的颁布,2019年人教版普通高中化学教科书也已投入使用。新教材相对于2004年版的旧教材在学习内容的编排、呈现方式,特别是主要栏目的设置上,有了较大的改进。新教材主要栏目的设置在充分落实新课程标准的基础上,有机融合了化学学科核心素养的培养。本文从栏目编排设置、教学功能与价值等方面将新教材必修第一册与旧教材进行对比分析,并以“氯及其化合物”一节为例进行具体的、结合教学实践的研究,并给出在教学过程中使用教材栏目的建议,希望教师能更好地利用栏目设置开展教学。

四种国产乙型肝炎表面抗原定量检测试剂对弱阳性样本检测结果的一致性比较

目的比较4种国产HBsAg定量检测试剂与ARCHITECTi2000免疫检测系统对HBsAg弱阳性样本检测结果的一致性及检测值之间的相关性。方法采用4种国产发光法检测系统和i2000检测系统分别检测185例HBsAg弱阳性血清标本以及不同浓度HBsAg的标准品。应用描述性统计和相关分析计算不同试剂分析结果的精密度、一致性和相关性。结果4种国产发光法检测系统对i2000检测系统定量为0．05～1．00IU／ml的弱阳性结果判断的符合率分别为25．93％、35．19％、51．85％和18．52%；对定量为〉1．00～10．00IU／ml的弱阳性结果判断的符合率分别为71．76％、87．79％、95．42％和69．47％。4种国产试剂均检测阴性的标本为i2000检测值在0．05～0．80IU／ml的低值阳性标本；i2000检测结果≥7．93Iu／ml的样本，4种国产发光法检测系统符合率为100％。国产试剂检测结果之间的相关性分析结果显示，其相关系数为0．8629～0．9265。结论国产检测系统的分析灵敏度略低于i2000检测系统，检测值≤0．80IU／ml的样本不能给出与i2000一致的检测结果；对于≥7．93IU／ml的样本，国产试剂均可给出与i2000一致的结果。