应用基因枪将蚕抗菌肽基因导入水稻获抗白叶枯病株系

将天蚕抗菌肽Ｂ基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚，获得转基因植株。经Ｂａｓｔａ抗性鉴定，应用ＰＣＲ技术和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分折表明，抗菌肽Ｂ基因已整合到水稻的基因组。Ｔ３抗白叶枯病株系Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分折证明抗菌肽Ｂ基因在ＲＮＡ水平有表达。

转基因水稻外源基因的遗传和表达初步研究

将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽种胚 ,获得转基因植株 2株 .转基因水稻T1～T55个世代不同株系 ,对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究 .结果表明 :转基因后代株系barR∶barS 大部分符合 3∶1分离比率 .T1、T4 转基因株系PCR、Southern印迹分析表明 :T18株有抗菌肽B基因 ;T4 仍有 4个株系有抗菌肽基因 ,其他的株系基因丢失 .T3 1个株系Northern印迹证明抗菌肽基因在RNA水平有表达 ;抗菌肽B转基因水稻对白叶枯病的抗病性有提高 ,抗性能传递到高世代 ,在T3

吉林省野生大豆对根瘤农杆菌致瘤反应的研究简报

自从1907年Smith和Townsend首次提出由根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)引起的植物冠瘿病(Crown gall)的病原学以来,对该菌的核外遗传物质Ti质粒(TUmer initiation plasmid)的研究,引起了人们的广泛注意。1981年美国的Kemp和Hoack等,以Ti质粒为载体,将菜豆的蛋白质单基因成功地导入到向日葵,培育成功了“向日豆”,为Ti质粒作为遗传工程的载体,开辟了广阔的前景。

大豆花药培养的研究 第二报:合成培养基的选择

在大豆花药培养研究中,国外至今还未见获得大豆花粉植株的报道,美国 Ivers.D.R.1974年发表“大豆花药培养”一文中也没有发现胚状体或植株,同时认为愈伤组织是由二倍体的组织形成的。1977年我们在全国第二次花药培养会上报导了1976年、1977年大豆花药培养获得了芽状体,从离体的花药中观察到花粉细胞均等分裂以至形成圆球胚一系列变化。

铜在水稻愈伤组织培养中的作用的进一步研究

以籼稻栽培品种秋桂矮１１的愈伤组织为材料，对铜元素的作用作了进一步的研究。在含有２，４-Ｄ和脯氨酸的培养基中添加银元素对愈伤组织的增殖量影响极小，但转移到再分化培养基后这些愈伤组织能再生出显著更多的植株。另一方面，在含有ＢＡ、ＮＡＡ和脯氨酸的培养基中添加钢元素则会由于添加量的不同而产生显著的促进或抑制愈伤组织增殖的作用。然而，不论是增殖受过铜的促进的或者是抑制的愈伤组织，均能在再分化培养基上再生出数量更多和质量更好的植株。

铜在水稻愈伤组织培养再生植株中的促进作用(英文)

在培养基中添加各常用微量元素的实验结果表明，只有铜元素具有明显的促进水稻愈伤组织植株再生的作用。铜元素不仅能提高再生植株频率和数量，还能提高再生植株的重量，其作用浓度的范围相当宽广。采用添加５μｍｏｌ／Ｌ铜元素的方法调查另外１５个品种的培养效果，发现其中有８个对铜元素的正向反应达到了统计学上的显著水平。据此认为，提高培养基中铜元素浓度是一种增强水稻愈伤组织植株再生的简单和有效的方法。

大豆原生质体的植株再生

酶法分离大豆(Glycine max L.)植株的幼荚子叶和无菌苗子叶的原生质体。用 K8P原生质体培养基悬滴培养,K8培养基加液。1个半月形成愈伤组织,转入固体 K8培养基中增殖,用 MSB(MS 无机成分+B5有机成分+0.5—1mg/l 2,4-D+0.2—0.5mg/l BA)培养基诱导瘤状愈伤组织的形成,再转入分化培养基 M_1(MS 无机成分+B5有机成分+0.5mg/l TZ+0.5mg/l BA+0.5mg/lKT+0.15mg/l NAA+500mg/l CH)中分化出苗。在 M_2培养基(1/2MS+0.2mg/l IBA)中生根,分化频率为13.6—24.2%,移栽盆中开花结荚。有两个大豆品种的幼荚子叶原生质体培养再生植株。

水稻原生质体愈伤组织再生植株培养程序的比较

在 4种不同的培养程序中应用了几种处理方法 ,并对其在诱导水稻原生质体起源的愈伤组织再生植株中的效果进行了比较。直接将愈伤组织从含有 2 ,4 - D的增殖培养基转移到含有 BA和 NAA的植株再生培养基上培养 ,只能得到少量的弱苗 (第 1种程序 )。在增殖培养基中添加 ABA诱导了结节状的愈伤组织形成 ,使愈伤组织的植株再生能力明显加强 (第 2种程序 ) ;而在植株再生培养基中添加ABA则使愈伤组织变得紧结并形成生长受抑制的不定芽 ,当这些愈伤组织被转移到不含 ABA的生长培养基后 ,不定芽开始快速生长 (第 3种程序 )。先将愈伤组织培养在含有 ABA的增殖培养基上 ,然后相继转移到含有 ABA的植株再生培养基和生长培养基上 ,可以取得大量健壮的再生苗 (第 4种程序 )。统计结果显示 ,第 2和第 3种程序的培养效果比第 1种程序要好 ,而第 4种程序的培养效果则比其他程序好得多。

柞蚕抗菌肽对水稻白叶枯病菌的抑制作用

柞蚕蛹诱导含抗菌肽的免疫血淋巴,对水稻白叶枯病病原细菌(X(?)(?)pv (?))有明显的抑菌作用,对中国白叶枯病菌Ⅳ群强致病力菌株(RX77)的抑菌圈直径达12mm。电镜观察抗菌肽作用于白叶枯病菌能使其细胞膜破坏,内容物渗出而致死亡。处理10～30min即有效果。将抗菌肽与白叶枯病菌按不同比例混合后接种于水稻秧苗及孕穗期的叶子上,20天后调查病斑平均长度,经方差分析认为抗菌肽对病菌致病力有显著的减弱作用。

提高籼稻愈伤组织诱导率和增殖率的研究

以秋桂矮11、华籼占、万籼占45等3个籼稻品种的种子为外植体,消毒后接种在不同培养基上,(25±1)℃下暗培养20～30天后比较不同品种愈伤组织的诱导率,再将愈伤组织继代培养20天后调查其增殖率.结果表明,在NMB培养基中添加2.5～3.0 mg/L 2,4-D有利于提高籼稻愈伤组织诱导率,添加脯氨酸、水解酪蛋白等营养物有利于提高万籼占45的愈伤诱导率,但对提高秋桂矮11、华籼占的愈伤诱导率影响不大;在NPCS培养基(NMB+0.5g/L 脯氨酸+0.3 g/L水解酪蛋白+3～5 g/L 山梨醇)继代培养1～2次,以30 g/L麦芽糖为碳源、2,4-D浓度为2.5 mg/L时,籼稻愈伤组织活性明显提高,其胚性愈伤组织的增殖率最大.

利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选

尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库.利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11,获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1486个转化植株.随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选,结果表明所有植株均呈抗性,并且与PCR检测结果相吻合,说明T0植株中不存在假转化体.Southernblot分析结果表明T0植株大部分为单位点整合.T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异,如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等.利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选,得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体,该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50%,每穗颖花总数比对照减少约40%,二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70%.

植物的乙醇代谢及其在农业生产上的意义

简明地介绍了植物的乙醇代谢研究的最新进展，并就其中几个主要问题进行了较为深入的探讨。在总结有关文献的基础上，作者认为在乙醇代谢过程中，醛脱氢酶是关键性酶，而另外二种必要的酶，即乙醇脱氢酶和乙酸－辅酶Ａ连接酶在该过程中没有决定性的作用；醛脱氢酶在组成、活性以及对乙醛底物的特殊亲和性上的差异是造成不同植物种间在乙醇代谢能力方面存在着差别的原因。由于植物可通过对乙醇的代谢来减轻由无氧呼吸产生的乙醇对细胞的伤害和减少因乙醇逸出体外而造成的碳源和能量的损失，因此，开展植物组织乙醇代谢研究在农业生产上。

大豆叶肉细胞原生质体的游离和培养

植物体细胞杂交由于能通过不同科、属、种植物原生质体融合和引入外源遗传物质,具有改良植物经济性状和创造植物新类型的可能和巨大潜力,而引起国内外广泛注意。这一研究的首要环节是,必须获得大量的原生质体,并促进原生质体再生植株。近十多年来,这方面的研究发展迅速,目前原生质体可以从许多植物中游离出来,有三十多种植物的原生质体通过培养再生或完整植株。

君子兰无性繁殖的研究

君子兰在吉林省是一种很受人们欢迎的观赏植物。它是异花授粉植物。我们拟通过组织培养技术进行大量快速繁殖。本文研究了外植体的选择,明确了萌发的种子、种胚、茎尖都适做快速繁殖的外植体,经离体培养能产生不定芽或愈伤组织。用种子、种胚、茎尖做外植体的已被诱导出植株,并诱导生根移至土壤中。MS为基本培养基。

籼稻体细胞胚胎发生形态鉴别的研究

以籼稻品种秋桂矮１１发芽种子的幼芽基部为外植体，以Ｎ６培养基附加２，４—Ｄ２ｍｇ／Ｌ和脯氨酸０～４０ｍｍｏｌ／Ｌ诱导愈伤组织，对愈伤组织进行了立体解剖、扫描电镜观察和ＧＭＡ塑料薄切片观察。结果表明，愈伤组织可分为胚性、中间型和非胚性３大类；胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织在外观特征和内部结构方面都存在显著差异，前者明显分化成６类细胞，其中包括传递细胞；后者分化程度低，且没有观察到传递细胞；中间型愈伤组织处于不稳定状态，可向胚生与非胚性２个方向转化。体细胞胚胎发生经历了原胚（二细胞、四细胞、多细胞）、梨形胚、盾片分化期胚和成熟胚等时期。讨论了愈伤组织形态鉴别的有效性、传递细胞在体细胞胚胎发生过程中的可能作用和胚性细胞及体细胞胚的特点。

普通野生稻胚性细胞悬浮系的建立及原生质体再生植株

广西普通野生稻(Oryza rufipogon)2个品种的成熟种子经54±1℃温度处理5d打破休眠后,诱导产生出愈伤组织。挑选胚性愈伤组织置于液体培养基中振荡培养。经6个月继代培养,建立起胚性细胞悬浮系。其中1个品种(No.40)的悬浮细胞经酶解游离获得大量原生质体,用琼脂糖包埋培养,2周内分裂频率达21.4％。形成的小愈伤组织经增殖后在分化培养基上再生出绿色小植株。

籼稻原生质体游离培养及再生植株

籼稻(Oryza sativa L.)推广品种“秋桂矮11”成熟种胚在N6+2,4-D培养基上诱导选择胚性愈伤组织,然后转入N6+2,4-D及高浓度脯氨酸的液体培养基悬浮培养。继代近6个月后建成胚性细胞悬浮系.悬浮细胞通过酶解游离产生大量原生质体,经合适渗透压的KpR琼脂糖培养基包埋,在无哺育培养条件下,分裂频率为11.36％,细胞克隆转至N6分化培养基再生出完整绿色小植株,分化频率为9.4％。

作物原生质体培养研究的进展

作物原生质体培养技术是细胞融合、细胞器移植和基因转化的重要基础,在植物遗传工程研究中占有十分重要的地位。目前,由原生质体再生植株的植物种类已超过150种。过去成株的植物大部分属双子叶的茄科、伞形科、十字花科、芸香科;单子叶的禾本科以及双子叶重要农作物原生质体培养停滞不前。近十年国内外科学家努力下,先后解决了几乎全部重要粮食及棉油作物原生质体再生的难题。